1、小麥(Triticuma aestivum L.2n=42)是人類賴以生存的四大作物之一，世界上1/3以上的人口以小麥為主食，小麥的產(chǎn)量直接關(guān)系到人類的生存問題，并在國民經(jīng)濟(jì)中起重要的作用。
　　 在各種非生物脅迫中，鹽脅迫對植物的影響尤為突出。因鹽害造成的作物減產(chǎn)和品質(zhì)下降是糧食生產(chǎn)中亟待解決的難題。小麥為甜土植物，其抗鹽性受復(fù)合多基因遺傳性狀遺傳，且與品質(zhì)優(yōu)劣、產(chǎn)量高低等性狀緊密連鎖，采用常規(guī)育種方法來提高抗鹽性，獲得抗鹽性

2、強(qiáng)的優(yōu)良新品種十分困難。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，利用基因工程手段改良植物抗鹽性，選育抗鹽品種，在未來農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有廣闊前景。
　　 轉(zhuǎn)錄因子是一類能夠與真核基因啟動子區(qū)域中的順式作用元件相結(jié)合，與相關(guān)基因的表達(dá)調(diào)控相關(guān)。其中，鋅指蛋白類轉(zhuǎn)錄因子種類繁多，且在抗旱、抗凍及抗鹽脅迫中發(fā)揮重要作用。本研究所用的鋅指蛋白TaCHP基因克隆自本課題組選育的耐鹽漸滲小麥新品種山融3號(SR3)，該品系是通過不對稱體細(xì)胞雜交技術(shù)，將耐鹽禾草(長

3、穗偃麥草Agropyron elongatum2n=70)的染色體小片段或/和DNA漸滲入普通小麥濟(jì)南177(JN177)基因組得到的。前期在擬南芥研究中發(fā)現(xiàn)，生長在含有100和150mM NaCl的培養(yǎng)基上的擬南芥轉(zhuǎn)TaCHP基因植株，葉片和根系的生長都好于對照。
　　 本論文利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的生長點(diǎn)法，將構(gòu)建于pUN1301載體上的TaCHP基因，對不同品種小麥進(jìn)行基因轉(zhuǎn)化。
　　 1.采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的生長點(diǎn)法，對5種

4、不同基因型的小麥進(jìn)行TaCHP基因的轉(zhuǎn)化；分別成活種苗：濟(jì)麥17(430棵)、濟(jì)麥22(552棵)、揚(yáng)麥15(240棵)、龍麥30(520棵)、周麥(408棵)；以100mg/L潮霉素，涂抹兩葉一心的T0代轉(zhuǎn)基因小苗，不同基因型的五種小麥潮霉素抗性出現(xiàn)差異。
　　 2.以UTA和TF8S引物進(jìn)行轉(zhuǎn)化苗的PCR檢測，分別得到的T0代種子33、58、3、17、0粒，該結(jié)果說明生長點(diǎn)轉(zhuǎn)化法存在基因型依賴性。繼續(xù)對T1和T2代轉(zhuǎn)化苗進(jìn)行

5、PCR檢測，發(fā)現(xiàn)外源目的片段的插入率逐漸降低，可能是嵌合體的影響或外源基因插入到葉分生組織靶細(xì)胞所致。
　　 3.通過溫室加代培養(yǎng)T2代陽性植株至T4代，選取southern雜交檢測為陽性的植株，通過RT-PCR對TaCHP基因的表達(dá)進(jìn)行分析。利用200mM的NaCl對轉(zhuǎn)基因小麥處理0，3，6，12，24h，發(fā)現(xiàn)該基因在轉(zhuǎn)基因小麥的根和葉的表達(dá)量隨處理時間增加，成上調(diào)趨勢。
　　 4.用0，100，200mM NaCl處