1、為探究光照對(duì)母雞生產(chǎn)性能影響的神經(jīng)調(diào)節(jié)機(jī)制,為科學(xué)利用光照促進(jìn)養(yǎng)雞業(yè)進(jìn)一步發(fā)展提供理論基礎(chǔ),本研究采用HRP逆行標(biāo)記以及免疫組織化學(xué)法細(xì)胞核FOS核蛋白的檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合的方法,對(duì)母雞離頂蓋通路對(duì)不同強(qiáng)度光照刺激的反應(yīng)進(jìn)行了研究。禽類是最依賴視覺系統(tǒng)的脊椎動(dòng)物,禽類離頂蓋通路是其主要的2個(gè)平行視覺信息加工通路之一,包括視網(wǎng)膜、視頂蓋、圓核和外紋體等。實(shí)驗(yàn)采用120日齡母雞,右眼遮光5 d后引入HRP,48 h后進(jìn)行不同強(qiáng)度的光照刺激1～1

2、.5 h,暗適應(yīng)1.5h后灌流固定,取腦制作連續(xù)冰凍切片,根據(jù)HRP逆行標(biāo)記神經(jīng)元,免疫組化方法檢測(cè)c-fos基因在丘腦圓核、間腦視頂蓋和SP／IPS核的表達(dá)水平、出現(xiàn)方式、部位和數(shù)量分析推斷母雞離頂蓋視覺通路對(duì)不同強(qiáng)度光信息的傳導(dǎo)通路和功能活動(dòng)區(qū)域,以及對(duì)母雞離頂蓋視覺通路c-fos基因表達(dá)的影響,并且為進(jìn)一步探究打下基礎(chǔ)。
　　 本研究表明：HRP逆行標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞呈圓形、橢圓形或多角形,其陽性細(xì)胞主要分布在雞腦左側(cè)視頂蓋SG

3、C層和項(xiàng)蓋前下核／項(xiàng)蓋前間下核(SP／IPS核)。當(dāng)HRP注射位點(diǎn)位于ROT核吻側(cè)部時(shí),SGC層淺層、SP／IPS核內(nèi)側(cè)部陽性細(xì)胞聚集；注射位點(diǎn)于ROT核背尾側(cè)部時(shí),SGC淺層、SP／IPS核外側(cè)部陽性細(xì)胞聚集；注射位點(diǎn)于ROT核中央部時(shí),SGC層中間層以及SP／IPS核外側(cè)部陽性細(xì)胞較多,注射位點(diǎn)于ROT核腹尾側(cè)部時(shí),SGC層深層及SP／IPS核外側(cè)部陽性細(xì)胞較多。免疫組化方法檢測(cè)到試驗(yàn)組中母雞間腦和中腦內(nèi)有大量Fos樣免疫反應(yīng)陽性神

4、經(jīng)元且Fos樣免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞核及核膜呈棕黃色或棕黃色顆粒沉積,胞質(zhì)、軸突、樹突未見顯色,胞核胞質(zhì)分界明顯,各核團(tuán)神經(jīng)元胞體主要為三角形、卵圓形、紡錘形和梨形,主要分布在雞腦左側(cè),包括視頂蓋中央灰質(zhì)層(SGC),圓核(ROT),SP／IPS核,試驗(yàn)組顯著表達(dá),對(duì)照組少見或未見陽性神經(jīng)元散在分布,陰性對(duì)照切片未見Fos樣免疫反應(yīng)陽性物質(zhì)。通過結(jié)合分析HRP逆行標(biāo)記細(xì)胞以及Fos樣免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元分布的區(qū)域、密度、重疊性,探討不同強(qiáng)度光照

5、對(duì)母雞離頂蓋視覺通路c-fos基因表達(dá)的影響,發(fā)現(xiàn)不同強(qiáng)度光照誘導(dǎo)的母雞離項(xiàng)蓋視覺通路c-fos基因表達(dá)水平不同,其中30 lx組SGC層、ROT核表達(dá)水平較高,40 lx組略有下降,20 lx組、10 lx組次之,在40 lx組SP／IPS核表達(dá)水平較高,30lx組、20lx組、10lx組次之。對(duì)SGC層、SP／IPS核、ROT核不同部位100μm×100μm面積內(nèi)受不同光刺激誘導(dǎo)的Fos樣免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元光密度值進(jìn)行t檢驗(yàn),得出在

6、10 lx與20 lx,20 lx與30 lx,30 lx與40 lx,10 lx與30 lx,10 lx與40 lx,20 lx與40 lx之間差異顯著(P<0.05),反映了各核團(tuán)Fos樣免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元表達(dá)與不同強(qiáng)度的光刺激有關(guān),并且在SGC層的不同深度,對(duì)光刺激的敏感性不同,其中以SGC層深層對(duì)光刺激敏感性最弱,并在光照強(qiáng)度為30lx時(shí)達(dá)到c-fos基因表達(dá)的高峰,經(jīng)HRP逆行追蹤顯示,SGC深層視神經(jīng)元可經(jīng)兩條路徑分布投射至

7、ROT核,一為直接投射至ROT核腹尾側(cè)部,一為經(jīng)SP／IPS核投射至ROT核。SGC深層視神經(jīng)元所投射至的ROT核腹尾側(cè)部,對(duì)光刺激敏感性較ROT吻側(cè)部、中央部、背尾側(cè)部低,并且ROT核在30 lx達(dá)到c-fos基因表達(dá)的高峰。SP／IPS核可分為內(nèi)側(cè)和外側(cè),分別在光刺激強(qiáng)度為40 lx時(shí)c-fos基因表達(dá)產(chǎn)物最多,但內(nèi)側(cè)較外側(cè)表達(dá)明顯,SP／IPS-圓核投射是具有部位對(duì)應(yīng)的局部地域有序投射。綜合分析光照刺激誘導(dǎo)母雞離頂蓋視覺通路c-f