黃瓜白婁病抗性基因的分子標記研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、黃瓜,世界上目前栽培最為廣泛的蔬菜之一,人民生活中最常見的一種蔬菜。黃瓜白粉病(Podosphaeva xanthii Syn.Sphaerotheca fuliginea)是一種潛伏期短、再侵染速度快、流行性強的世界性黃瓜主要病害之一,特別是隨著保護地的發(fā)展,該病危害越來越嚴重,在我國南北各地的黃瓜主產(chǎn)區(qū)幾乎周年性地頻繁發(fā)生,造成嚴重經(jīng)濟損失,也成為綠色有機生產(chǎn)的主要障礙。安全、環(huán)保和高效地控制黃瓜白粉病的根本措施就是培育出高抗白粉病

2、新品種。由于黃瓜白粉病的病原屬于專性活體寄生菌,而且發(fā)病情況受環(huán)境影響較大,導致田間抗性鑒定與篩選的效率低、周期長。與田間鑒定相比,分子標記輔助篩選具有不受環(huán)境影響、早期、快速和高效的優(yōu)點。隨著分子生物學的研究的不斷深入,對育種來言,篩選到與黃瓜白粉病抗性基因緊密連鎖的分子標記有重大意義。
   隨著分子生物學技術(shù)的不斷發(fā)展,黃瓜白粉病病的研究有了新的手段和方法。
   我們以抗病品系“11-1-2-8-1-2-1-2(

3、M1)”和感病品系“6-1-1-1-1-1-2(M2)”及其構(gòu)建的F2代群體為基礎(chǔ)材料,利用AFLP、SRAP、兩種分子標記方法進行黃瓜白粉病抗病基因的分子標記的研究,結(jié)果如下:
   (1)對雙親及其雜交后代抗病性鑒定結(jié)果表明,F(xiàn)2群體中有6株表現(xiàn)為抗白粉病菌、159 株表現(xiàn)為感病,41株表現(xiàn)為中間類型即中抗類型,經(jīng)適合性測驗群體抗感分離比例基本符合1:3:12模式(χ2=3.95,P≦0.05)。可推測黃瓜白粉病抗性由1對隱

4、性主基因(s)和1對顯性抑制基因(I)共同控制,并且I基因的表達受環(huán)境影響。當I存在且處于有利于其表達的環(huán)境時,I抑制了S和s基因表達,植株表現(xiàn)為感病,感病植株基因型為S_I_和ssI_。當I不存在時(即ii),純合隱性s基因表達完全抗病,基因型為ssii;而純合SS或雜合Ss基因表現(xiàn)出一定的抗病性,即中間類型,其基因型為S_ii。我們的這個推論與Morishita et al (2003)相一致(2)根據(jù)BSA法建立抗、感病池,利用A

5、FLP分子標記技術(shù)對黃瓜白粉病進行了研究。20條EcoRI擴增引物與18條MseI擴增引物相互組合,共計360對AFLP引物對,對黃瓜白粉病抗病基因的AFLP標記進行篩選,共擴增出了大約20000條帶。,得到了2對AFLP標記E2(E-AAG)/M55(M-CGA)和E2(E-AAG)/M62(M-CTT)。在抗、病親本池和抗病池中都能穩(wěn)定的擴增出差異片段,然后將2對引物進行了40株抗感單株小群體驗證,證明兩引物對分別在整個F2內(nèi)該標記

6、的連鎖性差或者不連鎖,沒有測序的必要性,因此獲得的2條AFLP特異條帶未割膠回收側(cè)序。
   (3)應用SRAP分子標記技術(shù)結(jié)合群分法在抗病品系“11-1-2-8-1-2-1-2(M1)”和感病品系“6-1-1-1-1-1-2(M2)”及抗病池(BR)和感病池(BS)中篩選與黃瓜白粉病緊密連鎖的分子標記。從437對SRAP引物組合中進行篩選,僅有62對引物組合可以在兩個親本抗感池間擴增出穩(wěn)定的多態(tài)性條帶,占所用引物組合總數(shù)的14

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