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![蟠桃果形基因發(fā)掘及生理機制探討.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/59b3504b-17b8-4eef-821d-c9c8b0e1b253/59b3504b-17b8-4eef-821d-c9c8b0e1b2531.gif)
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文檔簡介
1、桃(PrunuspersicaL. Batsch)起源于中國,其果形分為圓形(即圓形桃)和扁平形(即蟠桃)二種類型。蟠桃形狀獨特、食用方便、風味甘甜而受到消費者青睞,尤其是其扁平的果形特點是其它果樹作物所不具備的,同時,蟠桃基因具有遺傳多效性,可增加果實含糖量,成為品質(zhì)育種的重要方式,而且目前仍缺乏十分可靠的分子標記可用于蟠桃育種,更不明確蟠桃果形形成的生理及分子機制。因此,本研究旨在初步探討蟠桃果形形成的生理機制,進一步探索蟠桃果形的
2、調(diào)控基因,開發(fā)分子標記,提高蟠桃育種效率,進而可以闡明蟠桃獨特果形的形成機制。
本試驗通過測定不同果形果實內(nèi)源激素含量差異,初步分析可能導致果形差異的生理因素。同時,在已有研究基礎之上,針對果形關(guān)聯(lián)分析的結(jié)果以及由此確定的果形候選基因區(qū)段,深入分析基因序列以及基因相對表達量,旨在逐步發(fā)掘控制蟠桃果形的關(guān)鍵基因。通過以上試驗,本研究初步探討了蟠桃果形形成的生理機制,明確控制蟠桃果形的可能的關(guān)鍵基因,獲得的主要結(jié)果如下:
3、 1.不同果形果實中果皮內(nèi)源激素含量測定:通過測定不同果形果實發(fā)育期及果實不同部位內(nèi)源激素含量,探討4種植物內(nèi)源激素對果形差異形成的影響。果實不同部位激素測定顯示,圓桃IAA、GA4含量顯著高于蟠桃,且3份圓桃GA4含量在果實頂部顯著高于中部,ZR與GA3的含量在圓桃、蟠桃基本無差異;較其它激素而言,IAA在果實整個發(fā)育期含量最高。本試驗結(jié)果初步表明,IAA、GA4對蟠桃、圓桃果實發(fā)育及果形形成具有非常重要的影響。
2.與果形
4、緊密連鎖的SNP的確定:本試驗基于果形關(guān)聯(lián)分析得到的SNP位于基因組上的位置 Chr6:25060196( Prunus_persica_v1.0),進行果形基因的進一步探索,利用二代測序手段,對106份桃品種(其中15份蟠桃、91份圓桃)進行驗證,結(jié)果顯示所有的蟠桃雜合體(Ss)品種均表現(xiàn)為 A/T、蟠桃純合體(SS)品種表現(xiàn)為 T/T、圓桃(ss)品種均表現(xiàn)為 A/A,其中蟠桃的純合體(SS)T/T為果實發(fā)育早期敗育類型,最終得到一
5、個與果形緊密連鎖的關(guān)鍵SNP位點。
3.果形分子標記的開發(fā):利用所獲得的與果形緊密連鎖的SNP標記,根據(jù)AS-PCR原理,設計適合該SNP的AS-PCR分子標記。本試驗開發(fā)的果形AS-PCR分子標記,通過普通PCR與瓊脂糖凝膠電泳即可準確的鑒定出蟠桃、圓桃果實類型。利用‘大久?!c‘油蟠桃1-3’雜交群體,共計84份種質(zhì)進行標記的準確性驗證,驗證準確率為100%,可進一步用于分子標記輔助選擇。
4.利用果實成熟期以及
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