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![蘆丁降解菌的分離篩選及鑒定.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/595f64f6-ce79-4827-a001-7ac921b8a2fb/595f64f6-ce79-4827-a001-7ac921b8a2fb1.gif)
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1、槲皮素和異槲皮素為黃酮類(lèi)物質(zhì),具有顯著的藥理活性,因此,槲皮素和異槲皮素的生產(chǎn)方法成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)對(duì)槐樹(shù)密集區(qū)的土壤樣品中蘆丁降解菌株的分離篩選方法進(jìn)行探索,初步建立了蘆丁降解菌株的分離篩選方法。首先從河北大學(xué)校園內(nèi)的槐樹(shù)密集區(qū)采集土樣,采用蘆丁平板稀釋涂布法分離土壤中的微生物,然后通過(guò)聚酰胺薄層層析和高效液相層析篩選出活性菌株,最后對(duì)篩選出的活性菌株進(jìn)行轉(zhuǎn)化能力的測(cè)定,并從形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方面對(duì)活性菌株進(jìn)行鑒定。
2、 本研究共從土壤中篩選出9株具有蘆丁降解活性的菌株,其中7株產(chǎn)槲皮素,分別為D3、Z43、Z46、Z50、Z54、Z55和Z58,2株產(chǎn)異槲皮素,分別為C44和Z9。對(duì)9株活性菌株在不同時(shí)間內(nèi)的轉(zhuǎn)化能力進(jìn)行測(cè)定,轉(zhuǎn)化產(chǎn)物中槲皮素/異槲皮素的量在一定的時(shí)間內(nèi)隨轉(zhuǎn)化時(shí)間的延長(zhǎng)而不斷增大,當(dāng)達(dá)到最大后,又隨時(shí)間的不斷延長(zhǎng)而減少,比較同一菌株不同轉(zhuǎn)化時(shí)間峰譜圖,推斷是菌株產(chǎn)生的酶不單一所導(dǎo)致的。其中菌株C44,Z50,Z55菌株的轉(zhuǎn)化能力較高
3、。
通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物中的糖進(jìn)行薄層層析,確定了菌株 D3,Z43,Z46,Z50,Z54,Z55和Z58通過(guò)產(chǎn)生β-蕓香糖苷酶來(lái)降解蘆丁生成槲皮素,菌株 C44,Z9通過(guò)產(chǎn)生α-鼠李糖苷酶將蘆丁降解為異槲皮素。
對(duì)分離出的9株蘆丁降解菌株從形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方面進(jìn)行了鑒定,D3菌株為解葡聚糖類(lèi)芽孢桿菌(Paenibacillus glucanolyticus),C44菌株歸為岸濱芽孢桿菌(Bacillus litora
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