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文檔簡介
1、植物內(nèi)源小分子多肽作為一類新的激素逐漸被人們所認識,并在調節(jié)植物生長發(fā)育和響應外界脅迫等生理過程中發(fā)揮重要作用,因此,對多肽類激素參與的調控功能和分子機理進行研究,具有重要的意義。本研究通過分析細菌鞭毛蛋白N端可以觸發(fā)植物天然免疫的22個氨基酸的小肽(flg22)誘導的基因芯片數(shù)據(jù),鑒定出了多個能夠被flg22誘導上調表達的小分子多肽前體基因。其中,一個功能未知的基因IDL6(IDA Like6,At5g05300)在同源比對分析上屬于
2、IDA基因家族6個成員中的一個。序列分析顯示,IDA家族蛋白多肽為分泌肽,其N端具有信號肽,在C端為保守的包含約18個氨基酸的序列。信號肽和保守區(qū)之間為序列保守性低的可變區(qū)。
通過病原菌Pst DC3000誘導發(fā)現(xiàn),IDL6同樣能夠被顯著誘導上調表達,IDL6轉錄受到flg22和病原菌的誘導,預示著該基因參與植物免疫反應,為了分析IDL6執(zhí)行的具體生理功能,我們首先對IDL6的表達模式進行了分析。結果顯示,IDL6在擬南芥中具
3、有廣泛的表達,尤其在葉片中表達量更高。為了進一步研究IDL6的功能,我們構建了IDL6的過表達株系和RNA干擾株系。通過細菌生長實驗發(fā)現(xiàn),IDL6過表達株系對Pst DC3000的抗性減弱,IDL6的RNA干擾株系對Pst DC3000的抗性增強。進一步的研究發(fā)現(xiàn),IDL6能夠誘導多聚半乳糖醛酸酶基因ADPG2的表達,從而增加半乳糖醛酸酶的活性,降低了葉片細胞壁中果膠含量,也降低了葉片強度,減弱了細胞壁在免疫過程中的防御作用。ADPG2
4、過表達株系減弱了對Pst DC3000的抗性,而adpg2突變體增加了對PstDC3000的抗性。通過Pst DC3000誘導發(fā)現(xiàn),ADPG2能夠被病原菌誘導上調表達,且這一過程受HAE/H SL2的影響。綜上所述,IDL6-HAE/HSL2信號通路能夠降低細胞壁的果膠含量影響細胞壁,從而降低擬南芥對PstDC3000的抗性,而Pst DC3000能夠通過控制IDL6-HAE/HSL2-ADPG2信號通路從而增強自身的感染能力。
5、 多肽類激素不僅在調控植物免疫信號中起作用,在影響植物生長發(fā)育的過程中也扮演著重要的角色。相關研究已經(jīng)證明IDA多肽能夠影響側根的發(fā)育。在我們的研究中,我們發(fā)現(xiàn)IDL6能夠抑制擬南芥的主根伸長。通過研究分析發(fā)現(xiàn),在IDL6OE轉基因株系中,分生區(qū)的大小相對于野生型明顯的減小,而IDL6KD和過表達株系相反,說明IDL6能夠通過抑制分生區(qū)的正常發(fā)育而影響根的生長,而且這一生理功能同樣依賴于受體HAE和HSL2。通過生長素標記DR5rev
6、∶GFP和pCYCB1;1∶GUS顯示,分生區(qū)部位的生長素信號減弱,細胞分裂活性降低。另一方面,與細胞分化相關的基因SHY2在過表達株系中顯著的被誘導上調表達。綜上所述,IDL6通過影響生長素和細胞分裂素信號通路,從而影響了根尖分生區(qū)細胞的分裂和分化過程,進而影響了擬南芥根的生長發(fā)育。
綜上所述,IDL6作為一個小分子多肽調控因子,一方面能夠通過受體HAE和HSL2影響細胞壁中果膠含量的變化來影響細胞壁的重建過程,進而調控擬南
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