1、中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)俗稱河蟹,主要分布于中國長江、遼河、甌江等水域,但群體自然分布以長江流域為主。多年來,由于各水系中華絨螯蟹無序引種和培育苗種的盲目放流,加上人工養(yǎng)殖群體向自然水體的逃逸,打破了各水系中華絨螯蟹的天然分布格局,各水系中華絨螯蟹群體間的基因交流非常頻繁,由此產(chǎn)生了中華絨螯蟹的種質(zhì)混雜問題。針對這一現(xiàn)狀,本研究通過對線粒體細(xì)胞色素氧化酶亞基Ⅰ基因(COI)序列變異分析,研究了當(dāng)前長江、遼河、和

2、甌江3個天然群體以及萊菌河F1代群體的遺傳結(jié)構(gòu)、基因交流以及種質(zhì)混雜情況。同時采用微衛(wèi)星(SSR)技術(shù)分析了中華絨螯蟹F4代選育群體、長江水系天然群體以及射陽土池育苗群體間的遺傳差異,探討了人工選育活動對中華絨螯蟹選育群體遺傳多樣性的影響。本研究期望為我國中華絨螯蟹種質(zhì)資源保護(hù)與合理開發(fā)利用研究提供理論依據(jù)。
　　 針對我國各水系中華絨螯蟹群體間無序引種的現(xiàn)狀,本研究通過克隆測序獲得了當(dāng)前長江、遼河、甌江以及萊菌河水系F1代4個

3、群體共71個個體的線粒體細(xì)胞色素氧化酶Ⅰ基因(COI)序列。通過序列變異分析,初步研究了當(dāng)前各水系中華絨螯蟹天然群體的種質(zhì)混雜情況。對獲得的COI基因序列進(jìn)行比對,比對長度包括628個位點,其中變異位點112個,簡約信息位點36個?；蛐蛄蠫+C(％)含量較低,表現(xiàn)出較為明顯的堿基組成偏倚性。71條序列共歸結(jié)為17種單倍型——其中單倍型H13出現(xiàn)次數(shù)最多,為萊菌河水系F1代群體、長江群體以及甌江群體的共享單元型;單倍型H15、H16以及

4、H17為甌江群體特有。中華絨螯蟹總體遺傳多樣性指數(shù)較高,其單倍型多樣性指數(shù)(H)為0.862,核苷酸多樣性指數(shù)(π)為0.0169。對各中華絨螯蟹天然群體分別進(jìn)行遺傳多樣性分析,其中長江群體的單倍型多樣性指數(shù)最高(0.838),萊菌河水系F1代群體最低(0.7250)。長江群體與遼河群體間的遺傳距離較小(0.00244),與甌江群體間的遺傳距離較大(0.02037),推測長江群體與遼河群體間的種質(zhì)混雜較為嚴(yán)重。長江、甌江群體內(nèi)部個體間的

5、遺傳距離(0.01738和0.0253)已大于長江群體與遼河群體間的遺傳距離,提示長江、甌江群體內(nèi)部遺傳變異較大,種質(zhì)混雜情況也更為嚴(yán)重。本研究中各群體間的基因流(Nm)均高于1,其中長江天然群體與萊菌河F1代群體及遼河群體間的基因流分別為9.72和8.27,表明長江群體與這兩個群體間存在著較為頻繁的基因交流。分子變異分析(AMOVA)結(jié)果顯示,本研究中4個天然群體總的遺傳分化指數(shù)為0.0924(P＜0.001),其中大部分遺傳變異(9

6、0.77％)存在于中華絨螯蟹各天然群體內(nèi)部,存在于群體間的遺傳變異較少(9.23％)。單倍型網(wǎng)絡(luò)圖和系統(tǒng)發(fā)育分析均沒有顯示出單倍型與地理位置的對應(yīng)關(guān)系,提示當(dāng)前各水系中華絨螯蟹種質(zhì)混雜較為嚴(yán)重,已不能形成顯著的地理群體結(jié)構(gòu)。
　　 為探究人工選育活動對中華絨螯蟹遺傳多樣性的影響,本研究利用10對微衛(wèi)星引物對中華絨螯蟹長江水系天然群體、人工選育F4代A級群體、F4代B級群體以及江蘇射陽群體共95個體進(jìn)行遺傳多樣性分析。(F4代A級

7、和B級選育起始群體均來源于國家級江蘇高淳長江水系中華絨螯蟹原種場,射陽群體為江蘇省河蟹養(yǎng)殖普遍采用的苗種,其親本為當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖河蟹。)研究結(jié)果表明,中華絨螯蟹4個群體的平均觀察雜合度(H0)分別為0.8053、0.8197、0.8105、0.8100,平均期望雜合度(He)分別為0.7149、0.7161、0.7262、0.7286。其中,人工選育F4代A級以及B級群體的遺傳多樣性指數(shù)均高于天然群體,但是無顯著性差異(P＞0.05)?？傮w而