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![人工合成甘藍(lán)型黃籽油菜粒色基因的精細(xì)定位.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/d3062fef-1163-4e1a-8e68-4a6f25ae6b15/d3062fef-1163-4e1a-8e68-4a6f25ae6b151.gif)
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1、在相同遺傳背景下,黃籽油菜與黑籽相比:油份和蛋白質(zhì)含量高,種皮薄,油質(zhì)清澈透明,餅粕纖維素含量低。因此,基于黃籽性狀的諸多優(yōu)點(diǎn),對(duì)甘藍(lán)型油菜黃籽性狀的研究正成為現(xiàn)代油菜品質(zhì)育種的熱點(diǎn)。本研究以人工合成甘藍(lán)型黃籽油菜為研究對(duì)象,以兩個(gè)近等基因系為材料,充分利用擬南芥和白菜基因組序列己知信息,對(duì)人工合成甘藍(lán)型黃籽油菜種皮色澤相關(guān)基因進(jìn)行精細(xì)定位。主要研究結(jié)果如下:
1)利用集團(tuán)分析法(BSA)與AFLP技術(shù)相結(jié)合篩選與種皮色澤
2、相關(guān)基因連鎖的分子標(biāo)記,人工合成甘藍(lán)型黃籽油菜近等基因系群體中共獲得20個(gè)差異片段,其中EA15MG9與目標(biāo)基因距離1.2cM。白菜型油菜群體共獲得52個(gè)差異片段。
2)對(duì)其中8個(gè)AFLP標(biāo)記進(jìn)行回收、克隆、測(cè)序,根據(jù)測(cè)序結(jié)果,對(duì)其中5個(gè)差異片段設(shè)計(jì)特異引物,進(jìn)行SCAR標(biāo)記轉(zhuǎn)化,結(jié)果表明:成功轉(zhuǎn)化其中兩個(gè),分別命名為S159和S615,其中S159來自甘藍(lán)型油菜群體AFLP標(biāo)記EA15MG9,S615來自白菜型油菜群體A
3、FLP標(biāo)記EA6MG15。
3)將上述AFLP標(biāo)記序列提交http://www.brassica-rapa.org/進(jìn)行BLAST分析,依據(jù)比對(duì)結(jié)果設(shè)計(jì)SSR引物,在兩個(gè)群體中共獲得42個(gè)差異標(biāo)記,并把目標(biāo)基因都定位在A基因組第九連鎖群。
4)根據(jù)第九連鎖群對(duì)已發(fā)表的分子標(biāo)記遺傳連鎖圖譜進(jìn)行搜集,整理,篩選了35對(duì)引物,獲得10對(duì)差異標(biāo)記。
5)依據(jù)擬南芥信息設(shè)計(jì)ACGM引物25對(duì),在甘藍(lán)型油菜
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