茯苓單孢菌株主要生物學(xué)特性的初步研究.pdf_第1頁(yè)
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1、茯苓Wolfiporia cocos一般腐生或寄生在松科植物赤松和馬尾松根部,其地下形成的菌核具有極高的藥用、食用和保健作用。茯苓的研究基礎(chǔ)薄弱,茯苓性模式及生活史過(guò)程目前仍無(wú)定論。菌核形成于同核菌絲體還是異核菌絲體、茯苓單孢菌株是否能形成菌核,都缺少系統(tǒng)研究。本研究對(duì)茯苓的主要生物學(xué)特性開(kāi)展了一系列研究,旨在為茯苓的育種奠定基礎(chǔ)。具體研究?jī)?nèi)容與結(jié)果如下:
   (1)以菌株W的80個(gè)單孢菌株,菌株L的18個(gè)單孢菌株為材料,對(duì)其

2、中菌株W的單孢菌株菌落形態(tài)和生長(zhǎng)速度進(jìn)行了測(cè)定,對(duì)菌株L的單孢菌株只測(cè)定生長(zhǎng)速度。結(jié)果表明,菌株W的單孢菌株在菌落形態(tài)、氣生菌絲濃密程度等方面差異明顯。根據(jù)氣生菌絲體的濃密程度、菌絲體形態(tài)等,可將菌株W的80個(gè)單孢菌株菌落表型分為兩類,一類是氣生菌絲較少的匍匐型,另一類是氣生菌絲濃密的氣生型。單孢菌株在完全培養(yǎng)基(CYM)中的生長(zhǎng)速度介于2.62~3.23cm/d之間,個(gè)別菌株之間的生長(zhǎng)速度差異極顯著;在松木屑培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)速度介于0.

3、82~1.52cm/d之間,不同菌株的生長(zhǎng)速度差異不顯著;相關(guān)性分析結(jié)果表明,這些單孢菌株在CYM培養(yǎng)基和松木屑培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)速度不存在相關(guān)性。菌株L的單孢菌株在CYM培養(yǎng)基中生長(zhǎng)速度介于1.72~2.27cm/d之間,個(gè)別菌株之間的生長(zhǎng)速度差異極顯著。
   (2)以菌株W的單孢菌株為材料,進(jìn)行了單孢菌株的配對(duì)試驗(yàn)。結(jié)果表明,在供試的280對(duì)配對(duì)組合中,217個(gè)配對(duì)組合在交接處氣生菌絲體無(wú)明顯反應(yīng),表現(xiàn)為可融洽生長(zhǎng),所占比例為

4、77.5%;63個(gè)配對(duì)組合在交接處氣生菌絲體非常濃密,形成明顯的隆起型菌絲帶,或者在交接處無(wú)菌絲體,形成明顯的溝壑型隔離帶,所占比例為22.5%。無(wú)論是隆起型還是溝壑型反應(yīng),均會(huì)在交接處產(chǎn)生褐色色素。挑取可融洽生長(zhǎng)的單孢配對(duì)組合交接處菌絲體,進(jìn)一步與兩親本單孢菌株及W菌株進(jìn)行拮抗試驗(yàn)和ISSR鑒定,結(jié)果表明,引物P36、P38在雜交子10×14、45×25與6×15的ISSR擴(kuò)增圖譜中,不僅包含單孢菌株共有的DNA條帶,也包含親本單孢菌

5、株各自的特異性DNA條帶,拮抗試驗(yàn)與ISSR分析鑒定了這些菌株為雜交子。
   (3)以菌株W的68個(gè)單孢菌株、菌株L的18個(gè)單孢菌株為材料進(jìn)行了松木栽培試驗(yàn)。結(jié)果表明,在菌株W的68個(gè)單孢菌株中,有10個(gè)菌株可以產(chǎn)生菌核,所占比例為14.6%;有36個(gè)菌株在松木段上發(fā)菌很好,但不能形成菌核,其余22個(gè)菌株的菌絲體不能在松木段上生長(zhǎng)。對(duì)其中17個(gè)能在松木段上發(fā)菌良好,但不能形成菌核的單孢菌株,采用新鮮菌核進(jìn)行誘引栽培。結(jié)果表明,

6、有9個(gè)單孢菌株經(jīng)誘引后可以形成菌核。菌株L的18個(gè)單孢菌株栽培試驗(yàn)結(jié)果表明,沒(méi)有單孢菌株可以自發(fā)形成菌核,對(duì)其中9個(gè)能在松木段上生長(zhǎng)的菌株用新鮮菌核進(jìn)行誘引栽培,有2個(gè)單孢菌株經(jīng)誘引以后可以形成菌核,其余9個(gè)單孢菌株菌絲體不能在松木段上生長(zhǎng)。
   以上研究結(jié)果說(shuō)明,茯苓部分單孢菌株具有結(jié)苓的能力,對(duì)于不能結(jié)苓的單孢菌株還可嘗試采用以新鮮菌核作為誘引,誘使其形成菌核。這些能結(jié)苓單孢菌株、不能結(jié)苓單孢菌株、以及經(jīng)誘引后可以結(jié)苓單孢

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