犬α-干擾素的表達及其治療犬病毒性腸炎臨床療效觀察.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、犬細小病毒(Canine Parvovirus, CPV)為單鏈DNA病毒,基因組全長5323 nt,只含有3個讀碼框,分別編碼為VP1(70~90ku)、VP2(62~76ku)和VP3(39~69ku),其中VP2是構(gòu)成衣殼蛋白的主要部分。它是一種自主性復制病毒,主要引起犬心肌炎、出血性腸炎和肺病變,并導致犬的大量死亡,給養(yǎng)犬業(yè)和寵物業(yè)帶來巨大損失,因此早期預防和及時治療十分重要。
   采用犬干擾素治療犬病毒性疾病是一種有

2、效的手段,干擾素通過阻斷病毒的繁殖及復制,以及刺激動物產(chǎn)生足夠的內(nèi)源性干擾素達到消除病毒的作用,治療犬病毒性腸炎具有良好的臨床療效。但由于犬干擾素價格昂貴,并且獸醫(yī)們對它的認識仍然不夠,目前,犬干擾素用于各種類型病毒感染犬治療效果的大樣本研究報道較少。因此本課題研究了犬的α干擾素,成功構(gòu)建了pET32a—CaIFN—α重組質(zhì)粒,并轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL—21中,經(jīng)IPT6誘導后,表達出了重組犬α干擾素,表達產(chǎn)物為—N—端含His的37ku左右

3、的融合蛋白。經(jīng)薄層掃描分析目的蛋白表達量占菌體總蛋白的30%。Western blotting印跡證實了表達產(chǎn)物具有抗原抗體結(jié)合能力。并通過提取包涵體法和鎳瓊脂糖凝膠法對表達產(chǎn)物進行變性、純化和復性,獲得了純度較高的重組犬α干擾素。
   另一方面,對犬α干擾素在臨床上的應用進行了研究,研究犬均來自北京市昌平區(qū)動物疫病預防控制中心寵物門診。對就診于寵物門診且患病毒性腸炎的犬542例,隨機分成兩組,對照組256例,予口服慶大霉素、

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