瘦肉型豬（PIC344）精液堿性磷酸酶的分離純化與性質(zhì)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、在對(duì)瘦肉型豬(PIC344)精液堿性磷酸酶(Alkalinephosphatase, EC.3.1.3.1,簡稱AKP)分離純化的基礎(chǔ)上,對(duì)其性質(zhì)進(jìn)行了初步研究.將精液反復(fù)凍融后,用正丁醇抽提、硫酸銨分級(jí)沉淀、DEAE-Sepharose FF陰離子色譜和Sephacryl S-200分子篩色譜后,得到純化倍數(shù)11.46,比活為81.23U/mg酶蛋白.提取液經(jīng)PAGE和SDS-PAGE檢測,呈現(xiàn)一條帶.用Sephacryl S-300

2、柱色譜系統(tǒng)(AKTA FPLC)測得該酶相對(duì)分子質(zhì)量為90.12KD,SDS-PAGE電泳法測得該酶亞基分子質(zhì)量為48.41KD,說明該酶為兩個(gè)相同亞基組成.天然等電聚焦顯示其等電點(diǎn)(pI)為8.19.氨基酸組成分析顯示:瘦肉型豬(PIC344)精液的堿性磷酸酶亞基由大約450個(gè)氨基酸殘基組成,富含門冬氨酸、谷氨酸、纈氨酸、精氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸等氨基酸.用N-溴代琥珀酰亞胺(NBS),苯甲基磺酰氟(PMSF),三硝基苯磺酸(TNBS

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