1、灰飛虱(Laodelphax striatellus)、白背飛虱(Sogatella furcifera)和褐飛虱（Nilaparvata lugens）是屬于昆蟲綱Insecta、半翅目Hemiptera、飛虱科Delphacidae的水稻害蟲，通過直接刺吸和傳播病毒對水稻生產造成很大影響。Wolbachia是廣泛存在于節(jié)肢動物體內的一種共生細菌，可通過宿主卵的細胞質進行母系遺傳，并以誘導胞質不親和（cytoplasmic incom

2、patibility, CI）、誘導雌性化(feminization)、誘導孤雌生殖（parthenogenesis induction, PI）和殺雄作用（male-killing）這四種方式調控其寄主的生殖以實現其在宿主種群中的穩(wěn)定存在和擴散。
　　 噬菌體是以細菌為宿主的病毒，有高度的宿主特異性，是細菌遺傳進化的重要推動力。WO phage是Shinjit和Masui(2000)在Teleogryllus taiwanem

3、ma的Wolbachia基因組中首次發(fā)現并命名的。WO噬菌體既能以溶原狀態(tài)插入到其宿主的染色體中，又可以裂解狀態(tài)自由存在于細胞質中，因此可能攜帶重要的基因到Wolbachia中或參與Wolbachia調控宿主生殖方式。本文以中國兩個地理種群灰飛虱為實驗材料，研究了共生菌Wolbachia對中國灰飛虱生殖作用的影響。同時本文以灰飛虱、白背飛虱、褐飛虱為實驗材料，通過對Wolbachia的wsp基因和WO噬菌體的orf7基因進行序列分析以及

4、對Wolbachia和WO噬菌體進行數量關系的研究，深入探討了bacteriophageWO在其Wolbachia宿主中的的感染情況以及與Wolbachia的相互作用關系。
　　 本研究的主要內容以及取得的初步研究成果如下：
　　 1.為檢驗Wolbachia對中國灰飛虱生殖的影響，本研究以廣西壯族自治區(qū)南寧市(NN)和云南省寧洱市(NE)兩個地理種群為實驗材料，通過四環(huán)素處理篩選到完全不感染Wolbachia的品系后再

5、與感染品系進行雜交實驗。結果發(fā)現，這兩個地理種群灰飛虱中感染的Wolbachia都能夠誘導高強度的胞質不親和作用(CI)，表現為胚胎的死亡及產卵量的大幅度下降。
　　 2.本研究通過PCR檢測編碼WO噬菌體衣殼蛋白的orf7基因首次報道了在三種稻飛虱體內存在WO phage對Wolbachia的侵染，并通過分子克隆分析了WO phage的類型。結果表明，試驗中20個稻飛虱中的Wolbachia普遍存在著WO phage的感染，感

6、染率為47％～96％不等。對不同地理種群感染的WO phage的orf7基因序列分析可知共有三種不同類型的WO噬菌體，其序列分別登錄到Genbank。
　　 3.通過對20個地理種群稻飛虱體內感染的Wolbachia wsp基因及WO phage的orf7基因進行克隆測序并進行系統發(fā)育分析，比較兩個系統發(fā)育樹的拓撲結構發(fā)現二者表現出很明顯的不一致性，由此說明WO phage和Wolbachia兩者的系統發(fā)育關系相關性并不明顯；同

7、時發(fā)現地中海粉螟和灰飛虱中感染的WO phage位于同一進化支內，說明WO噬菌體在不同宿主的Wolbachia之間可能發(fā)生了水平轉移，由此可推斷WO噬菌體可能會像其他胞外細菌的噬菌體那樣參與促進Wolbachia的遺傳進化。這是在稻飛虱體內對WO phage的首次報道和研究，為以后進一步深入研究奠定了基礎。
　　 4.本研究設計特異性引物，利用real-time quantitative PCR技術檢測了灰飛虱、白背飛虱、褐飛虱