1、本研究用豬細(xì)小病毒W(wǎng)H-1株試制疫苗，在遵循《豬細(xì)小病毒(WH-1株)滅活疫苗生產(chǎn)與檢驗(yàn)規(guī)程》的前提下，通過(guò)對(duì)一系列影響病毒效價(jià)的因素進(jìn)行優(yōu)化，最終確定了最優(yōu)的病毒增殖培養(yǎng)條件。
　　 不同細(xì)胞系對(duì)病毒效價(jià)的影響：用IBRS-2細(xì)胞與PK-15細(xì)胞分別接毒，結(jié)果表明豬細(xì)小病毒W(wǎng)H-1株在IBRS-2與PK-15細(xì)胞上生長(zhǎng)增殖收獲的病毒效價(jià)沒(méi)有顯著差異(P＞0.05)。豬細(xì)小病毒W(wǎng)H-1株適合在IBRS-2與PK-15細(xì)胞上生長(zhǎng)增

2、殖，但I(xiàn)BRS-2更容易傳代，所以選擇其進(jìn)行下一步試驗(yàn)。
　　 不同培養(yǎng)方法對(duì)病毒效價(jià)的影響：用靜置培養(yǎng)的IBRS-2扁瓶細(xì)胞4瓶和旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)的轉(zhuǎn)瓶細(xì)胞4瓶分別接毒，結(jié)果表明扁瓶靜置培養(yǎng)方法收獲的病毒效價(jià)顯著高于轉(zhuǎn)瓶旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)方法(P＜0.05)。但是從生產(chǎn)角度上說(shuō)，轉(zhuǎn)瓶旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)更適用，因此選擇轉(zhuǎn)瓶旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)進(jìn)行下一步試驗(yàn)。
　　 不同體積培養(yǎng)液對(duì)病毒效價(jià)的影響：用IBRS-2細(xì)胞接種豬細(xì)小病毒W(wǎng)H-1株，各試驗(yàn)組加入培養(yǎng)液體

3、積分別為1000ml/瓶、1200ml/瓶、1500ml/瓶。結(jié)果表明每瓶加入1000ml培養(yǎng)液收獲的病毒液效價(jià)最低，顯著低于1200ml和1500ml(P＜0.05)，而每瓶加入1200ml和1500ml培養(yǎng)液收獲的病毒液效價(jià)沒(méi)有顯著差異(P＞0.05)。但是從生產(chǎn)實(shí)踐來(lái)看，每瓶加入1500ml的產(chǎn)量更高，能夠提高生產(chǎn)效能。
　　 培養(yǎng)液中不同血清濃度對(duì)病毒液效價(jià)影響：用IBRS-2細(xì)胞接種豬細(xì)小病毒W(wǎng)H-1株，各試驗(yàn)組加入培

4、養(yǎng)液的血清濃度分別加入8％、10％、12％。結(jié)果表明培養(yǎng)液的血清濃度為8％收獲的病毒液效價(jià)顯著低于10％和12％收獲的病毒液(P＜0.05)，但10％和12％兩者收獲的病毒液效價(jià)無(wú)顯著差異(P＞0.05)。從節(jié)約生產(chǎn)成本和提高疫苗品質(zhì)的角度來(lái)說(shuō)，應(yīng)該選擇10％。
　　 不同生長(zhǎng)時(shí)間的細(xì)胞對(duì)病毒效價(jià)的影響：分別選取生長(zhǎng)24h、48h、72h的IBRS細(xì)胞接毒，結(jié)果表明生長(zhǎng)時(shí)間為24h的細(xì)胞所產(chǎn)病毒效價(jià)顯著低于生長(zhǎng)時(shí)間為72h的細(xì)胞

5、(P＜0.05)，而生長(zhǎng)時(shí)間為72h的細(xì)胞病毒效價(jià)顯著低于生長(zhǎng)時(shí)間為48h的細(xì)胞(P＜0.05)。由此可見(jiàn)，選擇生長(zhǎng)時(shí)間為48h的細(xì)胞進(jìn)行接毒，可以獲得效價(jià)最高的病毒液。
　　 病毒液的免疫原性測(cè)定：在試驗(yàn)生產(chǎn)的病毒液中，選擇效價(jià)達(dá)到規(guī)程標(biāo)準(zhǔn)要求（105.5TCID50/ml）的病毒液6批，并分為效價(jià)較低組和效價(jià)較高組，兩者病毒效價(jià)差異顯著(P＞0.05)。將上述挑選的病毒液分別進(jìn)行滅活、配苗和乳化，分別用豚鼠和豬進(jìn)行免疫原性測(cè)