1、豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的一種以妊娠母豬嚴重繁殖障礙以及仔豬的呼吸道癥狀和高死亡率為特征的傳染病。PRRS自1987年首次報道發(fā)現(xiàn)于美國以來，現(xiàn)已遍及世界各主要養(yǎng)豬國家與地區(qū)，并已成為危害養(yǎng)豬業(yè)最嚴重的傳染病之一。
　　 豬肺泡巨噬細胞是PRRSV的重要靶細胞，研究病毒與其靶細胞之間的相互作用關系是理解病毒致病機制及其免疫學的重要基礎。同時巨噬細胞又是重要的免疫細胞，研究PRRS

2、V感染對豬肺泡巨噬細胞功能的影響，有利于解釋PRRSV與宿主免疫系統(tǒng)之間的作用，并有助于闡釋PRRSV引起持續(xù)性感染和免疫抑制的機制，這對于闡明PRRSV的致病性和致病機理具有重要的理論意義。
　　 目前，基因芯片已被越來越廣泛的應用于病原與宿主相互關系的研究，特別是基因芯片高通量的特點能夠一次獲得大量信息，可以為后續(xù)研究指明方向。
　　 鑒于此，本課題利用包含23256個轉錄本的Affymetrix豬基因芯片對正常豬肺

3、泡巨噬細胞與PRRS病毒感染豬肺泡巨噬細胞基因表達譜差異進行研究，旨在檢測分析PRRSV感染豬肺泡巨噬細胞基因表達譜中的差異表達基因，探討PRRSV的免疫學原理及致病機制，對PRRSV感染過程中發(fā)生的分子變化能夠得到全面的認識以期為病毒與宿主的相互作用研究奠定基礎。
　　 主要研究內容如下：
　　 利用基因芯片技術分析了豬肺泡巨噬細胞在PRRSV侵襲后的基因表達變化情況，發(fā)現(xiàn)在6小時和24小時差異表達基因數(shù)量分別達到了2

4、640和3356，占全芯片基因數(shù)量的百分比分別為13.09％和16.64％。其中在6小時發(fā)生上調的基因數(shù)量為1235，下調基因數(shù)量為1495，而上調兩倍以上的基因數(shù)量為619，下調兩倍以上基因數(shù)量為435，在24小時發(fā)生上調的基因數(shù)量為1746，下調基因數(shù)量為1619，而上調兩倍以上的基因數(shù)量為922，下調兩倍以上基因數(shù)量為773。篩選出重要的差異表達基因，尤其是與免疫應答，炎癥反應，細胞凋亡等相關基因的變化情況。對差異表達基因進行歸類

5、，如IFN基因，IFN效應基因，IFN信號基因，白介素相關基因，CD分子相關基因，HSP相關基因，趨化因子相關基因和Toll樣受體相關基因。利用Genmapp生物信息學軟件繪制基因芯片中與細胞凋亡相關基因相互作用的網(wǎng)絡途徑。用42對基因引物對芯片結果進行Real-time RT-PCR驗證，有38條基因符合芯片結果。
　　 通過Real-time RT-PCR，系統(tǒng)分析了WuH1株PRRSV感染豬肺泡巨噬細胞后6h與24h兩時間

6、點15種趨化因子的轉錄水平：CCL2-5，CCL8，CCL19，CCL20，CCL27．CCL28，CXCL2，CXCL8，CXCL10，CXCL12，CXCL14和CX3CL1。結果表明CC趨化因子家族中CCL2，CCL3，CCL4，CCL5，CCL8，CCL20和CCL28均有明顯的差異表達。具有征募Th1和Th2細胞功能的趨化因子Rantes，MCP-1和MCP-2在病毒感染早期即被誘導表達。其中Rantes和MCP-2的mRNA