馬郁蘭離體微繁技術(shù)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究以唇形科芳香植物馬郁蘭為材料,通過對滅菌時間、外源激素種類和煉苗移栽環(huán)境的篩選,觀察馬郁蘭在初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和煉苗移栽階段的生長狀況,研究了馬郁蘭繼代培養(yǎng)過程中內(nèi)源激素(IAA、ZRs、iPAs)和酶活性(POD、PAL、蛋白酶)的變化特征,建立了一套快速、高效、穩(wěn)定的馬郁蘭快速繁殖技術(shù),試驗結(jié)果如下:
   (1)滅菌時間篩選
   0.10%升汞滅菌時間為6min時效果最好,污染率為僅為5.76%,

2、褐化率為4.17%。
   (2)初代培養(yǎng)基篩選
   初代培養(yǎng)基篩選中,不定芽分裂數(shù)和不定芽生長狀況作為觀察指標,以生長素IBA濃度為0.05mg/L篩選細胞分裂素(6-BA、TDZ、6-BA+KT)種類和濃度,結(jié)果表明:細胞分裂素以6-BA最佳,濃度為3.00mg/L時不定芽分裂數(shù)達到5.00,并且葉色正常呈灰綠色,節(jié)距短。以6-BA濃度為3.00mg/L篩選生長素(IBA、NAA、2,4-D、IBA+NAA)種類和

3、濃度,結(jié)果表明:生長素以IBA誘導不定芽效果最好,當濃度為0.10mg/L時不定芽分裂數(shù)可達5.55,葉呈灰綠色,節(jié)距長。
   (3)繼代培養(yǎng)基篩選
   繼代培養(yǎng)基的選擇根據(jù)初代培養(yǎng)基不定芽分裂數(shù)和生長狀況,以6-BA作為細胞分裂素,濃度為3.00mg/L,選擇IBA作為生長素,結(jié)果表明:當IBA濃度為0.10mg/L時,不定芽分裂數(shù)較其他處理多,可達5.55,葉色正常呈灰綠色。
   (4)生根培養(yǎng)基篩選<

4、br>   對馬郁蘭生根培養(yǎng)研究表明:以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,NAA濃度為0.10mg/L時生根率可達97.62%,根系粗壯,根長較長。
   (5)煉苗移栽階段不同基質(zhì)和遮光度篩選
   對不同基質(zhì)和遮光度研究表明:在遮光度為95%,珍珠巖:蛭石的比例為1:2的條件下存活率可達92.86%。
   (6)馬郁蘭離體微繁技術(shù)流程
   最佳0.10%升汞滅菌時間為6min,最適初代培養(yǎng)基和繼代培

5、養(yǎng)基以6-BA3.00mg/L+IBA0.10mg/L的MS培養(yǎng)基,生根培養(yǎng)基為添加0.10mg/LNAA的1/2MS培養(yǎng)基,移栽煉苗階段以遮光度95%條件下,珍珠巖:蛭石的比例1:2時存活率最高。
   (7)繼代培養(yǎng)過程中內(nèi)源激素研究
   通過對繼代培養(yǎng)過程中IAA、iPAs和ZRs三種內(nèi)源激素的研究,結(jié)果表明:IBA濃度為0.05、0.10、0.15mg/L三個處理,三種內(nèi)源激素的變化趨勢是一致的,即呈先增加后減

6、少的趨勢,IAA和iPAs在7d的時候達到峰值,ZRs在14d達到峰值,而IBA為0.00mg/L的處理變化趨勢與其余三個處理不一致。
   (8)繼代培養(yǎng)過程中酶活性研究
   通過對繼代培養(yǎng)過程中過氧化物酶(POD)、苯丙氨酸裂解酶(PAL)和蛋白酶的研究,結(jié)果表明:IBA濃度為0.05mg/L和0.10mg/L兩個處理POD和PAL都呈先增加后較少的趨勢,在14d達到峰值,其余兩個處理變化趨勢不一致。蛋白酶活性的變

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