蘋(píng)果砧木實(shí)生后代耐鹽性鑒定的分子標(biāo)記篩選及相關(guān)基因片段分析.pdf_第1頁(yè)
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1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文蘋(píng)果砧木實(shí)生后代耐鹽性鑒定的分子標(biāo)記篩選及相關(guān)基因片段分析姓名：孫葉紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：果樹(shù)學(xué)指導(dǎo)教師：徐繼忠；邵建柱20090610ScreenofMolecularMarkersoftheSalttoleranceAnalysisofRelatedGeneFragmentsinAppleRootstockSeedlingProgeniesCidate:SunyehongMaj:PomologySuPer

2、viser:XuJizhong(Profess)ShaoJianzhu(AssistantProfess)AbstractInthisstudythedifferencematerialthatistheseedlingprogeniesoftwohybridcombinationsinapplerootstockwereidentificationanalysisofdifferentiallyexpressedgenerelated

3、saltresistantusedSRAPSSRanalysisusedinabulkedsegregationanalysis(BSA)Themainresultswereasfollows:1.ThegenomicDNAofapplewasextractedbyamodifiedCTABmethod.Themodifiedisolationbuffer(100mmolLTrisHCl20mmolLEDTA1.4molLNaCl2%C

4、TAB)wasaddedtoantiphenolicantioxidantssuchas1%PVP4010mmolLNa2S2O51%βMercaptoethanaltopolysacidescanberemovedftheaddinganappropriateamounthighsalt.TheRNAwaseliminatedfromthesolutionwithRNasetheDNAwaspurifiedbychlofmisoamy

5、labsoluteethanol.2.TheoptimalSRAPsysteminapplerootstockwasestablished.Inatotalvolumeof15μLSRAPsystemitcontains60ngtemplateDNA10PCRBuffer(withMg2)1.5μLdNTP0.3mmolL150ngPrimer0.75UTaqDNApolymerase.3.TheoptimalSSRsysteminap

6、plerootstockwasestablished.Inatotalvolumeof15μLSRAPsystemitcontains60ngtemplateDNA10PCRBuffer(withMg2)1.5μLdNTP0.25mmolL10.33μmolL1primer1.0UTaqDNApolymerase.4.Therewere4pairsofprimers((Me1Em2Me1Em8Me1Em12Me1Em14)whichex

7、pressedpolymphisminparentsDNApooltotallyproduced4polymphicbsin128onesofSRAP.Inlowsalttolerancehighsalttolerancegroupsthefourmarkers(Me1Em2Me1Em8Me1Em12Me1Em14)alsoexpressedpolymphism.Theresultsofidentificationof144hybrid

8、swithMe1Em2Me1Em8Me1Em12Me1Em14suggestedthatexchangetookplacein15181611plantsrespectivelyof96lowsalttoleranceonesin4850plantsof48highsalttoleranceonesrespectively.Theresultsaboveindicatedthemarkersedcouldbeusedinidentifi

9、cationofsalttolerancefapplerootstock.5.Therewere3pairsofprimers(P61P63P64)whichexpressedpolymphisminparentsDNApooltotallyproduced10polymphicbsin79onesofSSR.Inlowsalttolerancehighsalttolerancegroupsthethreemarkers(P61P63P

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