1、多酚氧化酶(Polyphenols Oxidase，簡稱PPO)是一類以Cu2+為輔基的氧化還原酶，在組織發(fā)育過程中形成并貯存于葉綠體中。煙草中的PPO在調(diào)制過程中能催化氧化多酚類化合物為α-醌，發(fā)生棕色化反應(yīng)，α-醌可聚合成黑色素，產(chǎn)生過深的顏色，不僅影響煙葉的外觀質(zhì)量，也使內(nèi)部化學(xué)成分消耗過度，降低了內(nèi)在質(zhì)量。合理控制煙草中PPO的活性，在調(diào)制過程中可減少掛灰煙、黑煙和雜色煙，增加桔黃色上中等煙比例，增加烤煙的天然特征香氣，降低刺激

2、性。 本研究以中煙100(中煙種子有限責(zé)任公司青島分公司提供)為試驗(yàn)材料，通過煙葉浸泡法、葉柄浸泡法和葉面噴施法3種不同的抑制劑施用方式處理成熟期的煙葉，進(jìn)行對比試驗(yàn)，測定PPO活性、總酚含量、綠原酸含量的變化以及對煙葉烘烤效果的影響。主要研究結(jié)果如下： 1.測定了煙草生長各階段PPO活性的變化。試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)多酚氧化酶在煙草苗期活性最高，伸根期活性有所下降，到生理成熟期活性又上升至接近最高值，以后逐漸下降。該研究還同時發(fā)

3、現(xiàn)：在工藝成熟期PPO活性已經(jīng)下降到最高活性的30％，因此在該時期采收煙葉，從PPO活性考慮應(yīng)該是比較合理的。 2.比較出了不同濃度的NaDiCa，EDTA，巰基乙醇，硫脲4種抑制劑對煙葉中多酚氧化酶活性抑制效果的強(qiáng)弱順序?yàn)镹aDiCa，EDTA，巰基乙醇，硫脲。測定了在抑制劑存在的條件下pH值與溫度對PPO活性的影響，結(jié)果表明，在抑制劑存在的條件下，PPO的最適pH值為7.0左右，最適溫度為40℃.通過比較篩選出了對PPO活性

4、有明顯抑制效果的3個抑制劑濃度(3mmol/L，4mmol/L，5mmol/L)。這幾種抑制劑對PPO的抑制作用都屬于可逆抑制，增加抑制劑濃度導(dǎo)致酶活力的下降是由于酶活力受到抑制，催化效率降低，而不是通過導(dǎo)致有效的酶量減少，而引起酶活力的下降。 3.對于NaDiCa，EDTA和硫脲通過葉面噴施法、抑制劑溶液浸泡葉片法和抑制劑溶液浸泡葉柄法3種不同的施用方式對煙葉中PPO活性的影響進(jìn)行了分別試驗(yàn)，并進(jìn)行了處理后烤煙的相關(guān)指標(biāo)的測定