1、我國的海帶資源十分豐富，海帶養(yǎng)殖已成為中國海水養(yǎng)殖的支柱產(chǎn)業(yè)之一，產(chǎn)量居世界首位。越來越多的研究表明褐藻多酚具有很廣泛的生物活性。為了充分利用海帶，開發(fā)純度較高的海帶多酚，本論文以中國沿海常見的褐藻門海帶為原料，依據(jù)藥物高通量篩選理論，以抗腫瘤活性為目的，提取分離了海帶中活性物質(zhì)——海帶多酚。 1、以單因素試驗優(yōu)化海帶多酚的提取工藝，80％乙醇常溫避光浸提海帶粉末，12小時反復(fù)兩次。氯仿脫色7小時，得到海帶多酚粗提物。得率為24

2、.25mg/kg海帶。等體積乙酸乙酯進(jìn)一步萃取，單因素試驗優(yōu)化萃取條件得到：pH值為3.4，萃取30分鐘，兩次。得率為10.3mg/kg海帶。 2、比較四種主要的提取方法：浸提法、索氏回流法、微波法、超聲波法。結(jié)果表明，微波法提取得率最高。比甲醇浸提法、索氏提取法高62.5％，比超聲法高150.5％。通過4因素3水平正交試驗優(yōu)化了微波法提取海帶多酚的條件，結(jié)果表明：PH=7，中火破碎，時間90s，料液比1:10為微波法提取海帶多

3、酚的最優(yōu)條件。在該條件下得率為34.52mg/kg海帶。 3、用葡聚糖凝膠柱G-25對海帶多酚提純物進(jìn)一步分離純化，以蒸餾水為流動相，流速為60mL/h洗脫?？梢杂行Х蛛x多酚提取物，未處理生海帶提取物為3個組分，處理的熟海帶提取物為2個組分。 4、采用MTT法測定海帶提取液體外抗腫瘤活性。粗提液對HeLa細(xì)胞的IC50為2.32μg·mL-1，使MCF-7和PC12細(xì)胞呈現(xiàn)出猝死現(xiàn)象，濃度達(dá)到6.91μg·mL-1時可完

4、全抑制三種腫瘤細(xì)胞的增殖；乙酸乙酯萃取物對HeLa細(xì)胞，MCF-7細(xì)胞和PC-12細(xì)胞表現(xiàn)為計量依賴型，IC50分別是：0.211μg·mL-1、0.174μg·mL-1、0.158μg·mL-1。當(dāng)提取物濃度達(dá)到0.5μg·mL-1時幾乎沒有存活細(xì)胞。凝膠柱層析得到未處理生海帶組分一在濃度為1.45μg·mL-1時抑制率達(dá)到72.41％，處理海帶組分一在0.30μg/mL時抑制率達(dá)到90％以上，組分二濃度大于1.68μg·mL-1時致