1、本文利用Fluo-3AM和DAPI熒光標(biāo)記的方法研究了新臺(tái)糖22號(hào)(ROC22)和桂糖28號(hào)(GT28)在含不同濃度Ca2+(0 mg/L，220 mg/L，440 mg/L和660 mg/L)的組培體系，并在0-4℃溫度下脅迫1-4 h，每1小時(shí)取樣一次，監(jiān)測(cè)細(xì)胞中自由Ca2+的變化趨勢(shì)，同時(shí)研究0-4℃溫度下脅迫1，3，5，7d后，生長(zhǎng)錐細(xì)胞中自由Ca2+的變化趨勢(shì)，揭示在組織細(xì)胞中自由Ca2+的變化與抗寒的關(guān)系，并研究甘蔗組培幼苗

2、在0-4℃脅迫1，3，5，7d后葉片細(xì)胞膜透性、游離脯氨酸含量、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛含量(MDA)和葉片蛋白質(zhì)含量等指標(biāo)的變化，以研究組培幼苗生理指標(biāo)對(duì)低溫的響應(yīng)。結(jié)果如下:
　　 1.愈傷組織細(xì)胞在冷脅迫4h內(nèi)隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)細(xì)胞遭受的傷害也加深，細(xì)胞中自由的Ca2+向細(xì)胞核富集。在4個(gè)不同Ca2+濃度處理中，Ca2+濃度440 mg/L細(xì)胞受傷現(xiàn)象最不明顯。4個(gè)濃度提高細(xì)胞抗寒性為:440 mg/L＞660 m

3、g/L＞220 mg/L＞0mg/L。就品種而言ROC22號(hào)的抗寒性不如GT28。
　　 2.從2個(gè)試驗(yàn)品種生長(zhǎng)錐細(xì)胞中ca2+分布情況而言，冷脅迫5d細(xì)胞受傷情況最嚴(yán)重，冷脅迫7d細(xì)胞由于自身適應(yīng)有所恢復(fù)。生長(zhǎng)錐細(xì)胞在冷脅迫后細(xì)胞中自由的Ca2+動(dòng)態(tài)變化與愈傷組織單細(xì)胞一致。外界環(huán)境Ca2+濃度對(duì)植物抗寒性的影響及2個(gè)甘蔗品種抗寒性強(qiáng)弱都與單細(xì)胞一致。
　　 3.植物抗性生理指標(biāo):細(xì)胞膜透性、植物體內(nèi)游離脯氨酸的含量、

4、MDA、SOD、葉片可溶性蛋白含量的結(jié)果表明:植物冷脅迫1，3，5，7d隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)植株冷害先加深后又有所恢復(fù)，冷害最嚴(yán)重的是冷脅迫5d。4個(gè)Ca2+濃度對(duì)細(xì)胞抗寒性影響大小與單細(xì)胞和組織細(xì)胞一致。植物抗寒性動(dòng)態(tài)變化與生長(zhǎng)錐細(xì)胞中自由Ca2+的變化相符。
　　 4.用鈣通道抑制劑200 ML500μmol/LLaCl3處理4-5葉的甘蔗幼苗其抗性生理指標(biāo):細(xì)胞膜透性、植物體內(nèi)游離脯氨酸的含量、MDA、SOD、葉片可溶性蛋白