水分脅迫下茶樹的生理響應(yīng)及其分子基礎(chǔ).pdf_第1頁
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文檔簡介

1、干旱是影響作物生長、限制作物產(chǎn)量的重要環(huán)境因素,嚴(yán)重時可以引起植株不可逆的傷害甚至死亡。本研究以我國重要的經(jīng)濟(jì)作物茶樹作為試驗(yàn)材料,對茶樹種質(zhì)資源進(jìn)行光合生理特性的數(shù)值分類分析,在此基礎(chǔ)上,選擇兩個有代表性的抗旱性差異明顯的茶樹品種在水分脅迫下,研究其光合生理、滲透調(diào)節(jié)及活性氧清除系統(tǒng)等方面的響應(yīng)和差異,并利用雙向電泳技術(shù)分析茶樹幼苗在水分脅迫下的蛋白表達(dá)差異。研究結(jié)果如下: 通過對52個茶樹品種在自然條件下葉片光合生理參數(shù)的數(shù)

2、值分類分析,結(jié)果表明,52個茶樹品種在葉片凈光合速率(Pn)、蒸騰速率(Tr)、氣孔導(dǎo)度(Gs)、胞間CO2濃度(Ci)以及水分利用率(WUE)方面,差異達(dá)極顯著水平(P<0.01);根據(jù)方差分析和主成分分析的結(jié)果,選擇Pn、Tr、GS和WUE等4個光合生理參數(shù)對其進(jìn)行聚類分析,可將52個茶樹品種分為5類,其中Ⅰ類的15個品種為高光合速率、中等蒸騰速率、低氣孔阻力、高水分利用效率類型,可用于茶樹的品種改良;在聚類分析基礎(chǔ)上用判別分析選出

3、對茶樹光合生理性狀數(shù)值分類有顯著影響的4個光合參數(shù),建立5個判別能力較高的判別模型。在此基礎(chǔ)上,采用盆栽試驗(yàn)方法,研究不同土壤水分脅迫對鐵觀音和福鼎大白茶2年生茶樹幼苗的光合生理特性、光合作用-光響應(yīng)特性和葉綠素?zé)晒馓匦缘挠绊憽?結(jié)果顯示:不同土壤水分處理對茶樹凈光合速率、蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度、水分利用效率等生理指標(biāo)及其日變化均產(chǎn)生明顯影響;干旱脅迫下茶樹的凈光合速率、蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度及水分利用效率下降,水分利用效率日平均值的下

4、降幅度比凈光合速率日平均值的下降幅度小;土壤干旱脅迫使鐵觀音、福鼎大白荼最大光合速率(Pnmax)、表觀量子效率(AQY)、光飽和點(diǎn)(LSP)顯著降低,而光補(bǔ)償點(diǎn)(LCP)及暗呼吸速率(Rd)提高;在干旱脅迫下,茶樹葉片的基礎(chǔ)熒光(Fo)顯著升高,最大熒光(Fm)、可變熒光(Fv),PSⅡ原初光能轉(zhuǎn)化效率(Fv/Fm)、PSⅡ的潛在活性(Fv/Fo)顯著下降,表明干旱脅迫使茶樹葉片PSⅡ反應(yīng)中心受到傷害;干旱脅迫還降低了茶樹的光化學(xué)反應(yīng)

5、速率(Prate),縮短了熒光上升時間(T1/2),抑制了PSⅡ反應(yīng)中心電子的傳遞(ETR降低),導(dǎo)致天線色素?zé)岷纳⑺俾?Drate)、非光化學(xué)猝滅(qN)和光合功能相對限制值L(PFD)升高,光化學(xué)猝滅(qP)和PSⅡ?qū)嶋H光化學(xué)效率(Yield)都顯著下降。無論在正常供水還是在干旱脅迫條件下,鐵觀音均表現(xiàn)出更高的光合活性,其Pn、Pnmax、LSP及AQY值均比福鼎大白茶高,而Rd、LCP值比福鼎大白茶低。說明生長在同一生境中的鐵觀音

6、對光照、土壤水分的生態(tài)適應(yīng)能力高于福鼎大白茶。比較在干旱脅迫下鐵觀音和福鼎大白茶葉片的葉綠素?zé)晒庾兓l(fā)現(xiàn)鐵觀音PSⅡ反應(yīng)中心的脅迫耐性較強(qiáng),葉片的光化學(xué)效率較高。 同時研究還表明,干旱脅迫下茶樹幼苗葉片相對含水量(RWC)隨脅迫程度的加大而降低,可溶性蛋白質(zhì)的含量隨脅迫程度的加大而增多,但在重度脅迫下,福鼎大白茶的可溶性蛋白質(zhì)含量下降;可溶性糖含量也隨干旱脅迫程度的加大而顯著增加,與葉片的含水量之間呈顯著負(fù)相關(guān);脯氨酸含量隨脅

7、迫程度的加大而顯著增多,但在重度脅迫下,福鼎大白茶的脯氨酸含量下降。正常供水條件下,鐵觀音葉片可溶性蛋白和可溶性糖含量都比福鼎大白茶的高,脯氨酸含量低于福鼎大白茶;但在干旱脅迫下,可溶性蛋白、可溶性糖含量和脯氨酸含量的增幅都比福鼎大白茶大。而活性氧代謝分析結(jié)果顯示,在干旱脅迫下,茶樹葉片活性氧的積累增多,細(xì)胞膜透性加大,MDA含量增加;SOD、POD、CAT、APX和GR活性以及AsA和GSH含量在輕度、中度干旱脅迫下上升,在重度干旱脅

8、迫下下降;而福鼎大白茶在輕度干旱脅迫下上升,在中度、重度干旱脅迫下下降。應(yīng)用熒光定量PCR的方法對活性氧代謝相關(guān)的3個主要保護(hù)酶基因在PEG脅迫下的表達(dá)情況進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,與對照相比,PEG脅迫下Cu/Zn SOD基因表達(dá)量隨著脅迫時間延長呈現(xiàn)出“升高-降低-升高”的變化特點(diǎn),相對表達(dá)量變化范圍為0.49-3.06;CAT基因則在PEG脅迫的初期(3、6h)表達(dá)量明顯上調(diào),之后下降,相對表達(dá)量變化范圍為0.15-3.45;APX基因

9、在脅迫的24h內(nèi)基本都表現(xiàn)為上調(diào)表達(dá),但12h內(nèi)上調(diào)幅度不大,脅迫24h表達(dá)量最大,之后表現(xiàn)為下調(diào),相對表達(dá)量變化范圍為0.86-1.98。在PEG脅迫下表達(dá)特性的不同,說明本研究中與活性氧代謝相關(guān)的3個主要保護(hù)酶基因?qū)Ω珊淡h(huán)境的響應(yīng)行為存在明顯差異。 本研究還應(yīng)用差異蛋白質(zhì)組學(xué)方法分析了鐵觀音茶樹幼苗在PEG脅迫下葉片蛋白質(zhì)組的變化。對18個蛋白質(zhì)點(diǎn)在PEG脅迫下的變化特點(diǎn)進(jìn)行了分析,并對有差異表達(dá)的16個蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行了質(zhì)譜分

10、析,共鑒定出14個蛋白質(zhì)點(diǎn),代表了10種不同的蛋白,其中5個點(diǎn)是同一個蛋白(1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶大亞基,RubisoLSU),另9個蛋白是PEG脅迫響應(yīng)蛋白,包括光合系統(tǒng)Ⅱ23kDa多肽,葉綠體伴侶蛋白21(ch-Cpn21)、磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)、三磷酸腺苷合酶β亞基、S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS1)、磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白(CEN)、新生多肽相關(guān)復(fù)合物α亞基(α-NAC)、20S蛋白酶體α亞基(PAE2)、翻譯起

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