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![兩種臭椿病害診斷及其病原菌生物學(xué)和病理學(xué)特性.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/23bda13e-3fe5-4645-8199-fa4a27789ae0/23bda13e-3fe5-4645-8199-fa4a27789ae01.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、臭椿(Ailanthus altissima)原產(chǎn)于中國(guó),于18世紀(jì)作為觀賞植物及藥用植物傳入北美。至今,臭椿在美國(guó)從緬因州到佛羅里達(dá),從西部到加利福尼亞的42個(gè)州都有廣泛分布。現(xiàn)在已成為美國(guó)重點(diǎn)防治的七種外來(lái)入侵樹(shù)種之一。在入侵物種原產(chǎn)地尋找一種自然生物控制因子是國(guó)際上普遍使用的防治手段,在中國(guó)尋找臭椿的生物控制因子是中美在生物防治領(lǐng)域開(kāi)展的國(guó)際合作項(xiàng)目之一,因此尋找臭椿病原菌、篩選其生防菌成為亟待解決的問(wèn)題。近年來(lái)我們通過(guò)廣泛調(diào)查國(guó)
2、內(nèi)臭椿病害和在各地大量的采集臭椿病樣,記錄了臭椿白粉病、炭疽病、葉斑病等多種臭椿病害;通過(guò)對(duì)臭椿病樣進(jìn)行組織分離,得到了30多株菌株。經(jīng)癥狀觀察和致病性測(cè)定表明,引起臭椿白粉病和炭疽病的兩種致病菌侵染性較強(qiáng),導(dǎo)致臭椿發(fā)病最為嚴(yán)重。本實(shí)驗(yàn)針對(duì)這兩種病害的病原鑒定、發(fā)生發(fā)展規(guī)律及兩種病原物的生物學(xué)特性、接種條件、寄主范圍等方面進(jìn)行了系統(tǒng)研究。 臭椿白粉病菌診斷鑒定:白粉菌(Erysiphales)屬于專性植物寄生菌,通過(guò)氣流傳播,白
3、粉菌侵染臭椿植株后,在其葉片表面形成分生孢子梗,產(chǎn)生大量分生孢子,植株外觀呈白粉狀。菌絲體壁薄,有隔;分生孢子梗直立,透明,其上著生分生孢子;分生孢子單生或串生,透明,薄壁,單胞,細(xì)胞內(nèi)具液泡,基部細(xì)長(zhǎng),近頂部膨大,頂端有乳突,表面具橫向排列成環(huán)的微糙毛。分生孢子萌發(fā)產(chǎn)生初生芽管,初生芽管長(zhǎng)到一定長(zhǎng)度后形成次生芽管,并在交界處易形成附著胞,由此固著于寄主組織表面,附著胞復(fù)雜多分叉,固著于寄主組織表面。閉囊殼散生,形成至生長(zhǎng)期球形,干燥后
4、扁球形或雙凸透鏡形,直徑144~312μm;長(zhǎng)型附屬絲9~21根,針形,頂端尖削,基部膨大成球形,子囊10~45個(gè)或更多,常為20~30個(gè),長(zhǎng)橢圓形或卵形,有柄,54~105μm×22~39μm;子囊孢子1~2個(gè),多為2個(gè),卵形或橢圓形,19~38.8μm×15~25μm。依據(jù)臭椿白粉病病原菌的形態(tài)特征及rDNA ITS區(qū)段(GenBank登錄號(hào)為GQ119340)分子鑒定結(jié)果,該白粉病病原菌的無(wú)性時(shí)期鑒定為榛擬小卵孢(Ovulario
5、psis guttata),有性時(shí)期為榛球針殼[Phyllactinia guttata(Wallr.)Lév.]。 臭椿白粉菌分生孢子萌發(fā)與主要侵染條件:臭椿白粉菌分生孢子萌發(fā)的溫度范圍為10~30℃,最適溫度為20~25℃;濕度對(duì)分生孢子萌發(fā)影響不大,白粉菌分生孢子萌發(fā)的相對(duì)濕度(RH)范圍為11.3~100%,最適萌發(fā)RH為75~85%;黑暗條件抑制分生孢子萌發(fā),給黑暗條件下的分生孢子增加光照,分生孢子可萌發(fā),并且仍存在很
6、高的萌發(fā)率。不同溫度對(duì)侵染的影響表明,10~30℃均能完成侵染,15~20℃潛伏期最短,在20℃潛育期最短、發(fā)病率最高,在10℃時(shí)分生孢子能完成侵染,但不產(chǎn)孢;分生孢子完成侵染的相對(duì)濕度(RH)范圍為30~90%,在RH為50%時(shí),發(fā)病最快,在RH為40%時(shí)潛育期最短,超過(guò)90%時(shí)不產(chǎn)孢;12h光照/d最有利于分生孢子侵染、潛育期最短、葉片發(fā)病率最高。光照時(shí)間超過(guò)20h/d不發(fā)病。 臭椿白粉菌田間致病力測(cè)定及野外發(fā)生動(dòng)態(tài):田間致
7、病力測(cè)定結(jié)果顯示臭椿白粉病在條件適宜時(shí),大約兩個(gè)月即可從初侵染達(dá)到發(fā)病高峰,臭椿葉片病情指數(shù)可達(dá)75%以上。臭椿白粉病每年6月在臭椿葉片上開(kāi)始零星發(fā)生,初侵染病菌基數(shù)較低,發(fā)病較輕,隨著病菌數(shù)量的增加,環(huán)境條件的適宜,加之此期又是新梢迅速生長(zhǎng)期,所以病情指數(shù)上升明顯,造成秋季的發(fā)病高峰;在8、9、10月份發(fā)病達(dá)到高峰,至11月份,病害的發(fā)生仍比較重,但在后期由于發(fā)病嚴(yán)重的葉片提早脫落和氣溫的逐漸降低,造成田間病情指數(shù)呈下降趨勢(shì)。依據(jù)Ep
8、itimulator軟件對(duì)病情指數(shù)進(jìn)行曲線擬合計(jì)算,得出用Richards函數(shù)擬合得到的模型,是臭椿白粉病病情指數(shù)增長(zhǎng)曲線的最優(yōu)擬合模型,模擬所得到的病情指數(shù)(x)與時(shí)間(t)之間的關(guān)系模型為:x=[1+(-1.4766e-0.0172t)]3.6881。 臭椿炭疽病菌診斷鑒定:臭椿炭疽病是一種葉部侵染病害,通過(guò)雨水傳播,主要侵染葉片,病斑散生,卵圓形或不規(guī)則形,病斑正面黑褐色,背面淺褐色。病斑中部淺褐色至灰色,邊緣有褐色暈圈,
9、病斑背面由于葉脈限制呈不規(guī)則形,常愈合成不規(guī)則大型病斑,可致病葉枯死脫落,病葉經(jīng)保濕培養(yǎng)后,可在病部產(chǎn)生帶有剛毛的分生孢子盤(pán)。通過(guò)組織分離和純化得到了菌株SQD-107,通過(guò)柯赫氏證病律證明該菌株為病害的病原菌,該菌在馬鈴薯蔗糖瓊脂(PSA)培養(yǎng)基上長(zhǎng)勢(shì)良好,菌落圓形、呈地毯狀平鋪;分生孢子堆棕色,膠質(zhì)狀,分生孢子橢圓形、無(wú)色單胞、兩端鈍圓;子囊殼鴨梨形、其內(nèi)形成子囊,子囊長(zhǎng)棒狀,內(nèi)含8個(gè)無(wú)色單胞、紡錘形子囊孢子。從形態(tài)特征和rDNA
10、ITS區(qū)段(GenBank登錄號(hào)為GQ119341)分子鑒定確定菌株SQD-107無(wú)性時(shí)期為盤(pán)長(zhǎng)孢狀刺盤(pán)孢(Colletotrichum gloeosporioides Penz.),有性時(shí)期為圍小叢殼(Glomerella cingulata Spauld.et Schrenk)。分生孢子接種試驗(yàn)結(jié)果表明,菌株SQD-107對(duì)臭椿的致病力較強(qiáng)。 菌株SQD-107主要生物學(xué)特性:該菌株在PSA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)最快、產(chǎn)孢量最大;在供
11、測(cè)碳源中病原菌對(duì)蔗糖、葡萄糖利用較好,供測(cè)氮源中對(duì)硝酸銨、氯化銨利用較好。菌絲生長(zhǎng)的適宜溫度范圍為10~35℃,最適25℃;產(chǎn)生分生孢子的適宜溫度范圍為10~30℃,最適25~30℃;孢子萌發(fā)的適宜溫度范圍為5~35℃,最適25℃。在pH3~10的范圍內(nèi)該菌均能生長(zhǎng)和產(chǎn)孢,菌絲生長(zhǎng)最適pH7~8;產(chǎn)生分生孢子最適pH為7,孢子萌發(fā)最適pH6~8。孢子的致死溫度為60℃,持續(xù)時(shí)間10 min。 兩種病原菌寄主范圍及生物安全性:參考
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