1、<p>　　本科畢業(yè)論文(設計)</p><p>　題 目：魚安定MS-222和丁香酚對日本黃姑魚的麻醉效果研究</p><p>　學 院：</p><p>　學生姓名：</p><p>　專 業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖</p><p>　班 級：</p><p>　指導教師

2、：</p><p>　起止日期：</p><p><b>　　目錄</b></p><p><b>　　中文摘要1</b></p><p>　　英文摘要錯誤!未定義書簽。</p><p>　　1. 前言錯誤!未定義書簽。</p><p>　　2.

3、 實驗材料與方法錯誤!未定義書簽。</p><p>　　2.1 實驗材料錯誤!未定義書簽。</p><p>　　2.2 實驗條件4</p><p>　　2.3 實驗方法4</p><p>　　3. 結果與分析6</p><p>　　3.1 不同濃度的麻醉劑藥液對日本黃姑魚的麻醉效果6</p>

4、<p>　　3.2 麻醉劑對日本黃姑魚呼吸頻率的影響7</p><p>　　3.3 不同藥浴時間對日本黃姑魚復蘇的影響8</p><p>　　3.4 空氣中的暴露時間對深度麻醉日本黃姑魚復蘇的影響錯誤!未定義書簽。</p><p>　　4. 討論錯誤!未定義書簽。</p><p>　　4.1 麻醉劑濃度與麻醉、復蘇時間的關系

5、錯誤!未定義書簽。</p><p>　　4.2 麻醉劑濃度對日本黃姑魚呼吸頻率的影響錯誤!未定義書簽。</p><p>　　4.3 麻醉劑的麻醉效果與安全性錯誤!未定義書簽。</p><p>　　4.4 麻醉劑在標志放流中的實用性錯誤!未定義書簽。</p><p>　　小結錯誤!未定義書簽。</p><p>

6、<b>　　致謝13</b></p><p>　　參考文獻錯誤!未定義書簽。</p><p>　　魚安定MS-222和丁香酚對日本黃姑魚的麻醉效果研究</p><p>　　[摘要] 研究了MS-222和丁香酚2種麻醉劑對日本黃姑魚的麻醉效果，探討了2種麻醉劑應用于日本黃姑魚（Nibea japonica）標志放流和長途運輸?shù)目尚行浴Ｂ樽碓?/p>

7、驗結果表明：水溫25~27℃下，丁香酚的有效麻醉濃度為20~40mg/L，最佳麻醉濃度為20~30 mg/L，MS-222的有效麻醉濃度為40~60mg/L，最佳麻醉濃度為45~55 mg/L；日本黃姑魚的呼吸頻率隨麻醉劑濃度的升高而降低，魚體對高濃度麻醉劑表現(xiàn)出較強的應激反應；相同藥浴時間下，魚體進入深度麻醉狀態(tài)，經(jīng)丁香酚麻醉的魚體在空氣中放置的時間更長。試驗結果表明，丁香酚更適合用于對日本黃姑魚的麻醉操作及日本黃姑魚的長途運輸。&l

8、t;/p><p>　　[關鍵字] MS-222 丁香酚 日本黃姑魚 麻醉 </p><p>　　The study of anaesthetic effect to Nibea japonica about Fish stability MS-222 and eugenol</p><p>　　[Abstract] We make a research ab

9、out the anesthetic effect of MS-222 and eugenol on the Nibea japonica and discusses the feasibility of the two anesthetics used in Nibea japonica marks and the long-distance transportation. Anesthesia test results show t

10、hat under the water temperature between 25 and 27℃, the effective concentration of eugenol is between 20 and 40 mg/L, the best concentration is between 20 and 30 mg/L, while the effective concentration of MS-222 is betwe

11、en 40 and 60 mg/L and the b</p><p>　　[Key words] MS-222 eugenol Nibea japonica anesthesia</p><p>　　魚安定MS-222和丁香酚對日本黃姑魚的麻醉效果研究</p><p><b>　　1. 前言</b></p><p

12、>　　麻醉劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中應用廣泛，能顯著降低魚的活力，減少損傷，有效提高成活率，常用于苗種運輸、親魚采卵、標志放流和疫苗免疫等方面[1]。目前，常用的麻醉劑有MS-222、鹽酸苯佐卡因、丁香酚、喹哪啶和液態(tài)二氧化碳等，各種麻醉劑在麻醉效果與使用濃度方面存在差別[2]。</p><p>　　MS-222（間氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸鹽）是一種被FDA批準的漁用安全麻醉劑，已被廣泛應用于魚類、蛙類的稱量、運輸、標

13、記等過程中，具有較好的麻醉和鎮(zhèn)靜的效果[3]。MS-222的使用方法一般采取藥液浸泡、噴霧和注射等，藥液浸泡是最常用的方法[4]。目前，國內(nèi)常見利用MS-222麻醉淡水魚的報道，如施氏鱘、中華鱘、美洲鰣等。而對海水魚的研究鮮有報道；國外學者已開始對庸鰈、真鯛等海水魚種進行麻醉研究[5]。</p><p>　　丁香酚是一種毒性較小的植物香料，在醫(yī)學上作為牙科的鎮(zhèn)痛劑被廣泛使用[6]。1972年，日本的遠藤發(fā)現(xiàn)丁香酚

14、對魚有強烈的麻醉效果，開始將它作為麻醉劑進行了系列研究。近年來，因為丁香酚具有對人體無害，價廉易得，其液體制劑在淡水和海水中溶解性好等特點，所以它被廣泛應用于親魚采卵、活魚運輸過程中。</p><p>　　標志放流技術是一種研究魚類資源和魚類洄游的方法。首先在魚體上做標志，然后通過重新捕獲所得的標志魚，根據(jù)標志放流的記錄和重捕記錄，繪制魚類標志放流分布圖以及重捕分布圖，用來推測魚類游動的方向、速度、范圍和路線等；

15、若進一步結合魚體年齡資料、長度和重量，則可研究魚類的生長和死亡規(guī)律，進一步可以用來檢驗增殖放流的效果[7-9 ] 。此外，根據(jù)魚類標志放流的結果還可以估算魚類種群數(shù)量的變動。我國對魚類標志技術的研究相對于其他國家來說起步較晚，有關報道較少[10] ，因此，開展這方面的工作非常迫切。</p><p>　　我國標志放流研究主要集中于對蝦和海產(chǎn)魚類的增殖研究，主要使用的是體外掛牌、化學物質(zhì)標志法和剪鰭法。其中體外掛牌和

16、剪鰭法，在試驗動物進行標志之前，都要進行麻醉，以提高標志放流的效率。</p><p>　　劉家富等[11]1987年用人工培育的大黃魚幼魚，經(jīng)過丁香酚溶液的浸浴麻醉，采用體外掛牌法進行標記，在官井洋中進行放流，通過對回捕魚的調(diào)查及其捕撈實況調(diào)查，結合在定置網(wǎng)漁獲物中天然大黃魚的數(shù)量及海區(qū)鹽度、溫度調(diào)查，對標志放流魚類早期的生態(tài)習性進行了初步研究。</p><p>　　在我國開展放流的水產(chǎn)動

17、物有：石斑魚[12]、鱘類（ 如中華鱘[13]、蝦蟹類（ 如中國對蝦）[14]、鯉科類（如銀鯽）、鯛類（ 如黑鯛[15]）、 鮭鱒魚類（各種大麻哈魚)[16]、鯉魚[17]及大黃魚[18]、海蜇[19]等經(jīng)濟海產(chǎn)。標志放流無疑在漁業(yè)放流增殖與研究中發(fā)揮著重要作用。</p><p>　　日本黃姑魚屬于鱸形目，石首魚科，黃姑魚屬，日本黃姑魚種。因為日本黃姑魚具有生長快、抗病力強等特點，近幾年在南方已開展規(guī)?；B(yǎng)殖。但

18、養(yǎng)殖苗種主要來源于自然海域，人工育苗技術尚未突破[21]。對日本黃姑魚的研究國內(nèi)報道較少。日本人工養(yǎng)殖始于60年代,人工孵化研究始于1985年，近幾年對其苗種生產(chǎn)也進行了系統(tǒng)研究[22]。</p><p>　　日本黃姑魚為肉食性魚類，攝食兇猛，游動靈活，主要捕食底表層動物[23]。日本黃姑魚主要分布于暖海區(qū)，特別是砂泥質(zhì)海區(qū)，魚類產(chǎn)卵期游向近岸的河口附近或淺水區(qū)，水深一般小于20m。日本黃姑魚仔魚期浮游生活于水表

19、層，主要攝食輪蟲等微小浮游動物及其卵粒等；稚幼魚期隨其生活空間改變，主要攝食橈足類、糠蝦、磷蝦等，隨個體增長，還可捕食甲殼類(蝦、蟹等)、小魚和其他動物，在生殖期，日本黃姑魚攝食量相對降低[21]。日本黃姑魚1年生全長可達47cm以上，2年生可達68cm，3年生可達80cm，4年生可達87cm，相較于美國紅魚，其生長快些。日本黃姑魚對鹽度的變化適應性強，適宜生活水溫范圍為6~32 ℃，最適溫度為18~28℃，適宜鹽度范圍為14~34。日

20、本黃姑魚屬石首魚科大型種類，在記錄中最大個體可達到體長1.35m，體重25 kg [22]。</p><p>　　日本黃姑魚具有生長快、抗病力強等優(yōu)良養(yǎng)殖性狀，經(jīng)濟效益好，深受廣大養(yǎng)殖戶歡迎，有望成為我國重要的新養(yǎng)殖品種之一[24]。但其體質(zhì)嬌嫩，性格暴躁，在運輸過程中，由于劇烈掙扎，極易導致受傷，其中掉鱗、充血、耳石中半硅管破裂等狀況時常發(fā)生，造成運輸死亡率極高。麻醉劑的合理使用能夠減少在運輸過程中魚體受到的各

21、種人為損傷，降低魚體的應激反應和新陳代謝，魚體能夠在運輸過程中保持安靜，達到提高成活率的目的。而且日本黃姑魚作為增殖放流的對象之一，魚體麻醉對標志放流的成敗起到關鍵作用。因此，研究不同麻醉劑對日本黃姑魚的麻醉效果，并確定其合適的麻醉劑量具有實用意義。試驗研究了丁香酚和MS-222在對日本黃姑魚的有效麻醉濃度，有效入麻時間、復蘇時間，呼吸頻率和空氣中暴露時間對深度麻醉魚體復蘇的影響等，以期為日本黃姑魚的保活運輸提供技術支撐，同時為我國海水

22、魚成魚的?；钸\輸提供參考。</p><p>　　2. 實驗材料與方法</p><p><b>　　2.1 實驗材料</b></p><p>　　本實驗在浙江省海洋水產(chǎn)研究所西軒試驗場綜合實驗室進行；日本黃姑魚幼體為自行人工繁育，魚體規(guī)格8.5~11.5cm。選擇體色正常、健壯無傷、攝食正常、大小均勻的幼魚1000尾用于試驗。試驗藥品為上海齒科材

23、料廠生產(chǎn)的魚安定MS-222、丁香酚(純丁香油)。</p><p><b>　　2.2 實驗條件</b></p><p>　　試驗用水為沙濾自然海水，試驗水溫25~27℃，pH為7.99，鹽度為28‰；試驗所需容器為200L塑料圓桶20只，實際蓄水150L；5L塑料桶6只；各試驗桶受光一致。24h不間斷充氣，由總水管通過分水器至各試驗桶。實驗沙濾水再經(jīng)300目以上過濾

24、，每日換水100~150%。試驗所用日本黃姑魚投喂日本產(chǎn)“魚寶牌”稚魚2#配合飼料。 </p><p><b>　　2.3 實驗方法</b></p><p>　　試驗前暫養(yǎng)于直徑為2.5m的塑料圓桶中，停食1d。試驗后放入盛有清水的塑料桶中，繼續(xù)觀察3d。</p><p>　　2.3.1 麻醉程度分期和行為特征</p><p

25、>　　表1 麻醉程度分期和行為特征</p><p>　　試驗將日本黃姑魚麻醉程度分為7個時期，如表1所示。第Ⅰ期（正常期），呼吸頻率正常（鰓蓋振動次數(shù)和振幅恒定）；第Ⅱ期（輕度鎮(zhèn)靜期），觸覺略失，使其平躺，能夠迅速翻身，并恢復到正常狀態(tài)，呼吸略微加快；第Ⅲ期（深度鎮(zhèn)靜期），觸覺喪失，應激反應強烈，呼吸加快，有激烈的沖撞行為；第Ⅳ期（輕度麻醉期），平衡略失，側躺水中，不能翻身，在水中來回蕩動；第Ⅴ期（麻醉期

26、），平衡喪失，魚體完全翻倒，呼吸變慢但有規(guī)律，在水中來回蕩動，鰓蓋振動變緩；第Ⅵ期（深度麻醉期），魚體靜止，呼吸不連續(xù)，偶爾出現(xiàn)咧鰓現(xiàn)象，應立即轉入清水中復蘇；第VII期（延髓麻醉期），呼吸停止，魚體死亡。</p><p>　　2.3.2 復蘇過程分期和行為特征</p><p>　　表2 復蘇過程分期和行為特征</p><p>　　試驗將復蘇過程分為4個時期，如表

27、2所示。第Ⅰ期，魚體完全翻倒，呼吸恢復，鰓蓋開始振動，魚體靜止，魚鰭開始晃動；第Ⅱ期，身體部分平衡及運動恢復，但不能翻身；第Ⅲ期，身體完全平衡，觸覺恢復；第Ⅳ期，呼吸頻率恢復正常，其他行為也完全正常。</p><p>　　2.3.3 麻醉劑有效濃度的測定</p><p>　　參考Marking等[25]對麻醉有效濃度的界定，本實驗有效濃度定義為：魚體在麻醉劑溶液中，3 min之內(nèi)達到4級

28、麻醉狀態(tài)，5 min之內(nèi)蘇醒恢復，并且成活率為100%時的濃度。</p><p>　　實驗設計10個MS-222質(zhì)量濃度梯度，分別為30、35、40、45、50、55、60、70、80、90mg/L，8個丁香酚質(zhì)量濃度，分別為2.5、5、10、20、30、40、50、60mg/L，充分攪拌均勻后放置10 min，每個梯度設計5尾實驗魚。當魚體麻醉程度達到4期時，記錄入麻時間，然后立即從麻醉劑中移出，放入清潔海水中

29、復蘇，記錄復蘇時間和成活率。</p><p>　　2.3.4 麻醉劑對呼吸頻率影響的測定</p><p>　　呼吸頻率為單位時間內(nèi)鰓蓋的張合次數(shù)。由于在高濃度的麻醉劑溶液中魚體的入麻時間較短，各期的呼吸頻率不易計數(shù)，但在低濃度麻醉劑溶液中魚體達到最終麻醉狀態(tài)時，呼吸頻率波動幅度小，而且麻醉狀態(tài)持續(xù)時間長，可以穩(wěn)定測定。故實驗測定的是在低濃度麻醉劑下魚體達到最終麻醉狀態(tài)時的呼吸頻率。將魚放

30、入清潔海水中，穩(wěn)定10min 后，計數(shù)呼吸頻率作為魚體的初始呼吸頻率，然后轉入麻醉劑溶液中，測定最終麻醉狀態(tài)下魚體的呼吸頻率。實驗設計8個MS-222質(zhì)量濃度梯度（30、40、45、50、55、60、70、80mg/L），和8個丁香酚濃度梯度（2.5、5、10、20、30、40、50、60 mg/L），每個濃度試驗用魚5尾，每尾重復測定5次，計算平均值作為魚在該麻醉狀態(tài)下的呼吸頻率。</p><p>　　2.3.

31、5 不同藥浴時間對魚體復蘇的影響</p><p>　　在有效濃度范圍內(nèi)，每種麻醉劑取3個濃度梯度，MS-222：40、50、60mg/L，丁香酚：20、30、40mg/L，在不同濃度下藥浴不同時間，記錄復蘇時間和成活率。</p><p>　　2.3.6 空氣中暴露時間對深度麻醉魚體復蘇影響的測定</p><p>　　將魚體（5尾）分別放入40、50、60mg/L

32、的MS-222溶液和20、30、40mg/L的丁香酚溶液中麻醉5 min，然后從麻醉液中移出，用濕毛巾包裹魚體中后部，分別在空氣中暴露0 min，3 min，6 min，9 min，12 min，15 min，18 min，21 min或0min，2min，4min，6min，8min，10min，12min，14min后進行復蘇，測定復蘇時間，每個暴露實驗組用魚5尾。</p><p><b>　　3.

33、 結果與分析</b></p><p>　　3.1 不同濃度的麻醉劑藥液對日本黃姑魚的麻醉效果</p><p>　　不同濃度的丁香酚藥液對日本黃姑魚的麻醉效果如表3所示。</p><p>　　表3 不同濃度的丁香酚藥液對日本黃姑魚的麻醉效果</p><p>　　隨著丁香酚濃度的升高，日本黃姑魚麻醉所需時間不斷縮短，兩者呈負相關。在

34、2.5mg/L時麻醉所需時間長達20min，濃度升高至60mg/L，麻醉僅需11s，但其復蘇時成活率僅為60%，因此丁香酚對日本黃姑魚的有效麻醉濃度為5~40mg/L。試驗表明，2.5~5mg/L這一階段降幅最大，在2.5mg/L范圍內(nèi)，麻醉時間縮短了10倍以上。而從5mg/L到60mg/L這一階段，降幅相對較少。</p><p>　　圖1 丁香酚對日本黃姑魚的麻醉效果</p><p>

35、　　日本黃姑魚復蘇所需時間與丁香酚藥液濃度呈正相關。濃度越大，復蘇所需時間越長。濃度在5mg/L時復蘇僅需70s，而當濃度達到60mg/L時，則復蘇時間長達138s，且復蘇率由40mg/L時的100%降至60%，表現(xiàn)為麻醉過度，部分魚進入死亡狀態(tài)。</p><p>　　不同濃度的MS-222藥液對日本黃姑魚的麻醉效果如表4所示。</p><p>　　表4 不同濃度的MS-222藥液對日本

36、黃姑魚的麻醉效果</p><p>　　隨著MS-222藥液濃度的升高，日本黃姑魚麻醉所需時間不斷縮短，兩者呈負相關。在30mg/L時日本黃姑魚達到麻醉狀態(tài)需要20min以上，而當濃度達到80mg/L時，麻醉僅需19s，但其復蘇成活率僅為60%，因此有效濃度為40~60mg/L。試驗表明，30~35mg/L這一階段降幅最大，在5mg/L的濃度范圍內(nèi)，麻醉時間縮短了5倍以上。而從35mg/L到80mg/L這一階段，降

37、幅相對較小。</p><p>　　圖2 MS-222對日本黃姑魚的麻醉效果</p><p>　　復蘇所需時間與MS-222藥液濃度呈正相關。MS-222藥液濃度越大，日本黃姑魚復蘇所需時間越長。濃度在35mg/L時復蘇僅需82s，而當濃度達到80mg/L時，則復蘇時間長達147s，且復蘇率由60mg/L時的100%降至60%，由于該麻醉劑會引起試驗動物神經(jīng)損傷，高濃度下呈現(xiàn)較強的毒性。&

38、lt;/p><p>　　3.2 麻醉劑對日本黃姑魚呼吸頻率的影響</p><p>　　圖3 日本黃姑魚在丁香酚不同濃度中各個時間段呼吸頻率的變化</p><p>　　日本黃姑魚在不同丁香酚濃度的麻醉液中呼吸頻率的變化規(guī)律見圖3。在低濃度2.5、5mg/L下，呼吸頻率先上升后下降；其他濃度下，整個麻醉過程的呼吸頻率均呈下降趨勢，且相同時間內(nèi)，隨著麻醉濃度的增加，呼吸頻率

39、逐漸下降。特別是在有效麻醉濃度20~40mg/L時，隨著濃度的升高，呼吸頻率下降的速率增大。在高濃度情況下，短時間內(nèi)日本黃姑魚的呼吸頻率變化較快。</p><p>　　圖4 日本黃姑魚在MS-222不同濃度中各個時間段呼吸頻率的變化</p><p>　　日本黃姑魚在不同MS-222濃度的麻醉液中呼吸頻率的變化規(guī)律見圖4。在低濃度30、40 mg/L下，呼吸頻率先上升后下降；其他濃度下，整

40、個麻醉過程的呼吸頻率均呈下降趨勢，且相同時間內(nèi)，隨著麻醉濃度的增加，呼吸頻率逐漸下降。在有效濃度范圍內(nèi)，隨著麻醉時間的增加，呼吸頻率變化逐漸縮小。在高濃度80mg/L下，日本黃姑魚在短時間內(nèi)呼吸加快，之后呼吸停止，魚體死亡。</p><p>　　3.3 不同藥浴時間對日本黃姑魚復蘇的影響</p><p>　　丁香酚不同藥浴時間對日本黃姑魚復蘇時間的影響見表5。</p><

41、;p>　　表5 丁香酚不同藥浴時間對日本黃姑魚復蘇時間的影響</p><p>　　不同丁香酚藥浴時間下，日本黃姑魚的復蘇時間和復蘇率存在顯著差異。20mg/L下藥浴25min，30mg/L藥浴15min，復蘇率均可達到100%；但40mg/L藥浴8min，魚種死亡率可達到20%，藥浴18min，死亡率達60%。隨著丁香酚濃度的增加，藥浴時間的增加，復蘇所需的時間也增加。20mg/L和30mg/L、30mg

42、/L和40mg/L兩組濃度下復蘇時間無顯著差（p>0.05），20mg/L和40mg/L之間復蘇時間有顯著差異（p<0.05）。</p><p>　　MS-222不同藥浴時間對日本黃姑魚復蘇時間的影響見表6。</p><p>　　表6 MS-222不同藥浴時間對日本黃姑魚復蘇時間的影響</p><p>　　不同的MS-222藥浴時間下，日本黃姑魚的復蘇

43、時間和復蘇率也存在顯著差異。40mg/L下藥浴12min，50mg/L下藥浴8min,復蘇率均可達到100%；但60mg/L下藥浴6min，魚種死亡率達20%，藥浴15min，死亡率達80%。日本黃姑魚復蘇所需時間和MS-222濃度和藥浴時間均呈正相關。藥浴時間超過20min，日本黃姑魚全部死亡。每兩組濃度之間的復蘇時間均無顯著差異（p>0.05）。</p><p>　　3.4 空氣中的暴露時間對深度麻醉日

44、本黃姑魚復蘇的影響</p><p>　　在空氣中暴露一段時間后對經(jīng)丁香酚深度麻醉的日本黃姑魚復蘇的影響如表7所示。</p><p>　　表7 空氣暴露時間對丁香酚深度麻醉日本黃姑魚復蘇的影響</p><p>　　被丁香酚深度麻醉的日本黃姑魚在空氣中放置時間越長，復蘇所需時間越長；深度麻醉的魚體在空氣中放置相同的時間，丁香酚濃度越高，魚體復蘇所需時間越長。被丁香酚深

45、度麻醉的日本黃姑魚在空氣中暴露9min，一直保持深度麻醉狀態(tài)，入水后65~195s內(nèi)能復蘇，復蘇率達100%。超過18min，日本黃姑魚，全部死亡。每組濃度之間的復蘇時間均無顯著差異（p>0.05）。</p><p>　　在空氣中暴露一段時間后對經(jīng)MS-222深度麻醉的日本黃姑魚復蘇的影響如表8所示。</p><p>　　表8 空氣中暴露時間對MS-222深度麻醉日本黃姑魚復蘇的影

46、響</p><p>　　被MS-222深度麻醉的日本黃姑魚在空氣中放置的時間與魚體復蘇的時間呈正相關關系，放置時間越長，復蘇所需時間越長；深度麻醉的魚體在空氣中放置相同的時間，MS-222濃度越高，魚體復蘇所需時間越長，此結論與丁香酚相似。被MS-222深度麻醉的日本黃姑魚在空氣中暴露6min，一直保持深度麻醉狀態(tài)，入水后113~158s內(nèi)能復蘇，復蘇率達100%。超過18min，日本黃姑魚全部死亡。每組濃度之間

47、的復蘇時間均無顯著差異（p>0.05）。</p><p><b>　　4. 討論</b></p><p>　　4.1 麻醉劑濃度與麻醉、復蘇時間的關系</p><p>　　日本黃姑魚和大黃魚同屬石首魚科，實驗結果發(fā)現(xiàn)丁香酚麻醉日本黃姑魚的有效濃度高于大黃魚，分析原因可能與該兩個魚種的生物學特性的差異有關。日本黃姑魚具有生長快，抗病力強等

48、特點，在麻醉前期會產(chǎn)生較強的應激反應，導致丁香酚對日本黃姑魚的有效麻醉濃度高于大黃魚。同時，人為因素的影響也可能導致這種差異。在實驗過程中，將復蘇魚體放置清水中，先復蘇的魚體會影響未復蘇的，以至于結果不精確，在條件允許的情況下，盡可能把麻醉之后的魚體分開復蘇，以保證實驗結果的準確性。在麻醉劑MS-222濃度較低時，會出現(xiàn)一開始魚體進入麻醉期，一會后魚體又開始靈活擺動尾巴，以致最終達不到麻醉期，推測與低濃度入麻時間較長使魚體長時間處于應激

49、狀態(tài)，應激反應較大有關。關于日本黃姑魚復蘇時間差異的內(nèi)在機理，還需做進一步的探究。</p><p>　　在水溫25~27℃時，濃度高于40mg/L的各組MS-222溶液和濃度高于20mg/L的各組丁香酚溶液均可對日本黃姑魚產(chǎn)生有效的麻醉效果，濃度越高，日本黃姑魚進入麻醉狀態(tài)所需的時間越短，兩種麻醉劑的麻醉時間和復蘇時間均無顯著差異（p>0.05）。本實驗有效濃度定義為：魚體在麻醉劑溶液中，3 min之內(nèi)達到

50、4級麻醉狀態(tài)，5 min之內(nèi)蘇醒恢復，并且成活率為100%時的濃度。由實驗結果可知丁香酚麻醉日本黃姑魚的有效濃度為20~40mg/L，與丁香酚麻醉大黃魚（有效麻醉濃度5~20mg/L）[26]、鯉魚（有效麻醉濃度20~40mg/L）[27]相似，鑒于日本黃姑魚能夠承受的藥浴時間和在空氣中放置時間的長短，丁香酚麻醉日本黃姑魚的最佳濃度為20~30mg/L；MS-222麻醉日本黃姑魚的有效濃度為40~60 mg/L，與MS-222麻醉金魚（

51、有效麻醉濃度65 mg/L以上）[28]、牙鲆（有效麻醉濃度60 mg/L）[29]相似，與半滑舌鰨（有效麻醉濃度120~210mg/L）[30]相差較大，濃度為90mg/L時，魚體麻醉后不能蘇醒，這主要是因為MS-222進入魚體后大部分聚集在其肝臟、脾</p><p>　　4.2 麻醉劑濃度對日本黃姑魚呼吸頻率的影響</p><p>　　呼吸頻率是反應魚體麻醉深度的一個重要指標[31]，

52、MS-222溶液是通過魚體鰓絲及體表吸收后進入血液循環(huán)系統(tǒng)，然后作用于中樞神經(jīng)，使得魚體活動能力和反射能力受到抑制，具體表現(xiàn)為排泄系統(tǒng)功能、呼吸頻率、行動活力等下降。若鰓蓋呼吸次數(shù)加快，說明魚體心跳加快，麻醉劑經(jīng)鰓部滲透的速率也愈快，故發(fā)生作用的時間短，恢復也快[32]。在有效麻醉濃度50~60mg/L時，隨著濃度的升高，呼吸頻率下降的速率增大，可見，在此濃度范圍內(nèi)，呼吸頻率下降是一個循序漸進的過程，產(chǎn)生的應激反應較??；而在麻醉濃度為7

53、0~80mg/L時，呼吸頻率在短時間內(nèi)直線下降，說明魚體在短時間內(nèi)受到較大的刺激。一般情況下，隨著麻醉程度的加深，呼吸頻率減慢。本實驗發(fā)現(xiàn)，在低麻醉液濃度30、40 mg/L時，前120s，魚體處于應激期，即淺度麻醉前期，呼吸頻率有一個上升過程，而后才下降，這與MS-222麻醉半滑舌鰨時，魚體只有處在深度麻醉階段呼吸頻率才急劇下降，而在其他淺度麻醉階段呼吸頻率略微加快一致。本實驗還發(fā)現(xiàn)，麻醉劑濃度越高，呼吸頻率下降速度越快?？梢?，呼吸頻

54、率也受麻醉液的種類與濃度的影響。丁香酚濃度對日本黃姑魚呼吸頻率的影響與</p><p>　　4.3 麻醉劑的麻醉效果與安全性</p><p>　　丁香酚具有性質(zhì)穩(wěn)定，毒性低，對人體健康無影響等特點，與MS-222相比，丁香酚毒性更小。李思發(fā)等[6]認為麻醉劑進入魚體后首先抑制腦的皮質(zhì)(觸覺喪失期)，再作用于基底神經(jīng)節(jié)與小腦(興奮期)，最后作用于脊髓(麻醉期)。但過長的接觸可深及髓質(zhì)，使呼吸

55、與血管舒縮中樞麻痹，最終導致死亡。相較丁香酚，MS-222價格更昂貴，而且使用后不會從魚體中完全消失[33]。魚體殘留物中含有間氨基苯酸、甲烷、乙醇、磺酸鹽及其化合物，因為魚可能被食用，所以我們需要考慮其殘毒。而丁香酚作為一種天然的植物香料，不必擔心它對人類和環(huán)境造成危害。因此，從人類健康與食品安全出發(fā)，丁香酚具有更大的應用前景。</p><p>　　4.4 麻醉劑在標志放流中的實用性</p>&l

56、t;p>　　丁香酚常用于親魚產(chǎn)卵、標記放流等操作中。從表5可以看出，20 mg/L濃度下藥浴5 min 后在空氣中放置15min，30mg/L、40mg/L濃度下藥浴5min后在空氣中放置9min, 魚種能在2 min 內(nèi)復蘇完好, 復蘇率達100% 。根據(jù)以上結果,我們認為在短時間離水操作中，丁香酚可作為一種較實惠的麻醉劑推廣使用。</p><p>　　MS-222作為商品用麻醉劑，人們在使用時經(jīng)常考慮其

57、有效麻醉濃度而忽略了對麻醉時間的控制，試驗表明：麻醉時間對日本黃姑魚的復蘇率有較大的影響，且個體之間也存在差異，即使是在有效麻醉濃度（50 mg/L）下，麻醉時間超過20min時，其復蘇率為0。相比于丁香酚，MS-222經(jīng)過5min的藥浴后，在空氣中放置的時間較短，從而可知，MS-222需要操作技術更加快速，有必要提高實驗操作的效率。</p><p><b>　　小結 </b></p

58、><p>　　日本黃姑魚在實際麻醉操作中宜選用丁香酚作為麻醉劑。在水溫25~27℃的條件下，丁香酚對日本黃姑魚的最佳麻醉濃度為20~30 mg/L，在此濃度下，日本黃姑魚經(jīng)過較長時間的藥浴作用，仍可在短時間內(nèi)復蘇，在空氣中能夠放置的時間較長，適合于日本黃姑魚的長途運輸。</p><p>　　綜上所述，兩種麻醉劑的麻醉效果均受到魚的種類、規(guī)格、藥物的濃度、麻醉時間等的影響。本實驗僅采用日本黃姑魚

59、魚種比較了丁香酚和MS-222的麻醉效果，而對溫度、魚的種類及規(guī)格等影響因子未作研究，我們將在今后的試驗中對此繼續(xù)深入研究。</p><p><b>　　致謝</b></p><p>　　最后，在這里感謝我的導師王老師及梁老師和徐老師，他們在論文的實驗設計及寫作過程中給予了我悉心的指導。同時也感謝在論文實驗和寫作過程中給我提供熱忱幫助的各位老師和同學。</p&g

60、t;<p><b>　　[參考文獻]</b></p><p>　　[1]陳守義. 魚類麻醉劑在活魚運輸中的應用[J]. 水產(chǎn)科學, 1992, (10): 22-23.</p><p>　　[2]魏鎖成. 用于魚類的麻醉劑及麻醉管理[J]. 西北民族大學學報, 2005, 26 (55): 43-45.</p><p>　　[3]

61、任潔, 黃永濤, 黃二春等. MS-222用于幾種活魚運輸?shù)男Ч鸞J]. 淡水漁業(yè),1998, (1): 23-35.</p><p>　　[4]任潔. MS-222在活魚中的應用研究[J].淡水漁業(yè)，1993, (6): 29-32.</p><p>　　[5]廖國璋, 龐世勛. MS-222麻醉劑在魚類運輸中的應用. 廣東科技, 1988, (1): 26-27.</p>

62、<p>　　[6]李思發(fā). 魚類麻醉劑[J]. 淡水漁業(yè), 1982, (1): 21-22.</p><p>　　[7]張?zhí)昧? 李種杰, 舒少武. 魚類標志技術的研究進展[J]. 中國水產(chǎn)科學, 2003, 3 (6) : 246- 253.</p><p>　　[8] Ricker W E. Methods for assessment of fish producti

63、on in fresh water[M] . IMP Handbook No. 3 , Blackwell Science Publication, 1971. 82-97.</p><p>　　[9]Nielsen L A. Methods of marking fish and shell fish[M] . New York : American Fisheries Society Special Publ

64、ication, 1992, 23: 37-38.</p><p>　　[10]林元華. 海洋生物標志放流技術的研究狀況[J]. 海洋科學, 1985, 9 (5): 54-58.</p><p>　　[11]劉家富, 翁忠釵, 唐曉剛. 官井大黃魚標志放流技術與放流標志魚早期生態(tài)習性的初步研究[J ] . 海洋科學, 1994, (5) : 53-58.</p><p

65、>　　[12]薄治禮, 周婉霞. 石斑魚增殖放流研究[J].浙江海洋學院學報（自然科學版）, 2002, (4): 321-326.</p><p>　　[13]林金忠, 王軍, 蘇永全. 中華鱘于閩江的人工放流試驗[J]. 臺灣海峽, 1999, (4): 379-380.</p><p>　　[14]樓寶. 象山港人工放流中國對蝦的生長特性研究[J]. 浙江水產(chǎn)學院學報, 199

66、8, (1): 51-58.</p><p>　　[15]林金錶, 陳濤, 陳琳等. 大亞灣黑鯛標志放流技術[J]. 水產(chǎn)學報, 2001, (1): 80-83.</p><p>　　[16]王惠芳, 田軍等. 大洋河大麻哈魚類移殖放流及回歸效果的初步研究[J]. 水產(chǎn)學雜志, 1996, (1): 41-44.</p><p>　　[17]華家棟, 張國祥. 黃

67、浦江人工放流鯉魚、銀卿的研究[J]. 水產(chǎn)科技情報, 1992, (5): 142-145.</p><p>　　[18]徐漢祥, 周永東. 浙北沿岸大黃魚放流增殖的初步研究[J]. 海洋漁業(yè), 2003, (2): 69-71.</p><p>　　[19]王緒峨, 宋向軍, 張云尚等.菜州灣海蜇放流增殖的回捕率和效益分析[J]. 現(xiàn)代漁業(yè)信息, 1995, (2): 27-29.<

68、;/p><p>　　[20]立川互, 陳憲仁. 用人工放流標志魚的方法深討堰壩對魚類洄游的影響[J]. 水利漁業(yè), 1993, (1): 55-56.</p><p>　　[21]蘇躍中, 金漢鋒, 李燕平等. 日本黃姑魚人工繁殖及苗種培育技術的初步研究. 海洋科學, 1994, 4: 1-3</p><p>　　[22]田原健. «¹ の種の種苗生

69、產(chǎn)に關すゐ研究É. 親魚養(yǎng)成と采卵. 水產(chǎn)增殖, 1988, 35 (4) : 265-270.</p><p>　　[23]王 波, 張錫烈, 曲秀家等. 日本黃姑魚的生物學特性及苗種生產(chǎn)技術[J]. 海洋水產(chǎn)研究, 2002, 23 (4): 13-19.</p><p>　　[24]許源劍. 日本黃姑魚的研究進展[J]. 現(xiàn)代漁業(yè)信息. 2010, (5): 6-8.<

70、;/p><p>　　[25] Marking L L，Meyer F P. Are batter anesthetics needed in fisheries? [J]. Fisheries, 1985, 10 (6): 2-5.</p><p>　　[26]趙艷麗, 楊先樂, 黃艷平. 丁香酚對大黃魚麻醉效果的研究[J]. 水產(chǎn)科技情報, 2002, 29 (4): 163-165.<

71、;/p><p>　　[27]李春梅, 黃永堅. 丁香酚麻醉鳊魚、鳙魚的試驗[J]. 黑龍江科技信息, 2009, (29): 15-16.</p><p>　　[28]向建國, 何福林, 陳 才等. MS-222麻醉金魚模擬運輸試驗[J]. 水利漁業(yè), 2005, 25 (4): 13-15.</p><p>　　[29]王秀華, 張燁偉, 楊春志. MS-222對牙鲆

72、麻醉效果[J]. 漁業(yè)科學進展, 2009, 30 (3): 1-6.</p><p>　　[30]劉長琳, 陳四清, 何 力等. MS-222對半滑舌塌成魚的麻醉效果研究[J]. 中國水產(chǎn)科學，2008, 15 (1): 92-99.</p><p>　　[31]Mahmut Y, Metin K. The an aesthetics effects of Quinaldine Sulp

73、hate and/or Diazapam on Sea Bass( Dicentrarchus labrax)juveniles[J] .Turk J Vet Anim Scl，2001,25: 185-189.</p><p>　　[32] Oikawa S, Takeda T, Itazawa Y. Scale effects of MS-222 on a marine teleost, porgy pagr