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文檔簡(jiǎn)介
1、FtsH是由ftsH基因編碼的一種 ATP和Zn2+賴(lài)的兼職蛋白,兼具ATP酶活性、蛋白水解活性和類(lèi)分子伴侶活性,參與生物體內(nèi)許多生理代謝的調(diào)節(jié),在植物中與多種逆境脅迫密切相關(guān)。目前研究認(rèn)為FtsH蛋白參與PSⅡ核心蛋白D1蛋白光氧化損傷的降解,是植物抵抗光抑制,修復(fù)PSⅡ正常功能的關(guān)鍵成分之一。大豆中還沒(méi)有該基因的相關(guān)研究報(bào)道。因此,本研究擬在大豆中克隆ftsH基因,分析其生物信息學(xué)特征,轉(zhuǎn)化煙草并初步鑒定其功能,
獲得
2、主要結(jié)果如下:
1.從大豆科豐一號(hào)中克隆了GmFtsH基因的cDNA全長(zhǎng),多重序列比較分析表明GmFtsH與其它植物物種FtsH具有很高的同源性,有共同的保守結(jié)構(gòu)域,屬于AAA蛋白酶家族成員;以克隆的GmFtsH為查詢(xún)序列,搜索大豆基因組數(shù)據(jù)庫(kù),發(fā)現(xiàn)GmFtsH基因定位于15號(hào)染色體,編碼區(qū)包括4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子;系統(tǒng)發(fā)育分析表明GmFtsH與AtFtsH2、AtFtsH8、Nt1親緣關(guān)系較近。
2.對(duì)大
3、豆科豐一號(hào)幼苗進(jìn)行光氧化和干旱脅迫下GmFtsH在不同組織中的熒光定量表達(dá)分析,結(jié)果表明GmFtsH在光氧化劑MV作用下,在根和葉中的表達(dá)量隨時(shí)間變化呈上升趨勢(shì),在莖中先出現(xiàn)抑制表達(dá),4小時(shí)后表達(dá)量上升,至12小時(shí)達(dá)到原初表達(dá)量的8倍,說(shuō)明GmFtsH是受MV誘導(dǎo)表達(dá)的,與光氧化脅迫密切相關(guān);在干旱脅迫下,根和莖中的表達(dá)量隨時(shí)間變化不明顯,在葉中表達(dá)量隨時(shí)間變化呈上升趨勢(shì),說(shuō)明GmFtsH在葉中受PEG6000誘導(dǎo)表達(dá),與干旱脅迫有關(guān),
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