1、腫瘤藥理學(xué),趙秀梅天津市醫(yī)藥科學(xué)研究所 2015年6月27日,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用第3部分 抗腫瘤新藥臨床前藥理學(xué)研究方法,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第1章 惡性腫瘤的病因?qū)W及發(fā)病機(jī)制1.1 惡性腫瘤的致病因素1.1.1 外界致癌因素（1）化學(xué)致癌因素 （2）物理致癌因素（

2、3）生物致癌因素,,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第1章 惡性腫瘤的病因?qū)W及發(fā)病機(jī)制1.1 惡性腫瘤的致病因素1.1.2 機(jī)體致癌因素（1）遺傳因素（2）性別和年齡因素（3）生活因素等,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第2章 癌基因與抑癌基因 2.1 癌基因與抑癌基因的基礎(chǔ)知識(shí) （1）癌基因是一類在正常情況下對(duì)細(xì)胞的增殖有正調(diào)控作用的基因，是細(xì)胞內(nèi)總體遺傳物質(zhì)的組成部分。根據(jù)其來(lái)源可以分為兩類：病毒癌基因和細(xì)胞癌基因

3、。 （2）抑癌基因或腫瘤抑制基因又稱為抗癌基因，是能夠抑制細(xì)胞癌基因活性的一類基因。,2.2 癌基因、抑癌基因與腫瘤 癌基因的激活和抑癌基因的失活最終會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞分裂的失控，從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第3章 信號(hào)傳導(dǎo)與腫瘤 3.1 信號(hào)傳導(dǎo)的基礎(chǔ)知識(shí) 細(xì)胞信號(hào)通路指細(xì)胞接受外界信號(hào)，通過(guò)一整套特定的機(jī)制，將胞外信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)為胞內(nèi)信號(hào)，最

4、終調(diào)節(jié)特定基因表達(dá)，并引起細(xì)胞的應(yīng)答反應(yīng)。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,3.2 信號(hào)傳導(dǎo)的主要途徑（1）膜受體介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑 包括：離子通道受體；G蛋白受體；酶偶聯(lián)型受體。 （2）細(xì)胞內(nèi)受體介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑 本質(zhì)是激素激活的基因調(diào)控蛋白,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,3.3 信號(hào)傳導(dǎo)與腫瘤 細(xì)胞的正常生長(zhǎng)與增殖是由兩大類基因來(lái)調(diào)控的，一類是正調(diào)節(jié)信號(hào)：促進(jìn)細(xì)

5、胞生長(zhǎng)和增殖，并阻止其發(fā)生終末分化，調(diào)控失常時(shí)表現(xiàn)為腫瘤細(xì)胞的惡性生長(zhǎng)，現(xiàn)已知多數(shù)癌基因起這一作用；另一類為負(fù)調(diào)節(jié)信號(hào)：抑制增殖，促進(jìn)分化、成熟和衰老，最后凋亡，抑癌基因則在這方面發(fā)揮作用。這兩類信號(hào)在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的效應(yīng)相互拮抗，相互平衡，對(duì)正常細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和衰亡進(jìn)行精確地調(diào)控。當(dāng)這兩類基因中任何一種或它們共同的變化，即有可能引起細(xì)胞增殖失控導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第4章 細(xì)胞周期與腫瘤 4.1 細(xì)胞周期

6、基礎(chǔ)知識(shí) （1）細(xì)胞周期的主要特征（2）細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn) ① G1/S期檢驗(yàn)點(diǎn)； ② S期檢驗(yàn)點(diǎn)； ③ G2/M期檢驗(yàn)點(diǎn)； ④ 中/后期檢驗(yàn)點(diǎn)，又稱紡錘體組裝檢驗(yàn)點(diǎn)。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,4.2 細(xì)胞周期與腫瘤 人類腫瘤的發(fā)生與癌基因的激活和抑癌基因的失活有關(guān)，而現(xiàn)已知癌基因和抑癌基因作用的歸結(jié)點(diǎn)均在于對(duì)細(xì)胞周期的調(diào)控。腫瘤細(xì)胞周期

7、調(diào)控失常多表現(xiàn)為其正調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞周期蛋白過(guò)度表達(dá)，而發(fā)揮負(fù)調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞周期蛋白激酶抑制因子卻常常失活。 腫瘤是一類以細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖失控為主要特征的疾病，細(xì)胞在增殖、分化和凋亡的異常都參與了腫瘤的發(fā)生發(fā)展，其中細(xì)胞周期紊亂是腫瘤最主要的發(fā)生機(jī)制。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第5章 細(xì)胞凋亡與腫瘤 5.1 細(xì)胞凋亡的基礎(chǔ)知識(shí) 細(xì)胞凋亡是在一定的生理或病理?xiàng)l件下細(xì)胞內(nèi)特定的“自殺”程序啟

8、動(dòng)后引起的細(xì)胞程序性死亡。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,5.2 細(xì)胞凋亡與腫瘤 ①基因水平上誘導(dǎo)凋亡基因如p53、bax、c-myc等失活以及抑制凋亡基因過(guò)度表達(dá)； ②機(jī)體免疫反應(yīng)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的功能不全； ③宿主因子如細(xì)胞黏附分子、腫瘤生長(zhǎng)因子等抑制腫瘤細(xì)胞凋亡； ④前癌細(xì)胞凋亡機(jī)制不全。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第6章 端粒酶與腫瘤 6.1 端粒酶的基礎(chǔ)知識(shí) （1）端粒的概念

9、 端粒(telomere)是真核細(xì)胞線形染色體末端由DNA與調(diào)節(jié)蛋白組成的一種特殊結(jié)構(gòu)，可防止染色體末端降解、融合，從而起到保護(hù)染色體完整性、維持細(xì)胞穩(wěn)定性的作用。,（2）端粒酶的組成 人端粒酶主要由三部分組成：端粒酶RNA組分(hTR)、端粒酶催化亞基(hTERT)以及端粒酶相關(guān)蛋白(TPl／TLPl)。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,6.2 端粒酶與腫瘤 正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的，由細(xì)胞

10、分裂次數(shù)決定，即“Hayflick界限”。 端粒酶的激活是細(xì)胞走向永生化的必要途徑，而永生化又被認(rèn)為是腫瘤惡化的必要步驟。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第7章 腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移 7.1 腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)知識(shí) （1） 腫瘤侵襲(tumor invasion) 是指惡性腫瘤細(xì)胞離開(kāi)原發(fā)生長(zhǎng)部位，突破基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成的屏障，侵犯毗鄰的正常組織，腫

11、瘤侵襲的組織發(fā)生變性和壞死。侵襲可分為兩大類，即原發(fā)性侵襲和繼發(fā)性侵襲。,（2）腫瘤轉(zhuǎn)移(tumor metastasis) 是指惡性腫瘤細(xì)胞從原發(fā)部位，侵入淋巴管、血管或體腔，至靶組織或靶器官，長(zhǎng)出與原發(fā)瘤不相連續(xù)而組織學(xué)類型相同的腫瘤。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第8章 血管生成與腫瘤 8.1 血管生成的

12、基礎(chǔ)知識(shí) 是指源于已經(jīng)存在的毛細(xì)血管和毛細(xì)血管后靜脈的新生毛細(xì)血管生成。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,8.2 血管生成與腫瘤腫瘤的血管生成基本步驟為：①腫瘤血管生成因子與血管生成抑制因子失衡，血管生成表型(angiogenic phenotype)形成；②血管內(nèi)皮基底膜的降解；③內(nèi)皮細(xì)胞向腫瘤組織遷移及在遷移中增殖；④內(nèi)皮細(xì)胞管道化、分支化形成血管環(huán)；⑤形成新的基底膜。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論

13、,第9章 多藥耐藥與腫瘤 9.1 多藥耐藥的基礎(chǔ)知識(shí) 多藥耐藥(MDR)是指細(xì)胞對(duì)一種藥物產(chǎn)生耐藥性的同時(shí)，對(duì)未接觸過(guò)的、結(jié)構(gòu)無(wú)關(guān)的、機(jī)制各異的其他抗腫瘤藥物也具有交叉耐藥性。,9.2 多藥耐藥與腫瘤 形成機(jī)制： ①藥物的轉(zhuǎn)運(yùn)或攝取障礙；②藥物的活化障礙； ③靶酶質(zhì)和量的改變；④藥物入胞后產(chǎn)生新的代謝途徑；⑤分解酶的增加；⑥修復(fù)機(jī)制增加；⑦由于特殊的膜糖蛋白的增加，使細(xì)胞排出的藥物增多；⑧DN

14、A鏈間或鏈內(nèi)交聯(lián)減少。,第1部分 腫瘤藥理學(xué)的基礎(chǔ)理論,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,第10章 抗腫瘤藥物的分類及藥理作用第11章 抗腫瘤藥物的不良反應(yīng)第12章 影響抗腫瘤藥物療效的因素,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,第10章 抗腫瘤藥物的分類及藥理作用10.1 烷化劑10.2 抗代謝藥10.3 激素類抗腫瘤藥物10.4 鉑類配合物及其他作用于DNA的藥物10.5 抗腫瘤抗生素10.6 生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑10.7 植物

15、來(lái)源的抗腫瘤藥,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,10.1 烷化劑 也稱烴化劑，是一類化學(xué)性質(zhì)很活躍的化合物，是第一類用于治療惡性腫瘤的化療藥物，自1942年應(yīng)用氮芥治療惡性淋巴瘤以來(lái)，烷化劑的基礎(chǔ)理論和臨床應(yīng)用研究得到迅速發(fā)展，成為腫瘤化療藥物中重要的一類藥物。,（1）烷化劑的分類 ①氮芥類：常用的有氮芥、環(huán)磷酰胺類、苯丁酸氮芥、苯丙酸氮芥類。 ②乙烯亞胺類：常用的有噻替派、二亞胺醌。 ③亞

16、硝脲類：常用的有卡莫司汀、洛莫司汀、甲基環(huán)己亞硝脲等。 ④甲烷磺酸酯類：白消安等。 ， ⑤環(huán)氧化物：二溴甘露醇、二溴衛(wèi)矛醇、二去氫衛(wèi)矛醇等。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,（2）烷化劑的主要抗腫瘤藥理作用機(jī)制 屬周期非特異性藥物，對(duì)G1、S、G2、M期細(xì)胞以及Go期細(xì)胞均有作用。多核苷酸最易受到烷化劑的烷化，因而烷化劑對(duì)G1、G2期及S期的作用更為明顯，并能影響S期向G1期過(guò)渡。,第2部分

17、抗腫瘤藥物的藥理作用,10.2 抗代謝藥 是一類能干擾細(xì)胞代謝過(guò)程的藥物。其化學(xué)結(jié)構(gòu)往往與核酸代謝的葉酸、嘧啶、嘌呤等相類似，可以通過(guò)特異性對(duì)抗而干擾核酸代謝，從而在體內(nèi)與代謝物產(chǎn)生特異性、競(jìng)爭(zhēng)性拮抗。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,（1）抗代謝藥的分類。 ①抗葉酸類：甲氨蝶呤、三甲氧苯胺喹唑啉、乙基去氮氨蝶呤等。 ②抗嘧啶類：氟尿嘧啶及其衍生物、阿糖胞苷、氮雜胞苷等。 ③抗嘌呤類：6-巰基

18、嘌呤、6-硫鳥(niǎo)嘌呤、8-氮雜鳥(niǎo)嘌呤、噻唑羧胺核苷、2-氨脫氧腺苷、噴司他丁等。 ④多胺合成抑制劑：米托胍腙、氟甲鳥(niǎo)氨酸。 ⑤核苷酸還原酶抑制劑：羥基脲、卡拉酰胺、羥基胍、胍唑等。 ⑥嘧啶合成抑制劑：磷乙門(mén)冬氨酸、布利喹啉、脫氧氮雜胞苷。 ⑦蛋白質(zhì)合成抑制劑：L-門(mén)冬酰胺酶。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,（2）抗代謝藥主要抗腫瘤藥理作用機(jī)制 抗代謝藥一般不影響靜止期細(xì)胞，主要作用于

19、增殖旺盛的細(xì)胞周期內(nèi)的細(xì)胞，為周期特是性藥物。主要是抑制DNA合成，對(duì)S期細(xì)胞最敏感。有些藥物如甲氨蝶呤等亦可抑制RNA和蛋白質(zhì)的合成，對(duì)G1和G2期也有作用，但隨時(shí)間的延長(zhǎng)，作用減弱，故稱為自限性S期特異性藥物。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,10.3 激素類抗腫瘤藥物 激素類藥物即影響體內(nèi)激素平衡的抗癌藥物。激素治療目前已成為腫瘤治療的重要手段，主要用于治療乳腺癌和前列腺癌。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,

20、（1）激素類抗腫瘤藥物的分類 ①糖皮質(zhì)激素：潑尼松、潑尼松龍等。 ②雌激素：己烯雌酚、雌莫司汀等。 . ③抗雌激素：他莫昔芬、托端米芬等。 ④孕激素：甲地孕酮、雙甲脫氫孕酮、達(dá)那唑等。 ⑤雄激素：甲基睪丸酮、氟羥甲睪酮等。 ⑥抗雄激素：氟他胺、醋酸環(huán)丙孕酮、尼魯他胺等。 ⑦合成的促黃體激素激動(dòng)劑(GnRH或LHRH激動(dòng)劑)：亮丙瑞林、戈合瑞林、亦舍瑞林等。 ⑧芳香酶抑

21、制利：氨魯米特、吡魯米特、福美坦等。 ⑨腎上腺皮質(zhì)阻抑劑：氯苯二氯乙烷。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,（2）主要抗腫瘤藥理作用機(jī)制 應(yīng)用一些激素或抗激素，體內(nèi)激素平衡受到影響，使腫瘤生長(zhǎng)所依賴的條件發(fā)生變化，腫瘤的生長(zhǎng)可因此受到抑制，如性激素(包括雄激素、雌激素及孕激素)在生理劑量時(shí)，可影響富含性激素受體的性分化組織，如乳腺、子宮內(nèi)膜及前列腺組織的生長(zhǎng)，大劑量時(shí)可抑制這些組織所產(chǎn)生的腫瘤的增殖。激素治療有效

22、的先決條件是腫瘤細(xì)胞上具有激素受體，并腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖在一定程度上受激素控制，通過(guò)改變機(jī)體激素水平，有效控制腫瘤生長(zhǎng)。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,10.4 鉑類配合物及其他類作用于DNA的藥物 （1）鉑類配合物及其他作用DNA藥物的分類 ①鉑類配合物：順鉑、卡鉑等。 ②甲基化合物：丙卡巴肼、氟烯咪胺等。 ③酰化物：內(nèi)亞胺、ICRF-187、乙雙嗎啉等。 ④其他：胺苯吖啶

23、、舒拉明、黃酮乙醇等。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,（2）鉑類配合物主要抗腫瘤藥理作用機(jī)制 鉑類配合物主要作用于DNA，與DNA堿基產(chǎn)生鏈內(nèi)及鏈間交叉連結(jié)，阻止DNA的轉(zhuǎn)錄及復(fù)制。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,10.5 抗腫瘤抗生素 抗腫瘤抗生素是由微生物產(chǎn)生的具有抗腫瘤活性的化學(xué)物質(zhì)，是在抗感染抗生素研究基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)，在尋找抗結(jié)核藥時(shí)發(fā)現(xiàn)了放線菌素D(ACD)。ACD是第五個(gè)發(fā)現(xiàn)

24、的有效抗腫瘤藥物，也是第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的抗腫瘤抗生素?？鼓[瘤抗生素的作用機(jī)理主要是通過(guò)不同途徑影響DNA、RNA及蛋白質(zhì)的生物合成，使細(xì)胞發(fā)生變異，影響細(xì)胞分裂，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,（1）抗腫瘤抗生素分類 ①烯二炔類：包括新制癌菌素和力達(dá)霉素等。 ②糖肽類：包括平陽(yáng)霉素，博安霉素和培洛霉素等。 ③蒽環(huán)類：包括柔紅霉素，多柔比星、米托蒽醌等。 ④苯并二吡咯類：包括DUM-A、CC-10

25、65、DUM-SA等。 ⑤核苷類：云南霉素、嘌呤霉素、谷氏霉素、云谷霉素等。 ⑥β-內(nèi)酰胺類：G-0069A。 ⑦苯醌類：格爾德霉素。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,10.6 生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑 生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑(BRM)，在腫瘤治療中是除手術(shù)、放療、化療的綜合應(yīng)用外的第四種治療模式。腫瘤的轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)是導(dǎo)致腫瘤患者死亡的根本原因。由于患者自身免疫功能低下，而手術(shù)、放療及化療在一定程度上抑制了

26、機(jī)體的免疫力，使腫瘤更易于轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)。生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑則通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體生物反應(yīng)，增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)機(jī)體抗癌機(jī)制的敏感性，或通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體固有的免疫力去抵御腫瘤，對(duì)常規(guī)療法難以解決的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有較好的療效，并且對(duì)機(jī)體無(wú)明顯損傷和不良反應(yīng)。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,（1）生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑的分類 按其來(lái)源可分為生物來(lái)源及合成化合物兩大類 ①細(xì)胞因子，細(xì)菌來(lái)源的制劑，真菌產(chǎn)物，及免疫系統(tǒng)產(chǎn)物。 ②含硫化合物，含核苷酸化合物及其他，

27、如泰治倫、吲哚美辛。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,（2）生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑主要抗腫瘤藥理作用機(jī)制 可能作用的環(huán)節(jié)大致有：激活巨噬細(xì)胞或中性粒細(xì)胞；激活自然殺傷細(xì)胞；促使T淋巴細(xì)胞分裂、增殖、成熟、分化，調(diào)整抑制性T細(xì)胞與輔助性T細(xì)胞的比值(Th/Ts)；增強(qiáng)體液免疫功能；誘生干擾素、自細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子等細(xì)胞因子；通過(guò)產(chǎn)生某些細(xì)胞因子進(jìn)一步激活相關(guān)免疫細(xì)胞而起作用。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,10.7 植

28、物來(lái)源的抗腫瘤藥 ①生物堿：長(zhǎng)春堿類、三尖杉酯堿類等。 ②木脂類：鬼臼毒素的半合成衍生物。 ③大環(huán)內(nèi)酯化合物：美登木素。 ④二萜類化合物：紫杉醇、雷公藤內(nèi)酯及冬凌草甲素等。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,第11章 抗腫瘤藥物的不良反應(yīng) 11.1 常見(jiàn)的不良反應(yīng) 包括消化系統(tǒng)；造血系統(tǒng)；泌尿系統(tǒng)；神經(jīng)系統(tǒng)；肝臟毒性；心臟毒性；肺部毒性；過(guò)敏反應(yīng)；局部毒性。,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理

29、作用,11.2 抗腫瘤藥物治療后期出現(xiàn)的不良反應(yīng)（1）對(duì)生殖的影響 （2）第二原發(fā)腫瘤的發(fā)生,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,第12章 影響抗腫瘤藥物療效的因素 12.1 腫瘤的性質(zhì)對(duì)藥物療效的影響 （1）腫瘤大小、生長(zhǎng)速度 （2）腫瘤細(xì)胞動(dòng)力學(xué) 抗腫瘤藥物分為細(xì)胞周期非特異性藥物(CCNSA)和細(xì)胞周期特異性藥物(CCSA)兩大類。 （3）腫瘤細(xì)胞的異質(zhì)性

30、,12.2　宿主的情況對(duì)藥物療效的影響（1）年齡 （2）病人的一般情況及既往治療史 （3）宿主對(duì)腫瘤的免疫反應(yīng),第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,12.3　藥物的應(yīng)用情況對(duì)藥物療效的影響 （1）給藥方案 （2）給藥途徑及時(shí)間,第2部分 抗腫瘤藥物的藥理作用,第3部分 抗腫瘤新藥臨床前藥理學(xué)研究方法,第13章　抗腫瘤藥物細(xì)胞及分子水平的實(shí)驗(yàn)研究 13.1 細(xì)胞水平研究 13.1.1 形態(tài)學(xué)觀察 (1) 光學(xué)顯

31、微鏡和相差顯微鏡 (2) 熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡 (3) 透射電子顯微鏡,光學(xué)顯微鏡下HT-29細(xì)胞的形態(tài),13.1.2 細(xì)胞增殖抑制實(shí)驗(yàn) (1) 四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法(2) XTT法(3) 磺酰羅丹明(SRB)染色法 (4) 染料排斥法(5) 生長(zhǎng)曲線法(6) 集落形成法(7)氚標(biāo)記脫氧嘧啶核苷酸 (3H-Tdr)摻入法,第3部分 抗腫瘤新藥臨床前藥理學(xué)研究方法,體外實(shí)驗(yàn),體外實(shí)驗(yàn),MTT

32、法,MTT法,13.2基因水平研究13.2.1 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR) 13.2.2 Northern印跡法 13.2.3 熒光實(shí)時(shí)定量PCR,第3部分 抗腫瘤新藥臨床前藥理學(xué)研究方法,13.3　蛋白質(zhì)水平研究13.3.1 流式細(xì)胞術(shù) 13.3.2 免疫熒光 13.3.3 免疫組化 13.3.4 免疫印跡,第3部分 抗腫瘤新藥臨床前藥理學(xué)研究方法,第3部分 抗腫瘤新藥臨床前藥理學(xué)研究方法,第14章 抗腫瘤藥物體

33、內(nèi)活性研究14.1 移植性腫瘤模型實(shí)驗(yàn)法 14.1.1 動(dòng)物的選擇14.1.2 動(dòng)物瘤株的選擇14.1.3 腫瘤的移植部位和途徑 (1) 異位移植 (2) 原位移植,移植性腫瘤模型,移植性腫瘤模型,第3部分 抗腫瘤新藥臨床前藥理學(xué)研究方法,14.1.4 待篩藥物的給藥途徑 通常有灌胃（ig），腹腔注射（ip），或靜脈注射（iv），皮下注射（sc），肌肉注射（im）。 14.1.5 劑量選擇

34、 一般一日量可用1/3-1/5的LD50量，或采用LD5、LD10劑量。 14.1.6 動(dòng)物分組 陰性對(duì)照組；陽(yáng)性對(duì)照組；治療組,第3部分 抗腫瘤新藥臨床前藥理學(xué)研究方法,14.1.7 療效評(píng)價(jià)(1) 實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià) 腫瘤生長(zhǎng)抑制率(2) 腹水型腫瘤療效評(píng)價(jià) 生命延長(zhǎng)率(3) 裸鼠移植瘤模型療效評(píng)價(jià) 以測(cè)量瘤徑的方法，動(dòng)態(tài)觀察受試物抗腫瘤的效應(yīng)。,14.1.8 目前常

35、用的動(dòng)物瘤株 S180 細(xì)胞小鼠肉瘤ICR小鼠模型S180 細(xì)胞小鼠腹水型ICR小鼠模型H22 細(xì)胞小鼠肝癌實(shí)體型/肝癌腹水型ICR小鼠模型EAC小鼠艾氏癌實(shí)體型/腹水型ICR小鼠模型U14細(xì)胞小鼠宮頸癌ICR小鼠模型L1210小鼠白血病腹水瘤DBA／2小鼠模型,第3部分 抗腫瘤新藥臨床前藥理學(xué)研究方法,第3部分 抗腫瘤新藥臨床前藥理學(xué)研究方法,14.2 誘發(fā)性動(dòng)物腫瘤實(shí)驗(yàn)法14.3 自發(fā)性腫瘤實(shí)驗(yàn)法 14.4 轉(zhuǎn)基因動(dòng)