1、干擾素γ（IFN-γ）是I型輔助T細(xì)胞（Th1）標(biāo)志性的細(xì)胞因子，在免疫和炎癥反應(yīng)的幾乎所有階段都發(fā)揮著重要的作用。研究表明，哺乳類IFN-γ是一種多效能的細(xì)胞因子，能增強(qiáng)抗病毒反應(yīng)、抗腫瘤反應(yīng)、增強(qiáng)抗原遞呈作用、激活并介導(dǎo)炎性反應(yīng)、促進(jìn) Th1免疫反應(yīng)以及調(diào)控細(xì)胞增殖和凋亡等功能。目前已經(jīng)有研究報(bào)道克隆出了多個(gè)魚(yú)種的IFN-γ基因，且在一些魚(yú)類中還發(fā)現(xiàn)了IFN-γ基因的同源物IFN-γrel。目前對(duì)魚(yú)類IFN-γ的研究主要集中在其分子

2、及表達(dá)特征方面，與哺乳類相比，目前對(duì)魚(yú)類I FN-γ的功能認(rèn)識(shí)還不夠深入，因此有待于對(duì)魚(yú)類IFN-γ功能進(jìn)行全面且深入的研究。因此，本文展開(kāi)我國(guó)重要海水經(jīng)濟(jì)魚(yú)種——大黃魚(yú)IFN-γ（LycIFN-γ）的分子特征及功能研究，將有助于深入了解大黃魚(yú)IFN-γ在免疫反應(yīng)中的功能，也為其病害防治提供新的思路。
　　本文克隆了LycIFN-γ基因全長(zhǎng)cDNA，長(zhǎng)1466 bp，編碼由200個(gè)氨基酸組成的蛋白。推斷的LycIFN-γ蛋白包含魚(yú)

3、類IFN-γ的標(biāo)識(shí)序列V157QSKALWELSGI168，及C末端由4個(gè)堿性氨基酸組成的核定位信號(hào)序列（RRRR）。組織表達(dá)分析顯示，LycIFN-γ在各種組織，如腦、腸、頭腎、皮膚、鰓、肝臟、脾臟、心臟和血液等中為組成型表達(dá)。LycIFN-γ在幾種免疫相關(guān)細(xì)胞，如大黃魚(yú)原代粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、頭腎白細(xì)胞和大黃魚(yú)頭腎細(xì)胞系（LYCK）中也均有表達(dá)。poly（I:C）和三聯(lián)細(xì)菌滅活疫苗刺激后，LycIFN-γ轉(zhuǎn)錄水平在大黃魚(yú)脾臟和頭腎組織

4、中顯著上調(diào)。同樣在poly（I:C）和LPS刺激條件下，LycIFN-γ轉(zhuǎn)錄水平在大黃魚(yú)原代頭腎白細(xì)胞中也發(fā)生明顯上調(diào)。在大腸桿菌BL21中重組表達(dá)的LycIFN-γ融合蛋白（rLycIFN-γ）不僅能夠增強(qiáng)大黃魚(yú)巨噬細(xì)胞的呼吸爆發(fā)反應(yīng)、上調(diào)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶基因（iNOS）的轉(zhuǎn)錄水平以及一氧化氮（NO）的釋放，而且還可上調(diào)炎癥因子腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和白介素-1β（IL-1β）的轉(zhuǎn)錄水平，這表明LycIFN-γ可參與大黃魚(yú)的

5、炎性反應(yīng)。在rLycIFN-γ處理的大黃魚(yú)頭腎白細(xì)胞中，IFN-γ受體細(xì)胞因子受體B（CRFB13），信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子（STAT1），轉(zhuǎn)錄因子干擾素調(diào)節(jié)因子（IRF1）和T-bet（T-box expressed in T cells），Th1相關(guān)細(xì)胞因子IFN-γ和白細(xì)胞介素-2（interluekin-2，IL-2）的轉(zhuǎn)錄水平均發(fā)生上調(diào)，表明LycIFN-γ可能具有促進(jìn)Th1免疫反應(yīng)的功能。這些結(jié)果提示LycIFN-γ可能具有