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![二氧化硫?qū)M南芥保護(hù)酶活性及基因表達(dá)的影響.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-2/24/2/7635be83-b753-414a-85ff-c79590ffe495/7635be83-b753-414a-85ff-c79590ffe4951.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、二氧化硫(Sulfur dioxide,SO2)是一種常見(jiàn)的全球性大氣污染物。高濃度SO2暴露對(duì)植物具有生理毒性,還能誘發(fā)遺傳損傷,引起染色體畸變、姊妹染色單體交換及微核的形成。但是,植物也具有一定的逆境適應(yīng)能力,低濃度SO2作用時(shí),植物體內(nèi)發(fā)生一系列適應(yīng)性變化,誘導(dǎo)植物的抗性提高。目前為止,植物對(duì)逆境脅迫的適應(yīng)機(jī)制尚不清楚。
本文以擬南芥為材料,研究不同濃度SO2熏氣對(duì)植物葉片形態(tài)、保護(hù)酶活性和同工酶譜的影響;采用Affme
2、trix的擬南芥基因表達(dá)譜芯片(ATH1)研究SO2熏氣后基因表達(dá)的變化,并結(jié)合半定量RT-PCR技術(shù),分析部分差異表達(dá)的防御基因,以期為抗逆機(jī)制的研究提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究結(jié)果表明:
SO2熏氣14d后,擬南芥葉面氣孔開度變小。濃度10mg·m-3組促進(jìn)植株生長(zhǎng)發(fā)育,SO2濃度90mg·m-3時(shí),葉面出現(xiàn)明顯可見(jiàn)傷害,株高、葉片數(shù)和葉片面積顯著降低,可溶性蛋白含量減少,胞內(nèi)MDA含量增高。
2.5~30mg·m-
3、3SO2熏氣導(dǎo)致擬南芥葉組織中活性氧O2-·產(chǎn)生速率和H2O2含量呈濃度和時(shí)間依賴性增高。濃度為2.5、10、30mg·m-3的SO2熏氣6h后,還原型谷胱甘肽(GSH)含量、過(guò)氧化物酶(POD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GST)活性迅速提高,并與SO2濃度呈極顯著正相關(guān),連續(xù)熏氣24h~120h期間上述指標(biāo)維持較高水平,說(shuō)明GSH、POD、GPX和GST在適應(yīng)SO2脅迫過(guò)程中發(fā)揮重要作用。超氧化物岐化酶(SOD
4、)和過(guò)氧化氫酶(CAT)活性誘導(dǎo)需要較高的SO2濃度或較長(zhǎng)的作用時(shí)間:30mg·m-3SO2熏氣6h后SOD和CAT活性被誘導(dǎo);2.5mg·m-3和10mg·m-3 SO2熏氣24h后SOD活性有所增高,熏氣72h后CAT活性被誘導(dǎo);熏氣120h后脅迫組SOD和CAT活性降低。
采用垂直板聚丙稀酰胺凝膠電泳分析SO2熏氣后擬南芥葉片保護(hù)酶同功酶譜的變化?;钚匀旧蟀l(fā)現(xiàn),譜帶亮度和寬度均發(fā)生不同程度的改變。3周齡與4周齡擬南芥葉
5、片CAT同工酶對(duì)SO2熏氣的反應(yīng)基本一致,在SO2熏氣前期譜帶亮度增加,熏氣120h后譜帶亮度減弱。3周齡與4周齡擬南芥葉片SOD和POD同工酶對(duì)SO2熏氣具有不同響應(yīng):SO2熏氣后,3周齡苗SOD同工酶譜帶亮度增加,4周齡苗在熏氣72h后SOD同工酶譜帶亮度增加,但熏氣120h后譜帶亮度減弱;3周齡苗POD同工酶在熏氣6h后譜帶減弱,72h后譜帶強(qiáng)度增加,而4周齡苗POD同工酶譜帶強(qiáng)度均增加。
SO2熏氣后,半胱氨酸合成酶(
6、OAS-TL)活性和半胱氨酸(Cys)含量顯著提高,并與SO2濃度呈顯著正相關(guān)。Cys的增加可以促進(jìn)GSH的合成,GSH含量增加誘導(dǎo)GPX和GST基因表達(dá)增強(qiáng),酶活性提高,這也是GPX和GST在SO2脅迫過(guò)程中發(fā)揮重要作用的原因之一。
SO2熏氣72h后,采用基因芯片技術(shù),在擬南芥全基因組中共檢出脅迫組和對(duì)照組間差異表達(dá)基因2780個(gè),其中部分基因?yàn)檎T導(dǎo)表達(dá)(脅迫組中表達(dá),對(duì)照組中不表達(dá)的基因),部分為沉默基因(對(duì)照組中表達(dá),
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