氧樂(lè)果降解菌的分離選育、生長(zhǎng)和降解特性研究.pdf_第1頁(yè)
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1、氧樂(lè)果是目前我國(guó)廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中防治病蟲(chóng)害的有機(jī)磷農(nóng)藥。然而由于氧樂(lè)果用量大、毒性強(qiáng),造成了環(huán)境污染,影響了生態(tài)平衡并危害人類(lèi)健康。因此研究氧樂(lè)果污染的治理具有重要的意義。微生物降解具有操作簡(jiǎn)單,成本低于物理化學(xué)方法,效果好,對(duì)污染物氧化比較完全等優(yōu)點(diǎn),成為降解有機(jī)磷農(nóng)藥的重要途徑。本研究從農(nóng)藥廠廢水處理站的活性污泥和受氧樂(lè)果污染的土壤中,通過(guò)富集培養(yǎng)、分離和純化,獲得了18株具有氧樂(lè)果降解能力的菌株,其中細(xì)菌12株,真菌6株。通過(guò)

2、氧樂(lè)果降解率的測(cè)定,篩選出具有較強(qiáng)降解能力的真菌菌株YF-3和細(xì)菌菌株YB-10。菌株YF-3能以氧樂(lè)果為唯一碳源和能源生長(zhǎng),菌株YB-10不能以氧樂(lè)果為唯一碳源和能源生長(zhǎng),通過(guò)共代謝方式降解氧樂(lè)果,5d降解率分別為68.34%和73.81%。經(jīng)鑒定,菌株YF-3歸類(lèi)為曲霉屬,菌株YB-10歸類(lèi)為芽孢桿菌屬。主要研究?jī)?nèi)容包括:
 ?、盘接懥搜鯓?lè)果初始濃度(200 mg·L-1-5000 mg·L-1)和葡萄糖濃度(200mg·L-

3、1-10000 mg·L-1)對(duì)降解菌生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明,菌株YF-3最適生長(zhǎng)的氧樂(lè)果初始濃度為1000 mg·L-1,低于1000 mg·L-1,隨著提供碳源的氧樂(lè)果濃度的增大,生長(zhǎng)量增加,而高濃度時(shí),抑制菌體的生長(zhǎng)。菌株YB-10生長(zhǎng)停滯期隨氧樂(lè)果濃度的增大而延長(zhǎng),氧樂(lè)果相對(duì)低濃度(200 mg·L-1-1000 mg·L-1)時(shí),隨著濃度增大,對(duì)菌株YB-10的生長(zhǎng)影響不大,菌體的生長(zhǎng)趨于穩(wěn)定,高濃度時(shí)毒性增大,抑制菌體的生長(zhǎng)。

4、菌株YF-3和菌株YB-10的生長(zhǎng)量隨葡萄糖濃度的增加而增大。
  ⑵研究了溫度、pH值、裝液量對(duì)降解菌生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明,菌株YF-3在含氧樂(lè)果1000 mg·L-1的培養(yǎng)基中,最適生長(zhǎng)條件為溫度35℃,pH6.5,250 mL三角瓶裝液量100 mL,最佳條件下,72h菌體干重最大為3.984 mg·mL-1。菌株YB-10在葡萄糖1500 mg·L-1、氧樂(lè)果1000 mg·L-1的培養(yǎng)基中,最適生長(zhǎng)條件為溫度30℃,pH

5、7.0,250 mL三角瓶裝液量100 mL,最佳條件下,36h菌體OD600值最大為1.097。
  ⑶研究了氧樂(lè)果初始濃度(200 mg·L-1-5000 mg·L-1)、葡萄糖濃度(200 mg·L-1-10000mg·L-1)、溫度、pH值、裝液量對(duì)菌株YF-3降解氧樂(lè)果的影響。結(jié)果表明,隨著氧樂(lè)果濃度的增大,降解率減小。添加低濃度的葡萄糖,能促進(jìn)菌株YF-3對(duì)氧樂(lè)果的降解。最適降解條件為pH7.0、溫度35℃、250 m

6、L三角瓶裝液量100 mL。在最佳降解條件下,5d氧樂(lè)果由1000 mg·L-1降到297 mg·L-1,降解率達(dá)到70.34%,添加300 mg·L-1的葡萄糖,能促進(jìn)菌株YF-3對(duì)氧樂(lè)果的降解,降解率提高到72.16%。
 ?、葘?duì)菌株YB-10培養(yǎng)基的碳源、氮源、磷源種類(lèi)和濃度進(jìn)行了單因素試驗(yàn)研究。結(jié)果表明,培養(yǎng)基的最適碳源、氮源、磷源分別為葡萄糖、NH4N03、KH2P04。在各自一定的濃度范圍內(nèi),氧樂(lè)果降解率隨葡萄糖、NH

7、4N03、KH2P04濃度的增加而增大,但當(dāng)超過(guò)某一濃度時(shí),降解率降低。并在此基礎(chǔ)上,確定了響應(yīng)面分析法優(yōu)化培養(yǎng)基的中心試驗(yàn)點(diǎn):葡萄糖1.5g·L-1、NH4NO30.5g·L-1、KH2PO41.0 g·L-1。結(jié)果通過(guò)二次回歸正交旋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)確定培養(yǎng)基中碳源、氮源和磷源的最佳濃度為葡萄糖1.455g·L-1, NH4NO30.535 g·Lq, KH2PO40.965 g·L-1。
  ⑸研究了氧樂(lè)果初始濃度(200 mg·L-1

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