1、本研究建立了無機(jī)鹽培養(yǎng)基及土壤中阿維菌素含量的HPLC檢測(cè)方法,篩選出了三株能高效降解阿維菌素的細(xì)菌,并對(duì)這三株細(xì)菌的降解特性進(jìn)行研究。
　　 培養(yǎng)基或土壤樣品采用乙腈為阿維菌素提取劑,以甲醇:水(92:8,V/V)為流動(dòng)相,在波長250nm,柱溫30℃,流速1.0mL/min的條件下進(jìn)行HPLC分析。所建立方法在1-80mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。在1、10、50mg/L三個(gè)添加水平,阿維菌素在培養(yǎng)基中的平均回收率在85％以上

2、,日內(nèi)、日間變異系數(shù)低于5％;在土壤中的平均回收率在90％左右,日內(nèi)變異系數(shù)低于3％,日間變異系數(shù)低于5％。阿維菌素在培養(yǎng)基中的檢測(cè)限(LOD)為0.5mg/L,定量限(LOQ)為1mg/L。
　　 以無機(jī)鹽培養(yǎng)基作為限制性條件構(gòu)建細(xì)菌篩選模型,經(jīng)過初步篩選、分離、純化、馴化、復(fù)篩等步驟最終篩選出三株阿維菌素高效降解菌,結(jié)合革蘭氏染色鏡檢和分子生物學(xué)16S rDNA鑒定,確定細(xì)菌分別為枯草芽孢桿菌、粘質(zhì)沙雷氏菌和蠟樣芽孢桿菌,試

3、驗(yàn)中分別命名為G1、G6和G10。
　　 研究包括pH值、溫度、裝樣量、底物濃度、細(xì)菌接種量、外加碳氮源和金屬離子對(duì)這三株細(xì)菌阿維菌素降解能力及生長量的影響,最終確定了各細(xì)菌的最佳降解條件:G1在pH值為6、35℃、裝樣量80mL、細(xì)菌接種濃度0.1％、底物濃度100mg/L、添加0.2％的蔗糖和酵母浸液及0.1％的Fe3+和Cu2+的條件下阿維菌素降解速率最高;G6在pH值為6、40℃、裝樣量40mL、細(xì)菌接種濃度0.05％、

4、底物濃度150mg/L、添加0.2％的蔗糖和牛肉膏及0.1％的Fe3+和Cu2+的條件下阿維菌素降解速率最高;G10在pH值為6、40℃、裝樣量120mL、細(xì)菌接種濃度0.1％、底物濃度150mg/L、添加0.2％的淀粉和酵母浸液及0.1％的Fe3+和Cu2+的條件下阿維菌素降解速率最高。
　　 將三株細(xì)菌在試驗(yàn)室進(jìn)行土壤模擬降解試驗(yàn),試驗(yàn)分滅菌土壤組和非滅菌土壤組,并選擇10mg/kg、25mg/kg和50mg/kg三個(gè)濃度進(jìn)