中藥甘草提取物對(duì)UVB損傷皮膚屏障功能的防護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:研究外用甘草乳膏對(duì)UVB輻射引起的BALB/C小鼠皮膚光損傷的干預(yù)作用及對(duì)皮膚角蛋白17(CK-17)、轉(zhuǎn)谷酰胺酶(TGase)的基因和蛋白表達(dá)水平影響,探討甘草乳膏對(duì)UVB輻射BALB/C小鼠皮膚屏障損傷的防御作用及對(duì)皮膚角蛋白17(CK-17)、轉(zhuǎn)谷酰胺酶(TGase)基因和蛋白表達(dá)水平的影響,探討甘草乳膏對(duì)UVB輻射BALB/C小鼠皮膚屏障的保護(hù)作用及可能機(jī)制,為驗(yàn)證甘草乳膏防護(hù)陽(yáng)毒外襲的有效性及將甘草開(kāi)發(fā)成防護(hù)紫外線外用制

2、劑奠定理論基礎(chǔ)。
  方法:將BALB/C小鼠隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組(K)、模型組(M)、基質(zhì)乳膏組(J)、及甘草乳膏組(H),實(shí)驗(yàn)前將背毛剃凈并在剃毛處皮膚給予相應(yīng)處理(J組涂抹基質(zhì)乳膏,H組涂抹5%甘草乳膏,K組及M組不給藥)20分鐘后除空白對(duì)照組,其余各組分別給予500mJ/cm2的UVB輻射,1次/日,連續(xù)30天,肉眼觀察各組小鼠皮膚一般形態(tài)改變,并拍照及文字描述雙重記錄;之后,頸椎脫臼處死實(shí)驗(yàn)小鼠,手術(shù)切取照射部位皮膚

3、組織分為三部分:①HE染色法觀察皮膚組織形態(tài)學(xué)改變,②用qRT-PCR法檢測(cè)小鼠皮膚組織中的角蛋白17(CK-17)、轉(zhuǎn)谷酰胺酶(TGase)mRNA的相應(yīng)表達(dá)水平,③westernblot法檢測(cè)上述指標(biāo)蛋白表達(dá)。
  結(jié)果:
  1.一般形態(tài)學(xué):與空白對(duì)照組后剃毛區(qū)皮膚相比較,基質(zhì)軟膏組小鼠與模型組照射部位皮膚色澤變暗伴脫屑,光澤度及彈性變差,增粗橫紋褶皺樣改變,甚至出現(xiàn)糜爛面;甘草組小鼠在實(shí)驗(yàn)部位邊緣可見(jiàn)少量脫屑。

4、>  2.組織學(xué)改變:HE染色切片示甘草組較空白對(duì)照組,角質(zhì)層輕微增厚,有少量炎性細(xì)胞;基質(zhì)組及模型組分別與空白對(duì)照組相比:皮表結(jié)構(gòu)完整性欠佳,角質(zhì)層厚度增加且各細(xì)胞層分界不清,真皮層纖維分布不均勻、可見(jiàn)斷裂,皮脂腺無(wú)規(guī)則增生、附屬器內(nèi)可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)。
  3.RTFQ-PCR法示UVB輻射后模型組、基質(zhì)組的CK-17 mRNA表達(dá)水平比空白對(duì)照組顯著升高(P<0.01),甘草組與空白組相比略有升高,(P<0.05),基質(zhì)

5、組與模型組差異不明顯(p>0.05),甘草組與模型組相比CK-17表達(dá)明顯降低(P<0.01),輻射后模型、基質(zhì)、甘草組TGase mRNA表達(dá)水平比空白對(duì)照組顯著升高(P<0.01),基質(zhì)組與模型組相比差異不明顯(p>0.05),而甘草組與模型組相比TGase表達(dá)有所降低(P<0.05)。
  4.westernblot法示UVB輻射后模型組、基質(zhì)組的CK-17的蛋白表達(dá)水平較空白對(duì)照組顯著升高(P<0.01),甘草組比空白組略

6、升高(P<0.05),基質(zhì)組較模型組相比差異不明顯(p>0.05),而甘草組與模型組相比,CK-17表達(dá)明顯降低(P<0.01),輻射后模型組、基質(zhì)組、甘草組TGase的蛋白表達(dá)水平較空白對(duì)照組顯著升高(P<0.01),基質(zhì)組與模型組相比差異不明顯(p>0.05),而甘草組與模型組相比,TGase表達(dá)有所降低(P<0.05)。
  結(jié)論:
  1.UVB輻射對(duì)BALB/C小鼠皮膚屏障具有著顯著的損傷作用:能誘導(dǎo)皮膚組織CK-

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