植物β-葡萄糖苷酸酶β-gus酶聯(lián)免疫分析elisa_第1頁
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1、1植物植物β葡萄糖苷酸酶(葡萄糖苷酸酶(βGUS)酶聯(lián)免疫分析(酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定植物血清,血漿及相關(guān)液體樣本中β葡萄糖苷酸酶(βGUS)的含量。實驗原理:實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物β葡萄糖苷酸酶(βGUS)水平。用純化的抗βGUS抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入β葡萄糖苷酸酶(βGUS),再與HRP標(biāo)記的βGU

2、S抗體結(jié)合,形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β葡萄糖苷酸酶呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中植物β葡萄糖苷酸酶(βGUS)含量。試劑盒組成試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標(biāo)包被板14819628℃保存標(biāo)準(zhǔn)

3、品:900pgml0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標(biāo)試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液(20ml20倍)1瓶(20ml30倍)1瓶28℃保存樣本處理及要求樣本處理及要求:1標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,

4、提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在第一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第

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