1、中藥新藥主要藥效學,研究的基本技術(shù)要求,成都中醫(yī)藥大學,黃國鈞 教授,成都中醫(yī)藥大學藥學院 中藥學為國家級重點學科，在全國最早開始招收中藥學博士研究生；現(xiàn)有博士生導師11名，每年招收博士生20余名、碩士生200多名。中藥制劑、中藥藥理、中藥品質(zhì)為國家中醫(yī)藥管理局三級科研實驗實。具有多臺、件先進的科研儀器及設(shè)備。中藥藥理教研室 教授5人；副教授2人；助教1人 博士生導師：沈映君教授、黃國鈞教授,

2、成都中醫(yī)藥大學新區(qū),中藥新藥的基本要求 ——安全、有效、穩(wěn)定、可控新藥有效性的評價：（1）試驗部分（即主要藥效學試驗）；（2）臨床部分（即臨床研究）。,一、基本要求  （一）試驗主要負責人 應(yīng)具有醫(yī)藥衛(wèi)生專業(yè)大專以上水平及資歷，具有一定的理論基礎(chǔ)與技術(shù)操作能力。確保試驗設(shè)計合理，結(jié)果判斷準確，總結(jié)資料可靠。申報材料應(yīng)有課題負責人簽字及單位簽章。 （二）試驗條件 實

3、驗室條件、儀器設(shè)備、各種試劑及組織管理均應(yīng)符合規(guī)范化要求。,（三）實驗動物 應(yīng)符合國家規(guī)定的等級動物要求，必要時可選用特定年齡，性別的動物或特殊模型動物。    （四）試驗記錄 應(yīng)詳細準確，不得任意取舍或涂改。試驗中出現(xiàn)的新問題或特殊現(xiàn)象均應(yīng)詳細寫明情況。    （五）試驗結(jié)果 應(yīng)進行正確的統(tǒng)計學處理，數(shù)據(jù)表格應(yīng)規(guī)范。資料整理應(yīng)簡明扼要，注

4、意科學性、嚴密性、邏輯性，真實可靠地反映出試驗所獲得的各種信息與結(jié)果。,二、中藥藥效學試驗方法的選擇 中藥新制劑大多數(shù)是中藥的復(fù)方制劑，即或是單味中藥的制劑，因含多種有效化學成分，對機體所起的作用常常是多途徑的，其發(fā)揮療效的作用機理是多方面的，這正是中藥和化學藥物的最大不同之處?；瘜W藥物制劑的有效化學成分比較單一，其作用部位選擇性強，例如強心苷選擇性地作用于心肌；抗生素選擇性地抑殺病原微生物。而中醫(yī)治病是針對疾病的各種“證”(即

5、辨證施治)，并兼顧全身狀況進行藥物配伍組成方劑應(yīng)用。方劑含有多種有效化學成分，故能從多環(huán)節(jié)、多途徑的作用方式來達到防治疾病的目的。 因此，在進行中藥新制劑的主要藥效學研究設(shè)計時，如何選擇適合的試驗方法和指標來,研究和判斷其藥效作用，難度較大，困難較多。但是如果能以中醫(yī)理論為指導，正確領(lǐng)會中藥新制劑的功能和主治的現(xiàn)代醫(yī)學概念，將中醫(yī)“證”與“病”相結(jié)合并聯(lián)系臨床經(jīng)驗考慮，就能制訂出較好的主要藥效學研究的方案。藥效試驗應(yīng)以體內(nèi)試驗為

6、主，必要時配合體外試驗，從不同層次證實其藥效。（一）以中醫(yī)理論為指導，選擇藥理試驗方法 中醫(yī)學是研究人體生理、病理，以及疾病的診斷和防治等的一門科學。經(jīng)過了幾千年的醫(yī)療實踐，中醫(yī)學具有豐富的臨床經(jīng)驗和獨特的理論體系。 中醫(yī)學的理論體系是以整體觀念為主導思想，以臟腑經(jīng)絡(luò)的生理和病理為基礎(chǔ)，以辨證論治為診療特點的醫(yī)學理論體系。中醫(yī)學理論涉及面廣，內(nèi)容多，主要包括陰陽五行、藏象、經(jīng)絡(luò)、氣血津液、病理病機等。,中醫(yī)治病遣藥

7、，其中藥的應(yīng)用也是以中醫(yī)學理論作為基礎(chǔ)的，故有著獨特的中醫(yī)藥理論體系和應(yīng)用形式。中藥治病的多種多樣的性質(zhì)和作用統(tǒng)稱為中藥的性能，主要包括性、味、歸經(jīng)、升、降、浮、沉及有毒、無毒等方面。前人在長期實踐中對中藥性能的認識，并以陰陽、臟腑、經(jīng)絡(luò)、治療法則等中醫(yī)學理論為其理論基礎(chǔ)，創(chuàng)造和發(fā)展了中藥的基本理論。 因此，中藥理論是整個中醫(yī)學理論體系中一個重要的組成部分?？梢?，在考慮中藥新制劑的藥效學試驗方法時，首先需要揭示中醫(yī)學理論體系的本

8、質(zhì)，尋找出中醫(yī)學理論實質(zhì)的客觀化和標準化的試驗方法與指標。 例如延緩衰老藥物“雄獅丸”的藥理作用研究，就是圍繞補腎法則進行的。中醫(yī)學理論認為腎氣與衰老密切相關(guān)。作者認為在研制抗衰老方劑上，,不應(yīng)沿用國外研究抗衰老合成藥的模式，而應(yīng)以中醫(yī)抗衰老理論－－補腎法為根據(jù)。在思想方法上，應(yīng)走中西醫(yī)結(jié)合的道路，運用近代先進科學技術(shù)，針對中藥復(fù)方的特點，把中醫(yī)學的補腎法與近代醫(yī)學的衰老學說相結(jié)合，以逐步探索建立研制抗衰老中藥的獨特的模式。

9、 “雄獅丸”的藥理試驗，根據(jù)補腎法則，選擇藥物對改變腎上腺皮質(zhì)功能、免疫功能及促進物質(zhì)代謝等三個方面著手。試驗結(jié)果表明，“雄獅丸”能興奮腎上腺皮質(zhì)功能與性腺功能、提高機體免疫功能及促進物質(zhì)代謝，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)尚有興奮與抑制的雙向調(diào)節(jié)作用，從而闡明該方劑的抗衰老的藥理學機制。在臨床驗證中，擬按補腎法則設(shè)計臨床觀察方案，針對其適應(yīng)癥為腎虛證，能在較短時間內(nèi)觀察到臨床療效。為中醫(yī)的抗衰老獨特理論，提供了一些研究思路和線索。,（二）正確領(lǐng)會

10、中藥新制劑的功能與主治的現(xiàn)代醫(yī)學概念，選擇藥理試驗方法 中藥新制劑大多數(shù)是中藥的復(fù)方制劑，其藥物的組成是根據(jù)中醫(yī)學理論為指導，有其組成原則和配伍法度。《內(nèi)經(jīng)》即提出了制方的君臣佐使學說，凡方應(yīng)君臣有序，各司其職，各味藥物都應(yīng)當有明確的職責，相輔相成。《本經(jīng)》中把單味藥的應(yīng)用和藥與藥之間的配伍關(guān)系總結(jié)為7個方面，稱之為藥物的“七情”。 因此，以中醫(yī)藥學理論作指導組方的中藥新制劑，能產(chǎn)生更好的治療效果，以適應(yīng)比較復(fù)雜的病證

11、。按中醫(yī)藥學理論組方的中藥新制劑，都有明確的功能和主治(適應(yīng)癥)，正確理解其現(xiàn)代醫(yī)學的概念，有助于正確選擇藥理試驗方法和指標。,我國衛(wèi)生部制定發(fā)布的《新藥審批辦法》中“有關(guān)中藥部分的修訂和補充規(guī)定”，在藥理研究的技術(shù)要求中指出：“新藥第一、二、三類的主要藥效研究，應(yīng)能充分證實其主要治療作用，以及較重要的其他治療作用”。 例如主治痹證的中藥新制劑，中醫(yī)所稱的痹癥，類似于現(xiàn)代醫(yī)學的自身免疫性疾病的風濕病范疇，諸如類風濕性關(guān)節(jié)炎、風濕

12、性關(guān)節(jié)炎、強直性脊柱炎、骨性關(guān)節(jié)炎等，其中以類風濕性關(guān)節(jié)炎和風濕性關(guān)節(jié)炎為多見。又如銀翹散(銀翹解毒丸、片)是來源于《溫病條辨》的著名方藥，用治太陰風濕，溫熱、溫疫、冬溫、初起，但熱，不惡寒，口渴者。本方是辛涼解表劑，主治外感風熱及溫病初起，即類似于現(xiàn)代醫(yī)學的普通感冒、流感、肺炎、急性咽喉炎等感染性疾病。只有將中醫(yī)的“證”與“病”相結(jié)合(即辨證與辨病相結(jié)合)，并聯(lián)系臨床經(jīng)驗綜合考慮，正確地領(lǐng)會中藥新,制劑的主治(適應(yīng)癥)的現(xiàn)代醫(yī)學概念，

13、才能制定出較好的主要藥效學試驗方案，即選擇適當?shù)乃幚碓囼灧椒ê椭笜诉M行研究，以充分證實其主要治療作用。 周遠鵬等進行銀翹解毒片的藥理研究時，選擇了抗炎、鎮(zhèn)痛、解熱、抗菌和抗病毒等試驗方法進行，能反映該藥的主要藥效學作用。 總之，制定中藥新制劑的主要藥效學研究的方案時，要使藥效學研究回答出3個問題：（1）新藥是否有效；（2）為何有效；（3）新藥與現(xiàn)有同類藥物比較在作用性質(zhì)和強度方面的異同與優(yōu)劣。 必要時應(yīng)研究

14、什么物質(zhì)(藥物或成分)有效，以及藥物的配伍與相互影響與藥效的關(guān)系。,李連達認為近年新藥的主要藥效學研究中常見的問題是： （1）主要藥效學研究的方向與新藥的功用主治脫節(jié)，藥證(病)不符，例如某種藥物功能養(yǎng)血生血，主治血虛證，而藥效學研究卻側(cè)重于耐缺氧、免疫、抗炎等研究，對血液系統(tǒng)、造血功能的影響，卻未做研究。藥效學研究結(jié)果不能說明新藥的功能主治。在科研設(shè)計上有原則性錯誤； （2）主要藥效學研究的方向與新藥的功能主治基本相符，但具體

15、實驗項目選擇欠妥，不夠系統(tǒng)、全面，主要實驗少，輔助實驗多，核心實驗少，外圍實驗多，研究結(jié)果能夠說明一定問題，卻不足以充分證明新藥的主要功能主治。例如治療冠心病的藥物僅做耐缺氧及動脈條實驗，清熱解毒藥僅做體外抑菌實驗等；,（3）研究方向及實驗項目基本符合要求，但實驗方法不科學，觀測指標不準確或無特異性，結(jié)果不可靠，難以確證藥。由于中藥新制劑的研制中，問題較多，難度大，要求高。為了提高新藥研究質(zhì)量與科研水平，我國衛(wèi)生部組織專家編寫各種新藥(

16、中藥)研制的指導原則，使研制工作更加規(guī)范化、標準化。三、觀測指標的選擇 選擇客觀可靠的觀測指標，才能準確無誤地反映藥物對實驗對象的影響。在選擇試驗方法時應(yīng)同時考慮選擇何種觀測指標的問題，總的原則是應(yīng)選用特異性強、敏感性高、重視性好、客觀、定量、半定量的指標進行觀測。,（一）特異性 新藥藥效學研究主要針對其功能與主治，所選用的試驗方法和觀測指標一定要用專屬性好，特異性強，能反映治療疾病本質(zhì)的主要藥效學方法及觀測指標

17、。 例如治療急性腦出血的中藥制劑，宜選擇膠原酶誘發(fā)動物腦出血模型、動物自體血腦內(nèi)注射造成腦血腫模型、動物腦水腫模型、自發(fā)性高血壓卒中型(SHR/SP)大鼠腦出血模型。在這些疾病動物模型上觀測藥物防治腦出血的作用。其主要指標是：①動物出現(xiàn)中風時間及中風后存活時間；②血壓增高的變化；③腦切片上觀測腦出血程度(面積)、腦出血吸收(修復(fù))程度、出血灶周圍神經(jīng)細胞受損程度、腦組織水腫程度、出血灶血管新生程度；④降顱內(nèi)壓作用；⑤腦組織能量代

18、謝等。只有在選擇這些最主要的藥效學試驗及特異性高的觀測指標的,基礎(chǔ)上，才有必要再對藥物的功能主治開展一些相關(guān)藥效指標試驗，充分闡明其治療作用及其作用機理。如果治療急性腦出血的藥物僅進行一系列活血化瘀藥效指標測定，如抗血栓形成、抗血小板聚集、影響血小板機能，影響血液凝固－抗凝系統(tǒng)的多個環(huán)節(jié)等，甚至選用血小板中cAMP與cGMP等指標，顯然這些指標特異性不強。 （二）敏感性 選擇觀測指標應(yīng)注意是否敏感性高，是否具有檢測可操作性和

19、可靠性。任何疾病，尤其在經(jīng)過藥物防治后，均有不同的變化，疾病的許多病理、生理指標都可能出現(xiàn)不同的變化。一定應(yīng)在某項觀測指標變化最明顯時，用最先進的觀測手段(儀器)將其變化記錄下來。,如在觀測藥物對家兔實驗性腦血腫治療作用的實驗中，在腦血腫形成的1周以后，病變周圍炎性反應(yīng)開始較為明顯減輕、膠質(zhì)細胞增生、單核細胞增多、神經(jīng)細胞水腫性減輕、神經(jīng)細胞尼氏小體出現(xiàn)等。如在病變形成的1周內(nèi)就進行觀測，由于穿刺損傷的腦組織和注入的動物自體血液混合于損

20、傷處，周圍腦組織水腫等病變嚴重，病變修復(fù)過程的各項指標均不易明顯觀測出來，不能靈敏和可靠地觀測到藥物的作用。,（三）重現(xiàn)性 選擇的實驗觀測指標應(yīng)穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，結(jié)果才可靠，若重現(xiàn)性差，應(yīng)分析其原因。在實驗過程中，諸多因素均可影響觀測指標的重現(xiàn)性，如動物(品種、體重、性別不同)、模型復(fù)制方法、實驗室溫度、濕度、噪音、儀器性能、實驗人員操作技術(shù)能力的差異等，均可引起試驗指標數(shù)值大小出現(xiàn)差異。實驗指標若重現(xiàn)性差，其結(jié)果肯定不可靠，不能

21、作為試驗藥物有效性評價的指標。,（四）客觀性 選擇的觀測指標應(yīng)能客觀反映藥物的藥效作用，盡量不用主觀的，似是而非的指標。尤其在觀測動物生理機能(如心率、呼吸頻率、清醒動物血壓、尿量等)指標，易受實驗環(huán)境、條件等許多因素的影響，更應(yīng)注意假性結(jié)果的出現(xiàn)。在避免多種因素影響的前提下，盡量使用先進儀器進行測量工作，盡量避免主觀的、簡單的檢測手段。例如采用光電監(jiān)測記錄裝置觀測藥物對體外培養(yǎng)心肌細胞搏動的速率、節(jié)律和強度的影響，較用肉眼觀察

22、其變化更為客觀和精確。,（五）定量、半定量 在評價藥物作用和療效的觀測指標時，應(yīng)盡量選擇能定量或半定量的觀測指標。應(yīng)用先進的科研儀器，能客觀定量地記錄實驗指標的變化。如采用核磁共振成像技術(shù)或晶體圖像計算機系統(tǒng)，能客觀、定量評價藥物防治白內(nèi)障的療效。再如在觀測中藥制劑治療膠原酶誘發(fā)大鼠腦出血模型的試驗中，為了科學評價藥物保護腦神經(jīng)細胞的作用，我們采用將顯微鏡下將圖像用電腦“圖像分析系統(tǒng)”和“MIAS-2000圖形分析儀”處理圖像資

23、料，能定量地測定用藥治療動物和模型對照動物腦組織切片、最大出血面積、肉芽組織面積及固定位置在相同面積的神經(jīng)細胞數(shù)量和神經(jīng)細胞胞質(zhì)中虎斑小體(尼氏小體)的含量。尼氏小體分布于神經(jīng)細胞胞體及樹突內(nèi)，其機能與神經(jīng)元的新陳代謝特別與胞質(zhì)中的蛋白質(zhì)的合成有關(guān)。神經(jīng)元受,損害時尼氏小體很快溶解或消失。以往測量尼氏小體含量的方法僅用肉眼觀察根據(jù)尼氏小體染色深淺、色斑大小分級判定，不能定量測定，主觀性判斷誤差大。四、實驗動物與疾病動物模型（一）醫(yī)學

24、實驗動物的分級（四級） 一級：為普通動物(CV)，要求必須不帶有人獸共患病的病原體及體外寄生蟲。 二級：為清潔動物(CL) ，要求在CV的基礎(chǔ)上，還須不帶有動物傳染病的病原體。 三級：為無特定病原體動物(SPF)，要求在CL基礎(chǔ)上還須不帶有干擾實驗的微生物。 四級：為無菌動物和悉生動物。無菌動物 (GF) 要求不帶有任何用現(xiàn)有的方法可以檢出的微生物。悉生動物(GN)要求在無菌動物體上植入一種或數(shù)種已知的微

25、生物。,（二）動物實驗的優(yōu)點 1.動物實驗可以把人體上非常復(fù)雜的問題簡單化，可以進行各種因素的細微探討，而這些是臨床研究難于做到的。 臨床試驗中，病人的年齡、性別、體重、遺傳、病情程度、精神因素、生活條件、活動范圍、病人對醫(yī)護人員的信賴程度及合作程度，都難于控制一致。在治療時間上，因病人是陸續(xù)發(fā)病、陸續(xù)進入試驗，逐漸積累的試驗結(jié)果資料，前后可能摻入不少干擾因素，有時難以區(qū)分，會影響試驗結(jié)果。在動物實驗中，動物的品種、性別

26、、年齡、體重、活動性、健康狀態(tài)、甚至遺傳和微生物等方面均可控制一致。實驗室的條件如溫度、濕度、光線、聲音、動物的飲食也可控制一致。即動物實驗可在各組動物(給藥組、陽性藥物對照組、陰性對照組)條件一致的情況下觀察比較,藥物的作用和毒理。這樣實驗得出的結(jié)果較可靠，可比性強，可比較藥物劑量不同的效應(yīng)(即量效關(guān)系)以及比較同類型藥物的作用強度或效價。 2.動物試驗可觀察藥物的長期療效或毒性，干擾的因素較少，而病人難于做到。 如病人多

27、吃或少吃藥物，病人自動停藥，病人另外求醫(yī)，病人又患其他疾病等，可影響療效和毒性評定。 3.臨床上潛伏期長或病程長的疾病，研究周期很長。用動物復(fù)制疾病模型，可以大大縮短其潛伏期或病程。 例如腫瘤和遺傳性疾病等。動物實驗從而,有力地推動了人類疾病的病因?qū)W、發(fā)病學和防治方法的研究，其病理變化以及研究藥物的防治作用。 4.臨床上平時不易遇到的疾病。 如放射病、毒氣中毒等，應(yīng)用動物實驗則可隨時進行研究，其病理變化以及研究藥

28、物的防治作用。,（三）常用實驗動物在藥效學研究中的應(yīng)用1.小鼠：小鼠是實驗室最常用的一種動物。小鼠屬于脊椎動物門，哺乳綱，嚙齒目，鼠科，小鼠屬動物。（1）小鼠適合用于需要用大量動物的試驗，例如藥物篩選、半數(shù)致死量測定、藥物效價比較等。（2）小鼠對多種病原體具有易感性，適合于研究感染血吸蟲、瘧原蟲、馬錐蟲、流行性感冒、蛇毒、腦炎、狂犬病、鉤體病和一些細菌感染性疾病。（3）小鼠已廣泛地用于腫瘤和白血病的研究，選用小鼠的各種自發(fā)性腫瘤

29、，或用人工移植性腫瘤，或用化學致癌物誘發(fā)小鼠腫瘤模型，進行腫瘤病因?qū)W、發(fā)病學和藥物防治研究。如C3H小鼠自發(fā)乳腺癌高達90%，AKR小鼠白血病自發(fā)率很高。小鼠自發(fā)腫瘤從腫瘤發(fā)生學上來看，,與人體腫瘤接近，進行藥物篩選比移植性腫瘤可更為理想。（4）小鼠繁殖能力很強，妊娠期僅21天，生長速度很快，所以很適合避孕藥和營養(yǎng)學實驗研究。（5）鎮(zhèn)咳、祛痰、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、止血、益智及免疫功能等藥效學研究。2.大鼠：豚鼠屬哺乳綱，嚙齒目，鼠科、大

30、鼠屬動物。（1）大鼠無膽囊，肝臟分泌的膽汁通過總膽管而進入十二指腸，常用大鼠作膽管插管收集膽汁觀察藥物的利膽作用。（2）大鼠是研究降壓藥及檢測升壓物質(zhì)含量的,常用動物。應(yīng)用遺傳學培育成功的自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)、腦卒中易感型自發(fā)性高血壓大鼠(SHRsp)、糖尿病型和肥胖型SHR、新西蘭種高血壓大鼠(GHR)、米蘭高血壓種大鼠(MHR)以及鹽敏感性高血壓大鼠，也是研究降壓藥常用的高血壓病理模型。 （3）大鼠又是制造發(fā)熱病理模型

31、和踝關(guān)節(jié)腫模型的常用動物。3.豚鼠：豚鼠屬哺乳綱、嚙齒目，豚鼠科動物，又名天竺鼠、海豬、荷蘭豬。 （1）豚鼠對組織胺極敏感，很適合做平喘藥和抗組織胺藥的研究。,（2）豚鼠對人型結(jié)核桿菌具有高度的敏感性，常用于抗結(jié)核病藥物的研究。豚鼠易于過敏，是研究抗過敏反應(yīng)藥物的常用動物，如給豚鼠注射馬血清很容易復(fù)制成過敏性休克的動物模型。（3）豚鼠和家兔的皮膚對毒物刺激反應(yīng)靈敏，常用于藥物對皮膚的刺激性及過敏性試驗。（4）豚鼠的耳窩管對聲

32、波極為敏感，常用豚鼠作內(nèi)耳疾病模型及聽力損害的模型。（5）豚鼠體內(nèi)不能合成維生素C，對維生素C缺乏十分敏感，是目前唯一用于研究實驗性壞血病的動物。,4.家兔：家兔屬哺乳綱、嚙齒目、兔科，草食性哺乳動物。（1）復(fù)制高脂血癥及動脈粥樣硬化癥模型（喂食膽固醇）：與人類的病變基本相似，而大鼠或雞模型與人類病變相比，則差異較為突出。（2）避孕藥研究：成年雌兔是誘發(fā)性排卵動物，排卵的時間可準確判定。（3）復(fù)制角膜炎癥模型及角膜瘢痕模型。（

33、4）研究解熱藥物和檢查熱原：家兔體溫變化十分靈敏，最易復(fù)制發(fā)熱的動物模型，且發(fā)熱反應(yīng)典型、恒定，是的動物。 （5）用家兔皮膚觀察毒物、藥物、化妝品等對皮膚局部作用的影響。,5.貓 （1）降壓藥研究：貓的循環(huán)系統(tǒng)發(fā)達、血壓穩(wěn)定、對藥物反應(yīng)靈敏，且與人基本一致，是研究的常用動物。特別適合于藥物對循環(huán)系統(tǒng)作用機理的分析。（2）鎮(zhèn)咳藥研究：貓在正常情況下很少咳嗽，但受到電刺激、機械刺激或化學刺激后易誘發(fā)咳嗽，是的常用動物。 6.狗：B

34、eagle犬（1）藥物長期毒性試驗：狗也是常用動物之一。（2）復(fù)制心血管疾病模型：失血性休克、感染中毒性休克、急性心肌缺血、急性心肌梗塞、犬心臟血流動力學試驗（抗休克藥、抗心絞痛藥、強心藥）。（3）降壓藥研究：狗是急性降壓試驗和復(fù)制腎性高血壓模型進行高血壓實驗治療的常用動物。,五、受試藥物 在中藥新制劑的研究工作中，首先要由藥劑學等科學工作者研制出有效、安全、性質(zhì)穩(wěn)定和使用方便的中藥新制劑來，該制劑的生產(chǎn)工藝科學

35、，適合于工業(yè)生產(chǎn)，并制定有質(zhì)量標準以控制其質(zhì)量，其劑型應(yīng)與臨床研究用藥基本相同。提供這樣制備的中藥新制劑再進行主要藥效學、一般藥理、藥代動力學、毒理學及臨床療效研究。在整個研究過程中，各學科始終是相互滲透、密切聯(lián)系的，各學科研究工作者應(yīng)密切配合，相互協(xié)作，彼此促進。 （一）基本要求 受試藥物應(yīng)處方固定，組成處方的各味藥材經(jīng)過品種鑒定，生產(chǎn)工藝基本定型，質(zhì)量標準及穩(wěn)定性試驗基本符合要求，與臨床用藥基本相同的劑型與質(zhì)量。

36、,凡是藥材未經(jīng)鑒定，處方、生產(chǎn)工藝、質(zhì)量、劑型等尚未固定，或有變動者，不宜用作藥效學試驗，其結(jié)果也不能用作新藥有效性評價的根據(jù)。（二）具體要求 1.消化道給藥：包括灌胃、胃管、十二指腸給藥等，可用制劑或提取物進行藥效學試驗。 2.注射給藥及試管內(nèi)給藥：應(yīng)是化學純品或精制的中藥制劑。 3.外用藥：包括擦劑、洗劑、貼劑、膏藥等。一類是用于治療體表或局部疾患；另一類是局部用藥治療遠隔部位或全身

37、性疾患，如局部或穴位貼藥。兩者均可用制劑或中藥提取物，應(yīng)盡量進行透皮吸收試驗。,4.其他：眼、耳、鼻、吸入劑及體腔給藥（如直腸、陰道、氣管內(nèi)、腹腔、胸腔等給藥）。供拭藥物的要求基本與注射劑相同。六、陽性對照藥物 陽性對照藥物可選用藥典收載或正式批準生產(chǎn)的中藥或西藥，選用的藥物應(yīng)力求與新藥的主治相同，功能相似，劑型及給藥途徑相同者。 （1）可檢查試驗方法及觀測指標的可靠性，應(yīng)有“陽性” 作用結(jié)果。 （2）評價新藥與

38、陽性對照藥物(已知同類藥)在作用強度、發(fā)生作用快慢、維持作用時間等方面的優(yōu)劣和特點。,六、給藥劑量與給藥途徑（一）給藥劑量 給藥劑量就是用藥的份量。在一定的劑量范圍內(nèi)，藥物的作用與給藥劑量呈正比例關(guān)系變化。即劑量愈大，藥物在機體內(nèi)的濃度愈高，作用也愈強。劑量過小，不出現(xiàn)作用；劑量過大，超過一定范圍，治療作用不再增加，而常出現(xiàn)不良反應(yīng)或毒性反應(yīng)，直至引起死亡。在中藥新制劑的藥效和毒性研究中，給藥劑量是一個重要的概念。祖國

39、醫(yī)學對用藥劑量是比較講究的，前人說“中醫(yī)不傳之秘在用量上”。在中藥復(fù)方中，常因1種藥物劑量的增減，其作用就會向另一方面轉(zhuǎn)化，其適應(yīng)癥就會不同。,如桂枝湯中，（1）桂枝和白芍的用量相等，有調(diào)和營衛(wèi)、解肌的功效，主治太陽中風，頭痛發(fā)熱，汗出惡風等證。（2）而桂枝加芍藥湯中，白芍的用量比桂枝多1倍，就成為治太陽病誤下而引起的腹?jié)M時痛的藥方；（3）如果重加桂枝，就成了解肌散寒，降逆平?jīng)_的藥方了。 又如厚樸三物湯、小承氣湯和厚樸大黃湯這3

40、個藥方都是厚樸、枳實和大黃3味藥物組成的。因3藥的用量在各方中不同，不僅方名不同，而且治證也不同。 在中藥新制劑的藥效學研究中選擇適合的給藥劑量是很重要的。實驗者總希望得到陽性的試驗結(jié)果，有時將藥物劑量及濃度用得很高，往往就得出了該藥物具有多種藥理作用的結(jié)果，,尤其是一些離體器官試驗，在較高濃度下才出現(xiàn)的作用，與整體條件下的結(jié)果常有較大差別，值得注意。中藥新制劑中大多數(shù)含天然藥物，其中大多為植物藥，含有多種有效成分，甚至有效物質(zhì)

41、可能僅為微量，如按化學藥物那樣去嚴格規(guī)定最小有效量、極量、最小中毒量等往往是困難的。 臨床前藥效研究時人體的用藥劑量還沒有取得，因而在一定劑量下所取得的藥理作用到底有無實際治療價值還無法確定。在臨床試用時劑量的選擇也很重要，藥物的劑量與臨床療效也有密切關(guān)系。如一葉秋堿，曾因為劑量選擇不當，其對小兒麻痹后遺癥的療效被否定。后來，研究人員深入實踐，加大劑量，并采取了穴位注射，獲得較好療效。又如羥基喜樹堿，,經(jīng)動物試驗的毒性較大，最初

42、臨床試用時不敢應(yīng)用較大劑量，只用0.5～1mg，不顯效，后來發(fā)現(xiàn)在人身上其毒性較喜樹堿低，用至4mg甚至5～10mg每天靜注1次而顯效。又如用補骨脂素治療口服避孕藥引起的月經(jīng)過多，開始用40mg以下，不顯效，用至60mg才收到滿意效果?？梢娝幬飫┝繉λ幮Ш团R床療效的研究與評價都是一個值得注意的重要問題。 在藥效學試驗中，劑量-藥效關(guān)系（量效關(guān)系）常以表現(xiàn)出來，有時甚至相反。例如文獻報道：小劑量（2mg/日）甘草甜素：使動脈粥樣硬化

43、家兔的動脈粥樣硬化程度減輕，血膽固醇含量降低；大劑量（20mg/日）能抑制大動脈及冠狀動脈粥樣硬化的發(fā)展；更大劑量（40mg/日）時反而無效。,又如：一種含有白術(shù)的治療“腸激惹綜合征” 的復(fù)方中藥制劑，藥效試驗小劑量具有“止瀉”作用，但大劑量反而有“致瀉” 作用。由于白術(shù)在低濃度0.1μmol/L對離體豚鼠回腸有抑制作用；但在較大濃度1～10μmol/L以上時則呈現(xiàn)興奮作用，并呈量效關(guān)系變化。（二）給藥途徑 中藥新制

44、劑的藥效學試驗要求給藥途徑應(yīng)與臨床相同，如確有困難，也可選用其他給藥途徑進行試驗，但應(yīng)說明原因。急性毒性試驗進行半數(shù)致死量(LD50)測定或最大給藥量（最大耐受量）測定時，應(yīng)選用擬推薦臨床試驗的給藥途徑，水溶性好的藥物還應(yīng)測定注射給藥的LD50。而長期毒性試驗則要求給藥途徑應(yīng)與推薦臨床試驗的給藥途徑相一致。,不同的給藥途徑對藥物的吸收、分布、代謝和排泄都有很大影響，因而常常能影響藥物的作用強度，有時甚至影響到藥物作用的有無、作用部位和作

45、用性質(zhì)等。硫酸鎂是一個典型的例子，由于給藥途徑不同，其藥理作用和適應(yīng)癥不同。硫酸鎂口服給藥后，發(fā)揮導瀉作用和利膽作用，用于治療便秘或膽囊炎等。如采用肌肉注射或靜脈給藥，則能抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)，有鎮(zhèn)靜止痙作用，并有橫紋肌及血管平滑肌馳緩、舒張周圍血管及降低血壓的作用，而用于子癇、破傷風、高血壓腦病、尿毒癥及低鎂血癥的治療。此外，硫酸鎂靜脈給藥，還可使心室復(fù)極趨于一致，用于尖端扭轉(zhuǎn)型室速，尤適用于高血壓、心室激惹、不宜用異丙腎上腺素又不便電刺