1、目的：
　　應用RNA干擾（RNA interfering,RNAi）技術沉默吲哚胺2,3-雙加氧酶1（Indoleamine2,3-dioxygenase-1,IDO1），觀察沉默IDO1對Lewis肺癌細胞株（Lewis lung cancer cells,LLC）生物學特征的影響，并研究IDO1的短發(fā)夾RNA（short hairpin RNA,shRNA）IDO1-shRNA對肺癌荷瘤小鼠腫瘤的生長及血管生成的影響，探討I

2、DO1與肺癌血管生成之間的關系，為肺癌的分子治療提供實驗依據。
　　方法：
　　1、采用IDO1-siRNA（small interfering RNA,siRNA）沉默LLC細胞中的IDO1基因，通過實時熒光定量PCR法檢測IDO1 mRNA的表達變化，Western-blot法檢測IDO1蛋白的表達變化。
　　2、分別用侵襲實驗、遷移實驗以及基質膠三維培養(yǎng)實驗檢測沉默IDO1基因對LLC細胞的侵襲、遷移及血管擬態(tài)（

3、Vasculogenic mimicry,VM）形成能力的變化。
　　3、于C57BL/6小鼠背部皮下建立肺癌荷瘤小鼠模型，采用尾靜脈高壓注射50μg IDO1-shRNA的方法進行抗腫瘤治療，每天觀察并記錄其對腫瘤生長的影響。
　　4、利用免疫組化的方法分別檢測小鼠腫瘤組織中IDO1及CD34、CD146分別標記的微血管密度（Microvessel density,MVD;CD34+MVD,CD146+MVD）的表達變化，

4、并分析IDO1與CD34+MVD、CD146+MVD之間的相關性。
　　結果：
　　1、實時熒光定量PCR、Western-blot結果顯示，LLC細胞經轉染IDO1-siRNA后，IDO1 mRNA表達水平及蛋白表達水平明顯下降，IDO1基因的沉默效率可達80％以上。
　　2、侵襲實驗結果顯示，沉默IDO1后的LLC細胞其侵襲能力明顯被抑制；遷移實驗結果顯示，IDO1基因沉默后的LLC細胞其遷移能力明顯減弱；此外，基

5、質膠三維培養(yǎng)實驗結果顯示，IDO1基因沉默后的LLC細胞生成血管擬態(tài)的管狀結構數目明顯減少。
　　3、肺癌荷瘤小鼠經全身系統(tǒng)性給予 IDO1-shRNA治療后，與Scramble-shRNA、Control組相比，IDO1-shRNA治療組腫瘤的生長速度明顯減慢、腫瘤的大小明顯減小、腫瘤的重量明顯減輕。
　　4、免疫組化結果顯示，IDO1-shRNA治療組小鼠腫瘤組織中IDO1及CD34+MVD、CD146+MVD的表達均明

6、顯下降，且IDO1與CD34+MVD、CD146+MVD均具有相關性(r2=0.8632,r2=0.761)。
　　結論：
　　1、LLC細胞中的IDO1基因被沉默后，其部分生物學特征明顯發(fā)生了改變，如：細胞的侵襲、遷移、血管擬態(tài)形成能力均被抑制了。
　　2、IDO1-shRNA能夠抑制小鼠肺癌的血管生成，同時有效抑制腫瘤的生長。
　　3、小鼠腫瘤組織中IDO1表達水平的高低與CD34+MVD、CD146+MVD