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1、本文主要探討有機(jī)錫污染致海洋軟體動(dòng)物出現(xiàn)異常形態(tài)特征——性畸變的分子機(jī)制,選取了受有機(jī)錫污染后高頻率出現(xiàn)性畸變的疣荔枝螺為實(shí)驗(yàn)材料,從性別形態(tài)特征、蛋白質(zhì)、DNA以及RNA等水平對(duì)雌、雄和性畸變不同階段個(gè)體進(jìn)行了研究,主要研究結(jié)果如下:
對(duì)有機(jī)錫污染差異顯著的兩個(gè)采樣點(diǎn)進(jìn)行疣荔枝螺性別形態(tài)調(diào)查分析,從輕度污染的南澳島采集到的疣荔枝螺性畸變率極低(性畸變率僅為0.57%),而由污染嚴(yán)重的廣澳灣采集到的該螺性畸變率幾乎達(dá)到100%
2、,表明有機(jī)錫污染與其性畸變現(xiàn)象關(guān)系密切;大多數(shù)畸變個(gè)體處在初級(jí)和中期階段,畸變程度嚴(yán)重的個(gè)體較少,證明性畸變現(xiàn)象是一個(gè)漸近的過(guò)程。
通過(guò)從蛋白質(zhì)水平檢測(cè)疣荔枝螺個(gè)體間的差異,證明有機(jī)錫污染導(dǎo)致性畸變個(gè)體的多項(xiàng)生化指標(biāo)出現(xiàn)了有規(guī)律的變化。其中SDS-PAGE和同工酶分析表明,隨著雌螺性畸變個(gè)體逐漸在形態(tài)上出現(xiàn)與雄性個(gè)體相似的器官,其體內(nèi)蛋白表達(dá)情況和表達(dá)量也有向雄性個(gè)體發(fā)展的趨向;SOD、LPO和CAT活性(或含量)測(cè)定的結(jié)果顯
3、示,SOD隨著性畸變程度的加重,其在螺體內(nèi)的活力先下降后上升,即在性畸變初期階段(I1階段)活力開(kāi)始降低,在性畸變第二階段(I2階段)活力降到最低點(diǎn),隨后活力又呈上升趨勢(shì);而LPO含量和CAT活力隨著性畸變的加重,在螺體內(nèi)的變化趨勢(shì)與SOD的變化相反,為先上升后下降,變化的轉(zhuǎn)折點(diǎn)也出現(xiàn)在I2階段。
本項(xiàng)研究選用了40個(gè)隨機(jī)引物對(duì)采自汕頭廣澳灣的雄性、雌性及性畸變不同階段疣荔枝螺個(gè)體進(jìn)行了RAPD-PCR擴(kuò)增,結(jié)果有10個(gè)引物能
4、擴(kuò)增出清晰DNA片段,共擴(kuò)增出170條片段,其中差異性片段40條,證實(shí)了來(lái)自污染區(qū)螺的DNA出現(xiàn)了不正常的變化,推測(cè)致使其DNA變化的原因可能與有機(jī)錫的污染有一定的相關(guān)性。另外對(duì)來(lái)自mRNA差異顯示的片段進(jìn)行引物設(shè)計(jì),用此引物對(duì)螺個(gè)體基因組DNA進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果也證實(shí)了有機(jī)錫污染對(duì)其DNA的隨機(jī)性損傷作用。
另外,本研究通過(guò)mRNA差異顯示技術(shù),檢測(cè)到1條雌、雄性別間cDNA差異表達(dá)片段,對(duì)此片段進(jìn)行回收,并進(jìn)行二次擴(kuò)增、克隆和
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