1、1緒論緒論課后討論題：課后討論題：1、對(duì)植物組織培養(yǎng)技術(shù)的展望。2、植物組織培養(yǎng)發(fā)展史的各個(gè)時(shí)期，有哪些主要的培養(yǎng)技術(shù)獲得成功？課外作業(yè)題：課外作業(yè)題：1、什么叫植物組織培養(yǎng)技術(shù)？它有哪些類(lèi)型？其理論依據(jù)是什么？、什么叫植物組織培養(yǎng)技術(shù)？它有哪些類(lèi)型？其理論依據(jù)是什么？植物組織培養(yǎng)的概念可以分為廣義和狹義。廣義的植物組織培養(yǎng)（planttissueculture）是指在無(wú)菌和人工預(yù)知的控制條件下，利用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，對(duì)離體的植物器在無(wú)菌和

2、人工預(yù)知的控制條件下，利用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，對(duì)離體的植物器官、組織或細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，使其再生細(xì)胞或生長(zhǎng)、分化成完整植株的技術(shù)。官、組織或細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，使其再生細(xì)胞或生長(zhǎng)、分化成完整植株的技術(shù)。狹義的植物組織培養(yǎng)僅指對(duì)植物的組織（如分生組織、表皮組織、薄壁組織等）及培養(yǎng)產(chǎn)生的愈傷組織（callus）進(jìn)行離體培養(yǎng)的技術(shù)。從培養(yǎng)對(duì)象上來(lái)看，植物組織培養(yǎng)主要有植株的培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)及原生質(zhì)體培養(yǎng)，目前，由這六方面的

3、研究類(lèi)型又延伸出多種應(yīng)用領(lǐng)域的研究工作。植物組織培養(yǎng)的主要特點(diǎn)是采用微生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)手段來(lái)操作植物離體的器官、組織和細(xì)胞。2、從外植體到小植株有哪些培養(yǎng)途徑？、從外植體到小植株有哪些培養(yǎng)途徑？離體器官的分化有三種比較典型的分化途徑：一是由分生組織直接分生芽；二是由分生組織形成愈傷組織，經(jīng)過(guò)分化實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的全能性；三是游離細(xì)胞或原生質(zhì)體形成胚狀體(embryoid)，由胚狀體直接重建完整植株，或制成人工種子后再重建植株。愈傷組織再分化時(shí)，可經(jīng)

4、過(guò)兩條途徑，一是由愈傷組織的部分細(xì)胞先分化產(chǎn)生芽（或根），再在另一種培養(yǎng)基上產(chǎn)生根（或芽），形成一個(gè)完整的植株，因?yàn)檠亢透际侵参矬w的器官，所以這一過(guò)程叫器官發(fā)生途徑器官發(fā)生途徑。二是在愈傷組織中產(chǎn)生出一些與種子中的胚相似的結(jié)構(gòu)，即同時(shí)形成一個(gè)有苗端和根端的兩極性結(jié)構(gòu)，然后再在另一種培養(yǎng)基上同時(shí)發(fā)展成帶根苗，由于這一過(guò)程與種子中胚的形成和種子萌發(fā)時(shí)形成幼苗的過(guò)程相似，所以叫做胚狀體發(fā)生或無(wú)性胚胎發(fā)生胚狀體發(fā)生或無(wú)性胚胎發(fā)生。3等已造成相

5、當(dāng)數(shù)量的植物物種消失或正在消失，特別是具有獨(dú)特遺傳性狀的生物物種的絕跡更是一種不可挽回的損失?，F(xiàn)在已有許多種植物在離體條件下，通過(guò)抑制生長(zhǎng)或超低溫貯存的方法，使培養(yǎng)材料能長(zhǎng)期保存，并保持其生活力，既節(jié)約了人力、物力和土地，還防止了有害病蟲(chóng)的人為傳播，更便于種質(zhì)資源的交換和轉(zhuǎn)移，給保存和搶救有用基因帶來(lái)了希望。6人工種子人工種子第1章植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備和一般技術(shù)植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)備和一般技術(shù)課堂討論題：課堂討論題：1、為

6、了降低生產(chǎn)成本，組培室的設(shè)計(jì)應(yīng)注意哪些問(wèn)題？2、在高溫高壓滅菌過(guò)程中應(yīng)該注意的哪些問(wèn)題？課外作業(yè)題課外作業(yè)題1、簡(jiǎn)述培養(yǎng)基和器具的滅菌方法和技術(shù)。、簡(jiǎn)述培養(yǎng)基和器具的滅菌方法和技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基由于含有高濃度蔗糖，能供養(yǎng)很多微生物如細(xì)菌和真菌的生長(zhǎng)。一旦接觸培養(yǎng)基，這些微生物的生長(zhǎng)速度一般都比培養(yǎng)的組織快得多，最終將把組織全部殺死。這些污染微生物還可能排泄對(duì)植物組織有毒的代謝廢物。因此，在培養(yǎng)容器內(nèi)部保持一個(gè)完全無(wú)菌的環(huán)境是絕對(duì)

7、必須的。為達(dá)到這個(gè)目的，有兩點(diǎn)必須注意：①不要與微生物工作者或病理工作者共用組織培養(yǎng)工作區(qū)；②一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，立即將污染的培養(yǎng)物拿出培養(yǎng)室進(jìn)行處理。（1）培養(yǎng)基的滅菌）培養(yǎng)基的滅菌A高壓蒸汽滅茵法高壓蒸汽滅茵法由于未經(jīng)滅菌處理的培養(yǎng)基既可能帶有各種雜菌，同時(shí)又是各種雜菌良好的生長(zhǎng)繁殖場(chǎng)所，因此培養(yǎng)基分裝后應(yīng)立即置于高壓蒸氣滅菌鍋內(nèi)進(jìn)行滅菌。高壓蒸氣滅菌有大型臥式、中型立式、小型手提式等多種，在使用高壓滅菌鍋時(shí)，應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：①使用高壓鍋前應(yīng)

8、添加足夠的水；②鍋內(nèi)氣壓太高(超過(guò)1.52105Pa)會(huì)引起部分有機(jī)物質(zhì)的分解；③滅菌后在氣壓表歸零之前不要打開(kāi)鍋蓋，以免發(fā)生危險(xiǎn)和培養(yǎng)基外濺現(xiàn)象；④橡膠等有機(jī)物品會(huì)因高溫高壓而變性；⑤高壓滅菌鍋內(nèi)有一個(gè)自動(dòng)排氣的小孔，不要使其堵塞，否則會(huì)因氣壓升高而引起危險(xiǎn)。B過(guò)濾除菌法過(guò)濾除菌法當(dāng)培養(yǎng)基中含有吲哚乙酸、玉米素及某些維生素等遇熱不穩(wěn)定的生物活性物質(zhì)，不能進(jìn)行高壓蒸氣滅菌，而必須采用過(guò)濾方法滅菌。過(guò)濾滅菌的原理是溶液通過(guò)濾膜過(guò)濾滅菌的原

9、理是溶液通過(guò)濾膜后，細(xì)菌的細(xì)胞和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻。后，細(xì)菌的細(xì)胞和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻。通常采用減壓過(guò)濾裝置和過(guò)濾滅菌器，前者主要由過(guò)濾器和抽氣系統(tǒng)兩部分構(gòu)成，后者需在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，適合少量溶液過(guò)濾。首先將滅菌過(guò)程中需使用的所有器皿用干熱滅菌法或高壓滅菌法滅菌，然后再進(jìn)行培養(yǎng)基的除菌操作。除菌后的培養(yǎng)基需要在超凈工作臺(tái)內(nèi)分裝。與高壓滅菌方法相比，過(guò)濾除菌法操作麻煩，有時(shí)效果不如高壓滅菌法，但是可以確保有機(jī)添加物不被破