1、背景與目的：
　　 在外界中存在著很多化學物質(zhì)，它們可以通過模擬人體內(nèi)天然激素的生化及生理等作用，干擾人體內(nèi)正常的內(nèi)分泌平衡，從而產(chǎn)生毒性作用，這類化學物質(zhì)我們稱其為環(huán)境內(nèi)分泌干擾物(Enviromnental Endocrine Disruptors，EEDs)。1995年，世界衛(wèi)生組織公布鄰苯二甲酸酯類(Phthalic Acid Esters，PAEs)化合物是一類擾亂內(nèi)分泌、并已造成全球性環(huán)境污染的、必須加強控制的化學物

2、質(zhì)，其中以鄰苯二甲酸二乙基己酯(Di-(2-ethylhexyl) Phthalate，DEHP)應(yīng)用最廣泛、污染最嚴重，其應(yīng)用量每年超過2百萬噸，占PAEs總量的40％。為了評價PAEs化合物對大鼠卵巢功能的影響，探討其對女性生殖健康方面潛在的危害性，本研究選用DEHP為研究對象，通過動物實驗，研究不同劑量及不同療程的DEHP處理后各大鼠動情周期、性激素水平及卵巢組織學的改變，來探討其對大鼠卵巢功能的影響。本研究彌補了當前關(guān)于研究DE

3、HP對雌性性腺卵巢毒性方面資料的不足，為全面評價PAEs化合物的毒性作用提供了科學依據(jù)。
　　 方法：
　　 選取健康SD雌性大鼠80只，隨機分為以下8組(每組10只)：短療程空白對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組及長療程空白對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組。低、中、高劑量組根據(jù)體重，分別灌喂DEHP：1000mg/kg/d，2000mg/kg/d和3000mg/kg/d。空白對照組：無藥物干預(yù)。短療程灌胃14天，

4、長療程灌胃28天。整個觀察期間，各組大鼠每日陰道涂片觀察動情周期；每周一、四測量大鼠體重以觀察動物生長情況并調(diào)整用藥劑量。觀察期末，各組大鼠麻醉手術(shù)，摘取雙側(cè)卵巢，稱重后固定，制成石蠟切片進行組織學研究。同時各組大鼠選用下腔靜脈采血，按酶聯(lián)免疫試劑盒說明書測血清中孕酮(Progesterone，P)、雌二醇(Estrogen，E2)、睪酮(Testosterone，T)、卵泡刺激素(Follicle Stimulating Hormon

5、e，F(xiàn)SH)、黃體生成素(LuteinizingHormone，LH)含量。采用SPSS統(tǒng)計軟件進行分析，應(yīng)用單因素方差分析、Kruskal-Wallis檢驗或Wilcoxon秩和檢驗進行組間比較，應(yīng)用LSD-t檢驗或Bonferroni法進行多重比較。
　　 結(jié)果：
　　 1、DEHP作用下大鼠體重增長受限
　　 實驗全程大鼠未出現(xiàn)病、死現(xiàn)象；空白對照組大鼠基本生活狀態(tài)良好，體重增長理想，毛發(fā)有光澤，但藥物組在

6、給藥后逐漸出現(xiàn)食欲減退現(xiàn)象，毛發(fā)光澤度下降，體重增長不理想，以長療程高劑量組明顯，個別大鼠甚至出現(xiàn)體重下降現(xiàn)象。處理前各組大鼠體重差異無統(tǒng)計學意義；處理后，短療程高、中、低劑量組的體重低于空白對照組，四個組間差異有統(tǒng)計學意義(P=0.042)，進行多重比較可見高、低劑量組分別與空白對照組的差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.029，0.010)；長療程高、中、低劑量組的體重低于空白對照組，四個組間差異有統(tǒng)計學意義(P=0.026)，進行多重

7、比較見長療程高、中劑量組分別與空白對照組差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.014，0.006)，即長療程高、中劑量組大鼠的體重比空白對照組明顯減輕，因此可推斷DEHP使大鼠體重增長受限。
　　 2、DEHP作用下大鼠動情周期發(fā)生改變
　　 短療程高劑量組及長療程高、中、低劑量組大鼠出現(xiàn)明顯的動情周期延長，短療程高、中、低劑量組及空白對照組四個組間的差異有統(tǒng)計學意義(P=0.02)，進行多重比較發(fā)現(xiàn)短療程高劑量組分別與中、低

8、劑量組及空白對照組相比差異均有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.008，0.019，0.002)，具有劑量依賴性；長療程高、中、低劑量組及空白對照組四個組間的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.001)，進行多重比較發(fā)現(xiàn)長療程高、中、低劑量組分別與空白對照組相比差異均有統(tǒng)計學意義(P值均＜0.001)；低、中劑量組的長、短療程之間的差異有統(tǒng)計學意義(P值均＜0.001)，而高劑量組的長、短療程之間的差異無統(tǒng)計學意義，不具有明顯的時間依賴性。
　　

9、 3、DEHP作用下大鼠卵巢的改變
　　 (1)卵巢大體改變：卵巢外表光滑，有光澤，可分清皮質(zhì)和髓質(zhì)兩部分。大鼠卵巢質(zhì)量以卵巢質(zhì)量指數(shù)進行比較(卵巢質(zhì)量指數(shù)=卵巢質(zhì)量(g)/大鼠體質(zhì)量(g)×100[3])，短療程高、中、低劑量組的卵巢質(zhì)量指數(shù)小于空白對照組，四個組間差異有統(tǒng)計學意義(P=0.003)，進行多重比較可見高、中劑量組分別與空白對照組的差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.001，0.007);長療程高、中、低劑量組的卵巢

10、質(zhì)量指數(shù)小于空白對照組，四個組間差異有統(tǒng)計學意義(P=0.002)，進行多重比較見長療程高、中劑量組分別與空白對照組差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.017，0.026)，即長療程高、中、劑量組大鼠的卵巢質(zhì)量比空白對照組明顯減輕，因此從大體上可推斷DEHP使大鼠卵巢發(fā)育受影響，重量減輕，并隨著劑量增加，差異越顯著，具有劑量依賴性。
　　 (2)卵巢組織形態(tài)學改變：短療程各劑量組卵巢組織未見異常。長療程四個組可發(fā)現(xiàn)個別卵巢組織出現(xiàn)顆

11、粒細胞及卵泡內(nèi)卵母細胞發(fā)育欠佳，表現(xiàn)為顆粒細胞層數(shù)減少或缺如，卵細胞結(jié)構(gòu)不清晰，甚至消失，透明帶皺縮。長療程高、中劑量組的卵巢中成熟卵泡相對減少。其它沒有觀察到卵巢組織變性、壞死等明顯病理變化。據(jù)此可推測在本實驗條件下，DEHP對卵巢組織未產(chǎn)生明顯的直接損傷作用。
　　 4、DEHP處理后大鼠血清性激素水平的改變
　　 短療程高、中、低劑量組和空白對照組四組的睪酮水平逐漸下降，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.001)，進行多重

12、比較發(fā)現(xiàn)短療程高劑量組分別與低劑量組、空白對照組之間的睪酮水平差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.026，＜0.001)，具有劑量依賴性；長療程高、中、低劑量組和空白對照組四組的睪酮水平逐漸下降，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.006)，進行多重比較發(fā)現(xiàn)長療程高劑量組與空白對照組之間的睪酮水平差異有統(tǒng)計學意義(P=0.004)，具有劑量依賴性；各劑量組的長、短療程之間的睪酮水平差異均無統(tǒng)計學意義，不具有時間依賴性。長、短療程高、中、低劑量組的雌二

13、醇水平分別比空白對照組稍低，但差異無統(tǒng)計學意義；各劑量組的長、短療程之間的雌二醇水平差異均無統(tǒng)計學意義。長、短療程各組間的孕酮、卵泡刺激素及黃體生成素水平均無顯著性差異，各劑量組的長、短療程之間的孕酮、卵泡刺激素及黃體生成素水平均無統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)論：
　　 1、DEHP引起大鼠血清睪酮水平上升，抑制排卵，使大鼠動情周期延長，具有生殖毒性作用，并具有劑量依賴性，但不具有明顯的時間依賴性。
　　 2、DEHP