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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)室常用溶液的配制130%丙烯酰胺溶液(100ml)【配制方法】將29g丙烯酰胺和1gNN亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的蒸餾水中。加熱至37℃溶解之,補(bǔ)加水至終體積為100ml。用Nalgene濾器(0.45μm孔徑)過濾除菌,查證該溶液的pH值應(yīng)不大于7.0,置棕色瓶中保存于4℃溫度?!咀⒁狻勘0肪哂泻軓?qiáng)的神經(jīng)毒性并可以通過皮膚吸收,其作用具累積性。稱量丙烯酰胺和亞甲雙丙烯酰胺時(shí)應(yīng)戴手套和面具。可認(rèn)為聚丙烯酰胺無毒,但也應(yīng)
2、謹(jǐn)慎操作,因?yàn)樗€可能會(huì)含有少量未聚合材料。一些價(jià)格較低的丙烯酰胺和雙丙烯酰胺通常含有一些金屬離子,在丙烯酰胺貯存液中加入大約0.2體積的單床混合樹脂(MB1Mallinckrodt),攪拌過夜,然后用Whatman1號(hào)濾紙過濾以純化之。在貯存期間,丙烯酰胺和雙丙烯酰胺會(huì)緩慢轉(zhuǎn)化成丙烯酰和雙丙烯酸,因此大于1年的溶液應(yīng)該被丟棄。240%丙烯酰胺(用于DNA測序,1L)【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA測序級(jí))和20gNN亞甲雙丙烯酰
3、胺溶于總體積為600ml的蒸餾水中。繼續(xù)按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法處理,但加熱溶解后應(yīng)以蒸餾水補(bǔ)足至終體積為1L。置棕色瓶中保存于室溫?!咀⒁狻恳娚鲜雠渲?0%丙烯酰胺的說明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列測定。30.1molL腺苷三磷酸(ATP)溶液(1ml)【配制方法】在0.8ml蒸餾水中溶解60mgATP,用0.1molLNaOH調(diào)至pH值至7.0,用蒸餾水稀釋1ml【注意】分裝成小份保存于70℃410molL乙酸銨溶液
4、(1L)【配制方法】把770g乙酸銨溶解于800ml蒸餾水中,加水稀釋至1L后過濾除菌。在4C儲(chǔ)存?!咀⒁狻恳宜徜@是熱不穩(wěn)定的。不要高壓滅菌。510%過硫酸銨溶液(10ml)【配制方法】把1g過硫酸銨溶于8ml蒸餾水中,用蒸餾水補(bǔ)足體積至10ml。該溶液可在4℃保存數(shù)周。61molLCaCl2溶液(200ml)【注意】EDTA二鈉鹽不溶于水,需加入NaOH將溶液的pH值調(diào)至接近8.0,才能完全溶解。分配適當(dāng)?shù)牡确衷嚇硬⑼ㄟ^高壓滅菌消毒。
5、11溴化乙錠(10mgml溶液)(100ml)【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙錠,磁力攪拌數(shù)小時(shí)以確保其完全溶解,然后用鋁箔包裹容器或轉(zhuǎn)移至棕色瓶中,保存于4C?!咀⒁狻啃⌒模轰寤义V是強(qiáng)誘變劑并有中度毒性,使用含有這種染料的溶液時(shí)務(wù)必戴上手套,稱量染料時(shí)要戴面罩。使用后,這些溶液應(yīng)進(jìn)行凈化。有關(guān)如何執(zhí)行此操作的詳細(xì)信息,請(qǐng)參閱機(jī)構(gòu)指南。122HEPES緩沖鹽溶液(100ml)【配制方法】用90ml的蒸餾水溶解1.6gNaCl
6、、0.074gKCl、0.027gNa2PO42H2O、0.2g葡萄糖和1gHEPES,用0.5mollNaOH調(diào)節(jié)pH值至7.05,再用蒸餾水稀釋至100ml。用0.22μm濾器過濾除菌,分裝成5ml小份,貯存于20℃。131moll異丙硫基βD半乳糖苷IPTG溶液(10ml)【配制方法】IPTG(分子量為238.3),在8ml蒸餾水中溶解2gIPTG后,用蒸餾水稀釋至10ml,用0.22μm一次性濾器過濾除菌,分裝成1ml小份貯存于
7、20℃。141molL乙酸鎂(MgOAc)溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸餾水中溶解214.46g四水乙酸鎂,稀釋至1L過濾除菌。在室溫下保存。151molLMgCl2溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸餾水中溶解203.4gMgCl26H2O,用水稀釋至1L,分裝成小份并高壓滅菌備用。在室溫下保存。【注意】MgCl2極易潮解,應(yīng)選購小瓶(如100g)試劑,啟用新瓶后勿長期存放。16酚氯仿溶液【配制方法】把酚和氯仿等體積混合后用
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