1、血吸蟲病的糞便檢查血吸蟲病的糞便檢查血吸蟲病的診斷，一般可分為臨床診斷和實驗診斷。臨床診斷是根據病史、癥狀和體征作出初步診斷，但不能確診病人。實驗診斷包括病原學診斷和免疫學診斷。血吸蟲病的病原學診斷有糞便檢查和活組織檢查兩種，若在受檢者的糞便或活組織中查見蟲卵或毛蚴，即可診斷為血吸蟲病人。血吸蟲病的糞便檢查有鏡檢法檢查蟲卵，孵化法檢查毛蚴，也有孵化結合沉渣鏡檢。由于孵化法取用的糞便量多，在糞內只要有少數活蟲卵就能查見，檢出率比較高。孵化

2、后的沉渣鏡檢，能檢出部分孵化檢漏的病人，能進一步提高檢出率，孵化結合鏡檢是目前血吸蟲病糞便檢查的主要方法。一、病原學診斷的理論基礎寄生在血管里的血吸蟲為何能在糞便中查到蟲卵先從血吸蟲產卵及蟲卵分布講起。雌雄合抱的成蟲寄生在人或哺乳動物的腸系膜靜脈內產卵，雌蟲在寄生期間的排卵能力可有變化。如小鼠感染日本血吸蟲（大陸株）后26～33d，每條雌蟲日平均產卵150個，34d為664個，44d為時達2092個，58d為929個，68d為370個卵

3、。雌蟲產出的蟲卵大部分沉積在腸和肝等組織，僅小部分卵可隨糞便排出體外。如小鼠感染大陸株日本血吸蟲44d產卵最多時（2092個日）分布于大腸、肝、小腸、自糞便排出和其它組織蟲卵的比例為50.5%、22.5%、18.3%、7.7%及1%。又如用山梨株日本血吸蟲尾蚴感染ddy小鼠4～15wk觀察，平均每條雌蟲每天產卵2100個。到15wk時，從糞便排出的累計蟲卵數占總產卵的28.2%；組織內蟲卵以小腸為主，占沉積蟲卵數83.2%，而肝內為15

4、.5%。表明，同一種血吸蟲的不同地域株和不同宿主，雌蟲產出的蟲卵在組織內的分布及排出體外的數量不盡相同。剛從雌蟲產出的蟲卵為單細胞卵，含1個受精卵和20個（16～30個）卵黃細胞，在組織內經10～11d發(fā)育成熟（含毛蚴卵），成熟卵在組織內成活時間約為11d。因此，日本血吸蟲卵自產出、發(fā)育成熟到死亡約經21～22d。血吸蟲卵從血管中通過腸壁（日本、曼氏血吸蟲）或膀胱（埃及血吸蟲）等組織釋放到腸腔或膀胱腔中，然后隨糞便或尿液排出，我們即可取

5、糞便或尿液作病原學檢查。但其機理尚未很好了解，一般認為涉及很多因素：蟲卵的刺、血流的壓力、腸蠕動以及毛蚴分泌的蛋白質酶等。其實，首要的應是隨著蟲卵中毛蚴的發(fā)育成熟，在蟲卵周圍形成病變，這是必要條件。所以排至外界的蟲卵大多是含活動毛蚴的成熟卵。成熟卵在合適的條件下可脫殼而出。因此，從糞便內檢查毛蚴，即毛蚴孵化法為日本血吸蟲特有的診斷技術。二、尼龍絹袋集卵孵化法曾采用的孵化法有量杯燒瓶沉淀孵化法、塑料杯頂管孵化法、尼龍絹袋集卵孵化法等。尼龍

6、絹袋集卵孵化法有下列優(yōu)點：（1）毛蚴計數高；（2）用水量少，可減少勞動力；（3）由于不需換水，可縮短操作時間，2—3min即可入瓶孵化；（4）器材輕巧，攜帶方便。為此，我們確定采用尼龍絹袋集卵孵化法。（一）毛蚴孵化的條件成熟的血吸蟲卵有機會落入自然界水體中，條件適合時，卵內毛蚴活動增強，在卵內不停地轉動，最終破殼而出，在水體中游動，這一過程稱孵化。毛蚴從卵內逸出的時間非常迅速，僅0.1～0.3s。日本血吸蟲卵孵化時卵殼大多數呈縱裂，毛蚴

7、迅速從縱向裂口逸出。1、滲透壓一般認為介質的低滲透壓作用是血吸蟲卵孵化的主要因素。成熟血吸蟲卵在血液、腸內容物或尿液中是不能孵化的，僅被淡水稀釋之后才能孵出毛蚴。糞便中的日本血吸蟲卵需待糞液被稀釋至一定混濁度以下始能孵化。研究證明，在0.7～0.9%氯化鈉溶液中，大多數日本血吸蟲卵的孵化被抑制，1.2%及其以上濃度全部蟲卵不能孵化。0.8%氯化鈉溶液的滲透壓相當于4.0大氣壓（表1）。表1日本血吸蟲卵在氯化鈉溶液中一天的孵化力（溫度日本

8、血吸蟲卵在氯化鈉溶液中一天的孵化力（溫度20℃）氯化鈉溶液濃度（%）未孵化蟲卵數孵化蟲卵數孵化率（%）滲透壓（大氣壓）1.08433.44.10.88711.13.30.6762020.82.50.4344557.01.70.2304660.50.8對照1911685.9—（okamoto，1962）若以清水中的蟲卵孵化率為100%，而在0.2%氯化鈉溶液中蟲卵的孵化率不減，在0.5%溶液中孵化率降為60%，在0.8%中降至7.5%，在

9、1.0%中降至1.8%，未孵出毛蚴的蟲卵在當時看來還是活的。2、溫度溫度是促使毛蚴孵化的必要條件，25℃左右是血吸蟲毛蚴孵化的適宜溫度，低于10℃或高于37℃，大多數蟲卵的孵化受抑制。一般是溫度愈高，孵化愈快，毛蚴壽命也愈短（表2）雖然日本血吸蟲卵在pH3.0～8.6范圍內可以孵化，但最適宜于孵化的pH為7.4～8.6范圍。酸性愈高愈不利于孵化，pH2.8已完全抑制蟲卵的孵化。另一方面，堿性愈高也有害于蟲卵孵化，在pH10以上時，蟲卵孵

10、化已完全被抑制。（二）毛蚴的行為1、游動毛蚴體表具有21（或22）個扁平的纖毛上皮細胞，每個纖毛上皮細胞生長有無數根纖毛，每根纖毛長4—5μm。它們的煽動能使毛蚴在水中很快地游動并旋轉前進，其游速平均為2.190.20mms，而每秒游動方向改變率的中位數值為540。毛蚴的游速與其時齡、溫度、光照度有關。剛孵出的毛蚴游速為2.27mms，1～5h為2.00mms，8h后下降為1.52mms。在溫度為4、12、22及34℃時，毛蚴的游速分別

11、為0.5、1.4、2.2及3.8mms。光照強度與毛蚴游速呈直線相關，回歸方程：Y=0.009X1.510，式中：Y為毛蚴游速，X為光照度。毛蚴的活力和壽命與水質、水的溫度及pH等因素有密切關系。在20～25℃時，日本血吸蟲毛蚴一般可活10h以上。pH7.5～8.5時毛蚴活動良好，在pH7～8時毛蚴一般可活5～6h，pH6或10時可成活2～3h，pH4～5時僅成活1～2min。鹽濃度高于或相當于0.7%時，毛蚴成活時間逐漸減少。鹽濃度為

12、0.157%和0.35%時，毛蚴成活時間明顯地較淡水中為長。2、趨性血吸蟲毛蚴對其周圍的物理因素往往能產生應答反應，許多研究者曾觀察了毛蚴的反應行為。一般說來，毛蚴的趨性可表現為向光性、向溫性、背地性（向上性）。日本血吸蟲毛蚴多趨向弱光（3600～3800Lux），回避強光和黑暗。在15℃時任何光照度均具有正趨光性，在20℃時對2000Lux以下的光照呈正向光，在25℃為500Lux以下，在30℃為50Lux以下為正向光，表明毛蚴的向光

13、性與溫度有關。日本血吸蟲毛蚴的趨溫性反應不如趨光性明顯，在14～34℃溫度范圍中選擇14℃的區(qū)域，在7～20℃的溫度范圍中，毛蚴選擇13～15℃的區(qū)域。毛蚴在水層中具有向上性（背地性），不論在黑暗或光亮的環(huán)境中毛蚴均有這一趨性，而且向上性較向光性為強。如在水柱的底部照光，而上部使其黑暗，大多毛蚴仍然集中在水柱的上層。由于毛蚴具有向上性，所以我們觀察毛蚴的位置應是三角燒瓶的頸部。（三）器材1、驗收登記材料：糞檢花名冊、標簽。2、集卵器材（

14、1）尼龍絹袋：選260目2.5cm尼龍絹袋，其孔徑為49～61μm，使用中經熱水反復浸泡后縮小至44～53μm，而血吸蟲卵大小為74～106（平均89）55～80（平均67）μm，故絕大多數蟲卵不會在沖洗過程中漏出袋外。袋的上口直徑8～10cm，長20cm，下口直徑1.5cm。（2）三角燒瓶：500ml或250ml。（3）銅絲篩（40～60目2.5cm）、壓舌木板（或竹快）、塑料夾、塑料漏斗。3、淋水沖洗器材：沖洗操作臺、鋁茶壺、糞桶。

15、4、觀察毛蚴器材：日光燈、黑板或黑卡紙、吸管、載玻片。5、鏡檢器材：顯微鏡、試管架、10ml試管、載玻片。6、清洗滅卵器材：鋁鍋、煤球爐（或電爐）、大木盆（或塑料盆）、瓶刷、肥皂、肥皂粉、毛巾等。（四）操作技術1、驗收登記驗看糞便的質量、數量及標簽。核對送檢名單無誤后，重寫省糞檢標簽3張，統(tǒng)一編號，然后在省糞檢花名冊上登記，棄去原標簽，將重寫的3張標簽插入包糞紙中。2、淋水沖洗取3只三角燒瓶，在其頸部各套上一根橡皮筋，取糞包中的3張標簽

16、，各折成寬約1cm的長條，夾在三角燒瓶頸部的橡皮筋中。取漏斗、壓舌板、銅絲篩各一個，取尼龍絹袋1只，下口用塑料夾夾住。將重約90g的大便分為3等份，先取1份大便置于40～60目25.4mm銅篩中淋水調漿，通過漏斗使糞液濾入260目25.4mm的尼龍絹袋中，然后移去銅篩及漏斗，將漏斗水洗后套在三角燒瓶上。繼續(xù)淋水沖洗袋內糞渣，用壓舌木版輕輕振蕩尼龍絹袋，使加速過濾，直至濾出液變清為止。棄去尼龍絹袋下部的塑料夾，將袋內的濾渣通過漏斗淋洗入三