1、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測,溫州醫(yī)科大學(xué)檢驗醫(yī)學(xué)院溫州醫(yī)科大學(xué)附屬一醫(yī)醫(yī)學(xué)檢驗中心,謝海嘯,上 課 內(nèi) 容（P266-279）,骨髓細(xì)胞學(xué)檢測的臨床應(yīng)用骨髓細(xì)胞學(xué)檢測血細(xì)胞的生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點血細(xì)胞化學(xué)染色,,疾病肯定性診斷：白血病，惡組，MM，AA,MA，戈謝病，尼曼匹克病等,一、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測的臨床應(yīng)用,洋蔥皮樣細(xì)胞,泡沫樣細(xì)胞,輔助診斷：惡性腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移，NHL，MDS等,骨髓檢查的適應(yīng)證,不明原因外周血細(xì)胞計數(shù)（三系異常），

2、分類異常（出現(xiàn)原始、幼稚細(xì)胞）不明原因的發(fā)燒、肝、脾、淋巴結(jié)腫大骨痛、骨質(zhì)破壞、腎功能異常（蛋白尿）、黃疸、紫癜、血沉明顯加快等血液病的定期復(fù)查和療效觀察,骨髓檢查的禁忌證,嚴(yán)重出血性疾?。ㄑ巡。┥饔?晚期妊娠孕婦慎用,骨髓穿刺,2%利多卡因局麻皮膚，骨膜,1）涂片（肉眼觀察）,涂片是否良好，有無黃色小粒（即骨髓小粒，骨髓特有）,二、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測的方法和內(nèi)容,2）低倍鏡下細(xì)胞分散排列，不堆疊染色良好：細(xì)胞核質(zhì)分

3、明，顆粒清楚，沒有染料沉渣 可見骨髓小粒，有骨髓特有的細(xì)胞（幼紅、幼粒、巨核細(xì)胞、漿細(xì)胞等） 計數(shù)全片巨核細(xì)胞 有無特殊細(xì)胞,3）高倍鏡下估計骨髓有核細(xì)胞增生程度,增 生 極 度 活 躍,增 生 明 顯 活 躍,增 生 活 躍,增 生 減 低,增 生 極 度 減 低,有核細(xì)胞分類計數(shù)：200～ 500個細(xì)胞，按細(xì)胞的不同系列和不同發(fā)育階段分別計數(shù)，計算各階段細(xì)胞所占百分比。觀察細(xì)胞形態(tài)：分類計數(shù)同時觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常

4、，有無異常細(xì)胞、寄生蟲等。,4）油鏡檢查,1）病人的基本信息2）骨髓的取材、涂片、染色情況3）骨髓增生程度、粒紅比值和骨髓各期細(xì)胞結(jié)果4）骨髓象特征的描述5）血象特征6）細(xì)胞化學(xué)染色特征7）診斷意見,5）骨髓象的分析和報告,血細(xì)胞的生成 血細(xì)胞的發(fā)育規(guī)律 各系血細(xì)胞的形態(tài)特點,三、血細(xì)胞的生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點,造血干細(xì)胞 祖細(xì)胞原始細(xì)胞 幼稚細(xì)胞 成熟細(xì)胞,1.血

5、 細(xì) 胞 的 生 成,,,早幼C 中幼C 晚幼C,,,,,,骨髓： 是人體最大的造血器官，骨髓細(xì)胞主要是發(fā)育過程中的血細(xì)胞。,多能造血干細(xì)胞有高度自我更新的能力，有多向分化的能力，存在于骨髓，臍帶血,,紅系,粒系,單核,嗜酸,嗜堿,巨核,淋巴,漿細(xì)胞,胞體大小 大 小胞核 大小 大 小 核仁 有 無

6、染色質(zhì) 細(xì)致 粗糙粒系核形 圓形 橢圓形 腎形 桿狀 分葉胞漿 量 少 多 顏色 藍色 紅色 顆粒 無 有 核漿比例 大 小,,,,,,,2.血 細(xì) 胞 的 發(fā) 育 規(guī) 律,,,,,,,,

7、,粒 細(xì) 胞 系 列原粒 早幼粒 中幼粒 晚幼粒 桿狀核粒 分葉核粒,,,,,,原始細(xì)胞形態(tài)學(xué)共同特點,胞漿嗜堿性胞漿常無顆粒核染色質(zhì)細(xì)致核仁有、清楚高核漿比,紅細(xì)胞系列 粒細(xì)胞系列 淋巴細(xì)胞系列 漿細(xì)胞系列 單核細(xì)胞系列 巨核細(xì)胞系列,3.血細(xì)胞的正常形態(tài)學(xué)特征,正常細(xì)胞形態(tài),正常細(xì)胞形態(tài),紅細(xì)胞系列,胞體、胞核圓形 胞漿有明顯的變化規(guī)律 胞漿中無顆粒,粒細(xì)胞系列,,胞體圓形顆粒和胞核有明顯的變

8、化規(guī)律,淋巴細(xì)胞系列,胞體、胞核小 胞漿量少,漿細(xì)胞系列,胞核圓形、偏位胞漿豐富、深蘭色、 核旁淡染區(qū)、泡沫漿,單核細(xì)胞系列,胞體、胞核較大且不規(guī)則胞漿較豐富、灰蘭色胞核染色質(zhì)疏松,巨核細(xì)胞系列,胞體、胞核巨大且不規(guī)則胞漿量、顆粒極豐富,對我們的要求：知道各系成熟細(xì)胞釋放到外周血，了解成熟細(xì)胞和幼稚細(xì)胞的區(qū)別,是一種以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合運用化學(xué)反應(yīng)的原理，對血細(xì)胞內(nèi)的各種化學(xué)物質(zhì)，作定性、定位、半定量分析的方法,四、血

9、細(xì) 胞 化 學(xué) 染 色,血細(xì)胞化學(xué)染色的定義,輔助疾病的診斷和細(xì)胞系列的判斷不同細(xì)胞系列，其所含的化學(xué)物質(zhì)各有不同血細(xì)胞在病理情況下，其化學(xué)物質(zhì)成分及含 量會發(fā)生改變,血細(xì)胞化學(xué)染色的作用,過氧化物酶染色（POX）中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（NAP）酯酶染色鐵染色,血細(xì)胞化學(xué)染色的方法,粒細(xì)胞及部分的單核細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的顆粒含有過氧化酶，此染色用于急性白血病類型的鑒別診斷(急粒和急淋) 急粒——強陽性 急單——弱陽性 急淋

10、——陰性,1.過氧化物酶（POX）染色,,NAP主要存在于成熟階段的中性粒細(xì)胞，報告形式為陽性率及積分鑒別診斷1、急性化膿菌感染↑↑，病毒干擾～2、慢?！?，類白↑↑3、急?！?，急淋↑，急單～ 4、AA ↑ ，PNH ↓ 5、惡組↓ ，其它血液病大多↑,2.中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)染色,,,輔助鑒別急性白血病細(xì)胞類型（急粒和急單）氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（AS-D NCE）:特異性酯酶（SE）

11、急粒呈陽性（M3—強陽性），急單陰性α-醋酸萘酚酯酶（α-NAE）：非特異性酯酶(NSE) 急單呈陽性，加NaF抑制 急粒呈弱陽性，加NaF不抑制 急淋呈陰性,3. 酯 酶 染 色,M5,,氟化鈉抑制,氟化鈉不抑制,骨髓鐵分為細(xì)胞外鐵、內(nèi)鐵減少：缺鐵性貧血增加：鐵粒幼紅細(xì)胞性貧血,4. 鐵 染 色,細(xì)胞外鐵染色,細(xì)胞內(nèi)鐵染色,環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞,急性白血病常見細(xì)胞化學(xué)染色,急淋 急

12、粒 急單POX - +++ - ~ + NAP ↑↑ ↓↓ ? ~↓SE - ++~+++ - ~ +NSE - - ~ ++ ++ ~ +++NSE+NaF - - ~ ++ NaF