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文檔簡介
1、三丁基錫(TBT)是有機錫化合物中的重要種類,在所有的有機錫種類中,毒性最大,應用最廣,也是迄今為止大量進入海水環(huán)境的最毒的化學品之一。其主要的應用是船舶防污涂料,農(nóng)用殺蟲劑和PVC穩(wěn)定劑等。廣泛的應用范圍使得其進入水環(huán)境的可能性非常大,已有學者(楊瑞強,2006)在太湖梅梁灣和東太湖水域的魚體中檢測到了比較高的三丁基錫殘留,并在多個水域的水體里面檢測到了相當水平的三丁基錫的存在。這就提示我們要對三丁基錫的毒性特征具有足夠的了解,對其對
2、水生生物資源、水產(chǎn)品安全以及對人的生命安全的危險具有清醒的認識。目前已有研究表明三丁基錫(TBT)具備的毒性特征有可以使水生軟體動物發(fā)生性畸變;可以對水生軟體動物和魚類基因組DNA造成損傷;也可以對水生軟體動物和魚類機體抗氧化防御系統(tǒng)造成傷害;甚至會使得一些哺乳動物的一些細胞類型發(fā)生凋亡等。在這些細胞類型中對生殖細胞凋亡、尤其是對重要水生生物資源的細胞凋亡研究還未見報道。
本試驗以奧利亞羅非魚為研究對象,在注射染毒和接觸染
3、毒兩種染毒方式下,分別采用原位末端標記法(TUNEL)檢測研究了三丁基錫(TBT)對魚類精巢細胞凋亡的影響;采用試劑盒法對魚類肝臟和精巢抗氧化防御系統(tǒng)的影響,以及對精巢細胞Ca2+-ATP酶活性的影響。試驗結果表明,TBT可以引起雄性奧利亞羅非魚精巢細胞凋亡,在注射劑量分別為0,1、3、5、10μg.kg-1體重范圍內,染毒時間為24h和48h時,細胞凋亡率先升高后降低,在5μg.kg-1體重時達到最高,在0~5μg.kg-1體重范圍內
4、具有較好的劑量效應關系。染毒時間為96h時,細胞凋亡率先降低后升高,在5μg.kg-1體重時達最低。在相同的染毒時間下,細胞凋亡率隨著注射劑量的增加先升高后降低。在接觸染毒的情況下,在相同染毒時間的情況下,在試驗濃度范圍內(0、1、3、5、10μg.L-1),隨著染毒濃度的升高奧利亞羅非魚精巢細胞凋亡率逐漸升高。且具有較好的劑量效應關系。在注射染毒和接觸染毒條件下,在相同的試驗劑量/濃度范圍內,在相同的染毒時間內,奧利亞羅非魚精巢細胞C
5、a2+-ATP酶活性均隨著注射劑量的升高而升高。在相同的注射劑量下,隨著染毒時間的增加,Ca2+-ATP酶活性逐漸降低。注射染毒TBT條件下,奧利亞羅非魚精巢細胞凋亡凋亡率與精巢細胞Ca2+-ATP酶活性在24h和48h具有協(xié)同性,在染毒時間為96h時,在0~5μg.kg-1體重時協(xié)同,然后相背離??赡鼙砻?奧利亞羅非魚精巢細胞精巢細胞凋亡與Ca2+-ATP酶活性的變化有的關系,Ca2+-ATP酶活性升高,細胞凋亡率增加,這可能與細胞凋
6、亡過程中伴隨的胞漿內Ca2+濃度升高有關。在96h表現(xiàn)的兩者相背離的情況可能是因為在高劑量長時間的TBT刺激下,Ca2+-ATP酶活性進一步升高,Ca2+濃度進一步升高,但此時,執(zhí)行細胞凋亡的相關基因或蛋白已經(jīng)破壞,機體無法啟動凋亡清除機制,細胞凋亡率反而下降。另外,TBT可以對機體的抗氧化防御系統(tǒng)產(chǎn)生作用。由于已有研究表明抗氧化防御系統(tǒng)與細胞凋亡之間存在著一定的的關系。為了更好的解釋一些試驗現(xiàn)象,課題組研究了在注射染毒條件下,奧利亞羅
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