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文檔簡介
1、隨著現(xiàn)代社會經濟的高速發(fā)展,近海污染日趨嚴重,有害赤潮發(fā)生頻率增加、規(guī)模擴大,已經給全球各地的漁業(yè)資源、生態(tài)環(huán)境及水產養(yǎng)殖均造成嚴重的損失,甚至危害到人類的健康。赤潮已成為全球性的海洋公害。傳統(tǒng)的控制赤潮的方法由于固有缺陷,已經無法滿足人們的要求。水生系統(tǒng)大型植物對微藻的化感抑制作用的發(fā)現(xiàn)以及當前納米材料抑制微生物產品的開發(fā)為人們提供了控制赤潮的新思路。本文通過研究8種大型海藻及6種納米級金屬氧化物顆粒對中肋骨條藻的生長抑制效應,篩選出
2、抑藻效果好的大型海藻或納米材料,分離提取大型海藻中的抑藻化感物質并鑒定其結構,初步探尋化感物質及納米材料的抑藻機理,為利用大型海藻高效化感物質以及新型納米材料進行赤潮的防治提供科學依據(jù)。 本研究以微藻生長抑制率(inhibition rate,IR)和半效應濃度(50%effectiveconcentration,EC50)為評價指標比較了8種大型海藻:孔石莼(Ulva pertusa)、長滸苔(Enteromorpha cl
3、athrata)、紫菜(Porphyra tenera)、蜈蚣藻(Grateloupia filicina)、海帶(Laminaria japonica)、裙帶菜(Undaria pinnatifida)、羊棲菜(Sargassum fusiforme)、馬尾藻(Sargassum pathen)對中肋骨條藻的抑制作用,并采用液液萃取和硅膠柱層析方法分離長滸苔中的化感物質,用色譜-質譜聯(lián)用技術鑒定其主要成分,揭示大型海藻長滸苔抑藻的化學
4、基礎。選擇乙酸乙酯萃取相B,通過考查其對藻細胞的超氧化物歧化酶(SOD)活力,丙二醛(MDA)含量和離子選擇透過性以及葉綠素a含量的影響,探討其抑藻機理。 研究結果表明8種大型海藻干粉末的水浸體液的抑藻120h的半效應濃度值(EC(50,120h))依次為:紫菜0.6g/L,海帶0.9g/L,長滸苔1.0g/L,孔石莼1.Og/L,羊棲菜1.1g/L,馬尾藻1.4g/L,蜈蚣藻1.5g/L,裙帶菜4.7g/L。結合7d的微藻生
5、長抑制率結果,具有最強化感抑制作用的是長滸苔和孔石莼兩種大型海藻。其中長滸苔的化感抑制作用是首次報道。對長滸苔的干粉末中的抑藻化感物質提取分離,四種溶劑(石油醚,乙酸乙酯,蒸餾水和正丁醇)液液萃取組分抑藻實驗表明乙酸乙酯相(B)的抑藻效果最好,EC50值僅為0.08mg/L。硅膠柱層析進一步分離產物的抑藻結果表明環(huán)己烷洗脫相(1A)和環(huán)己烷/丙酮洗脫相(1B)具有抑藻效果,72h的EC50值分別3.81mg/L和4.09mg/L。氣相色
6、譜一質譜聯(lián)用檢測結果顯示長滸苔乙酸乙酯相提取物中含有16種物質等。化感物質的可能替代物實驗結果顯示供試的四種藥品中僅肉豆蔻酸具有較強的抑藻效果,72h的EC50值(EC(50,72h))為8.43mg/L。添加了乙酸乙酯相(B)的藻細胞培養(yǎng)液在處理濃度0.1mg/L時即開始顯示出超氧化物歧化酶(SOD)活力下降,丙二醛(MDA)含量有應激性升高,細胞K+含量滲出增加,葉綠素a降解。 長滸苔可顯著抑制赤潮中肋骨條藻的生長,從長滸
7、苔中用乙酸乙酯提取的化感組分B是當前報道的抑藻作用最強的化感組分。十四酸是其中可能的一種抑藻化感物質;長滸苔的抑藻機理可能通過降低藻類抗氧化物酶活性,導致其體內累積過量活性氧,從而引發(fā)一系列藻細胞結構破壞,正常的代謝功能逐漸喪失,最終引起藻細胞死亡。長滸苔提取的化感組分B含有高效的抑藻化感物質。 此外我們還初步探索了6種納米金屬氧化物二氧化鈦(銳鈦礦相HR3和金紅石相DJ3),二氧化硅(球狀粒子型SS1和多微孔粒子型SP1)三
8、氧化二鋁(α相MC2A和γ相MC2R)對中肋骨條藻的生長的抑制效應。以微藻生長抑制率(inhibition rate,IR)和半效應濃度(50% effective concentration,EC50)和藻細胞的葉綠素a含量為評價指標,篩選具有高抑藻能力的納米材料。結果表明僅HR3,DJ3和MC2R具有一定抑藻效果,144h半效應濃度值(EC(50,144h))依次為:HR3 250.7mg/L,DJ3 757.6mg/L,MC2R
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