微生物生物技術(shù)及應(yīng)用_第1頁
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文檔簡介

1、微生物生物技術(shù)及應(yīng)用張 松 華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,,教材及參考書:(1)黃秀梨、辛明秀.微生物學(xué),高等教育出版社,2009 (2)張 松.微生物學(xué)多媒體教學(xué)軟件(網(wǎng)絡(luò)版).北京:高等教育出版社.2019.(3)黃文芳,張 松.微生物學(xué)實驗指導(dǎo).廣州:暨南大學(xué)出版社.2019.(4)黃秀梨、辛明秀.微生物學(xué)實驗指導(dǎo).高等教育出版社,2019 .(5)張 松.食用菌學(xué).廣州:廣州:華南理工大學(xué)出版社,200

2、0。(6)周德慶,微生物學(xué)教程,高等教育出版社,2019(7)沈萍,微生物學(xué),高等教育出版社,2019(8)Lansing M. Prescott, Microbiology 5th ed 影印版,高等教育出版社,2000(9)Madigan M T et al.Brock’Biology of Microorganism,10/e,Prentice Hall,2019,微生物與我們的生活,,微生物類型1、原核微生物:細(xì)菌、

3、放線菌、衣原體2、真核微生物:酵母菌、霉菌3、非細(xì)胞型微生物:病毒、亞病毒因子病毒,古代釀酒,酵母菌兼性厭氧微生物(有氧、無氧)乙醇發(fā)酵: 酵母菌C6H12O6--------- 2CH3CH2OH+2CO2+2ATP果酒,果醋:醋酸菌:好氧(O2),毛霉形態(tài):菌絲無隔膜孢囊孢子接合孢子,應(yīng)用:釀造腐乳1、前發(fā)酵:毛霉的生長,15-20℃,菌膜形成;

4、 毛霉(蛋白酶等) 蛋白質(zhì)------------------氨基酸2、后發(fā)酵:風(fēng)味形成。,乳酸發(fā)酵泡菜、酸奶,家居環(huán)境(菜板、抹布等);,人體體表及體內(nèi)(口腔、皮膚、腸道等) :,微生物無處不在,我們無時不生活在“微生物的海洋”中。,土壤;,紙幣(成都制造出抗菌人民幣,2019);,空氣(每個噴嚏的飛沫含4500-150000個細(xì)菌,重感冒患者為8500萬);,微生物既是人類的敵人,更是人類的朋友!,時時

5、刻刻與微生物“共舞” 是 禍?是 福?,物質(zhì)循環(huán);,微生物是人類的朋友!,體內(nèi)的正常菌群是人及動物健康的基本保證;,有用物質(zhì)的生產(chǎn);,基因工程為代表的現(xiàn)代生物技術(shù);,少數(shù)微生物也是人類的敵人!,天花;鼠疫;艾滋病;瘋牛病;埃博拉病毒;SARS;禽流感;,“在近代科學(xué)中,對人類福利最大的一門科學(xué),要算是微生物學(xué)了?!?微生物生物技術(shù),微生物學(xué)基本

6、操作技術(shù),基本操作技術(shù)1:培養(yǎng)基的制備,培養(yǎng)基為人工培養(yǎng)微生物而制備、提供微生物以合適營養(yǎng)條件的基質(zhì)。,培養(yǎng)基成分 微生物的生長需要有碳源、氮源、無機鹽、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)。 碳源為微生物營養(yǎng)提供所需的碳架和能源來源,主要有葡萄糖、淀粉、CO2等。 氮源為微生物提供所需氮素的營養(yǎng)來源,主要有蛋白胨、硝酸鹽、銨鹽、分子態(tài)氮等。 無機鹽為微生物提供除碳、氮源以外的各種元素,主要有KH2PO4 、MgSO4、

7、NaCl、CaCl2等。 生長因子為微生物生長提供不可缺少的微量有機物質(zhì),主要有維生素等。,配制培養(yǎng)基的原則1.根據(jù)不同微生物類型配制不同的培養(yǎng)基。 培養(yǎng)細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌的培養(yǎng)基是不同的。細(xì)菌 采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 牛肉膏 3 g; 蛋白胨 5 g; 水 1 000 mL; pH 7.2~7.4 放線菌 采用高氏1號培養(yǎng)基 可溶性淀粉 20 g; KNO3 1 g; K2HPO4 1 g; MgS

8、O4·7H2O 0.5 g; NaCl 1 g; FeSO4·H2O 0.01 g; 水 1 000 mL; pH 7.2~7.4 酵母和霉菌 采用察氏培養(yǎng)基蔗糖 30 g; NaNO3 3 g; KCl 0.5 g; K2HPO4 1 g; FeSO4·H2O 0.01 g; MgSO4·7H2O 0.5 g; 水 1 000 mL; pH 6.0培養(yǎng)不同營養(yǎng)類型的微生物也各有不同的培養(yǎng)

9、基。,2.注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比。 3.控制培養(yǎng)基的條件(pH、O2和CO2、螯合劑等)培養(yǎng)基。 pH 控制在一定的范圍之內(nèi),通常在培養(yǎng)基里加一些緩沖劑,如K2HPO4、 KH2PO4等。 4.選擇培養(yǎng)材料注意經(jīng)濟節(jié)約,價廉物美。,培養(yǎng)基的類型和應(yīng)用 按培養(yǎng)基的成分① 合成培養(yǎng)基: 順序加入準(zhǔn)確稱量的高純化學(xué)試劑與蒸餾水配制而成,組成成分精確,重復(fù)性強。 ② 天然培養(yǎng)基: 采用動植物組織或微生物細(xì)胞或它們的提取物或粗

10、消化產(chǎn)物配制成的,其所用物質(zhì)的成分不穩(wěn)定,因而營養(yǎng)成分難控制,重復(fù)性差。 ③ 半合成培養(yǎng)基: 用純化學(xué)試劑和天然物質(zhì)配成。,按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)① 固體培養(yǎng)基: 加了凝固劑后制成的呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。常見的凝固劑是瓊脂(約2%)或明膠(5%~12%)。 ② 液體培養(yǎng)基: 呈液態(tài)的培養(yǎng)基。 ③ 半固體培養(yǎng)基: 液體培養(yǎng)基中加0.5%或更低濃度的瓊脂就制成柔軟的漿糊狀半固體培養(yǎng)基。,按培養(yǎng)基的用途分為 ① 加富培養(yǎng)基: 在普通培養(yǎng)基

11、里加進(jìn)血、血清、動物(或植物)組織液或其他營養(yǎng)物質(zhì)(或生長因子)的一類營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基, 用以培養(yǎng)某種或某類營養(yǎng)要求苛刻的異養(yǎng)微生物。 ② 選擇培養(yǎng)基: 根據(jù)某種或某一類群微生物的特殊營養(yǎng)需要或?qū)δ撤N化合物的敏感性不同而設(shè)計出來的培養(yǎng)基,可以將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來。 ③ 鑒別培養(yǎng)基: 在培養(yǎng)基中添加某種營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)(指示劑或抑制劑)而將目的或?qū)ο笪⑸锏木渑c同一平板上的其他微生物菌落區(qū)別開來的培養(yǎng)基。

12、如伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基) 可鑒別腸道桿菌中的某些細(xì)菌。大腸桿菌在此培養(yǎng)基上形成有綠色金屬閃光的深紫色菌落。其培養(yǎng)基成分為: 蛋白胨 10 g,伊紅Y 0.4 g,乳糖 5 g,美藍(lán) 0.065 g,蔗糖 5 g,K2HPO4 2 g,水 1 000 mL,pH 7.2,常用培養(yǎng)基配方1、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基:牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,瓊脂20g, 水1 000mL,pH7.0~7.2。常用于培養(yǎng)細(xì)菌。2、高氏

13、1號培養(yǎng)基:可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaC1 0.5g, K2HPO4·3H2O 0.5g,MgSO4·7H2O 0.5g,F(xiàn)eSO4·7H2O 0.01g,瓊脂20g,水1 000mL,pH7.2~7.4。常用于培養(yǎng)放線菌。3、察氏培養(yǎng)基:蔗糖30g,NaNO3 2g,K2HPO4 1g,KC1 0.5gMgSO4·7H2O 0.5g,F(xiàn)eSO4·7H2O 0

14、.01g,瓊脂 20g,水1 000mL pH6.7。常用于培養(yǎng)霉菌。4、馬鈴薯培養(yǎng)基(PDA) :馬鈴薯200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,瓊脂20g,水1 000mL, pH 6.5(或自然)。常用于培養(yǎng)酵母菌、霉菌、食藥用菌。,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制作流程: 計算用量--稱量--溶解--調(diào)pH--過濾--分裝三角瓶--包扎--滅菌( 121 0C, 30min)--倒平板。,馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)制作流程: 馬鈴

15、薯去皮、切?!?-10分鐘后取汁使用→加藥品溶化→瓊脂溶化→混合定容→調(diào)節(jié)pH值→分裝→滅菌→倒平板。,高壓蒸汽鍋法是實驗室及生產(chǎn)中最常用的滅菌方法。使用高壓鍋時,要注意完全排除鍋內(nèi)的冷空氣,使之充滿飽和蒸汽,否則會因蒸汽中混有空氣而比相應(yīng)純蒸汽的溫度降低,影響滅菌效果。,高壓蒸汽鍋的使用,基本操作技術(shù)2:無菌操作,無菌操作 為了防止其他微生物進(jìn)入機體或物體造成污染,在制備培養(yǎng)基、使用接種箱及無菌室、接種、分離和培養(yǎng)微生物時,

16、都要進(jìn)行無菌操作。 無菌操作技術(shù)主要有:培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌(0.1MPa,121℃,15-30min);無菌室、接種箱、超凈工作臺等用紫外線滅菌(照射30min);接種環(huán)、接種針用火焰灼燒滅菌;接種需在酒精燈火焰旁的無菌區(qū)進(jìn)行,接種過程中的無菌操作。,高溫滅菌方法,1、干熱滅菌,(1)焚燒滅菌法(incineration):用火焰焚燒。 (2)烘箱熱空氣法:常用烘箱160℃處理2小時以上。,2、濕熱滅菌,(1)水煮沸法:水煮

17、沸100℃,15分鐘以上。 (2)高壓蒸汽鍋法(autoclaving):高壓鍋(0.1013MPa或1.05㎏/cm2 或15磅/英寸2 )121℃處理15~30分鐘 。 (3)間歇滅菌法(tyndallization) : 100℃處理15-30分鐘,再置于28~37℃下,如此反復(fù)三次。 (4)巴斯德消毒法(pasteurization):71.6℃處理15分鐘或62.9℃處理30分鐘。,接種類型:斜面菌種;液體接種;穿刺接種

18、,基本操作技術(shù)3: 微生物分離培養(yǎng)技術(shù),微生物分離純化在自然界,各種微生物常?;焐谝黄?。為了利用某種微生物,必須將這種微生物從混雜群體中分離出來,在適合的營養(yǎng)和生長條件下培養(yǎng),產(chǎn)生大量的個體。,微生物的觀察微生物個體微小,其個體形態(tài)一般需用顯微鏡才能看到。單個微生物細(xì)胞在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長繁殖,會形成一個肉眼可見的、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體,稱為菌落(colony)。當(dāng)固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片時,則稱為菌

19、苔(lawn)。不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長形成的菌落或菌苔在大小、形狀、光澤度、顏色、質(zhì)地、硬度、邊緣情況、透明度等方面具有不同的特征,是微生物分類鑒定的重要依據(jù)。如細(xì)菌菌落具有濕潤、較光滑、較透明、較粘稠、易挑取、質(zhì)地均勻和顏色一致等特征,霉菌、放線菌等微生物的菌落也具有各自相應(yīng)的特征。在生產(chǎn)中,我們往往只需要某一種微生物,可采用涂布平板、平板劃線等方法獲得這種微生物的菌落。,用固體培養(yǎng)基分離方法:1. 涂布平板法2. 平板

20、劃線法3. 稀釋倒平板法,分離純化操作步驟:1.用涂布平板法從土壤中分離細(xì)菌:制土壤菌懸液——涂布分離——倒置培養(yǎng)2.用平板劃線法從腐爛水果中分離酵母和霉菌,細(xì)菌菌落的分離要使用平板,而不采用斜面。涂布平板分離法和平板劃線分離法為什么能分離出細(xì)菌的單菌落?如果進(jìn)行分區(qū)平行劃線,細(xì)菌單個菌落最可能出現(xiàn)在哪一個區(qū)?如果進(jìn)行連續(xù)畫線,細(xì)菌單個菌落最可能出現(xiàn)在什么區(qū)域?在平板劃線分離操作中,每次劃平行線前都必須燒掉接種環(huán)的剩余物。

21、平板倒置培養(yǎng)。,微生物分離培養(yǎng)技術(shù)活動拓展學(xué)習(xí)了細(xì)菌菌落的分離和培養(yǎng)后,請設(shè)計實驗方案,從自然環(huán)境分離并培養(yǎng)與人類生活關(guān)系密切的其它微生物(如酵母菌、霉菌等)菌落。(可根據(jù)生活環(huán)境尋找特定的微生物。酵母菌喜歡生活在含糖高的環(huán)境,霉菌多生長在偏酸的環(huán)境,如水果、蔬菜的表面及其栽培土壤中。 ),基本操作技術(shù)4:培養(yǎng)基對微生物的選擇作用,培養(yǎng)基對微生物的選擇作用 如果我們所需的微生物在樣品中的數(shù)量很少,直接采用涂布平

22、板法、平板劃線法就很難分離出來。為此,我們可以根據(jù)不同的微生物對營養(yǎng)物質(zhì)(碳源、氮源、生長因子等)、理化因素的不同要求,設(shè)計出不同的培養(yǎng)基以抑制不需要的微生物的生長,促進(jìn)所需微生物的生長。例如,要從土壤中分離獲得自生固氮菌時,常采用無氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),可以抑制其他非固氮微生物的生長,從而將自生固氮菌分離出來。,利用培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)所需的微生物 在自然界混雜的微生物群體中,如果所需的某種微生物只占少數(shù),但其生長要求是已知的,

23、那就可制作一種特別適合于這種微生物生長的培養(yǎng)基,從而把它選擇培養(yǎng)出來。,選擇培養(yǎng)方法主要有:(1)采用加富培養(yǎng)基進(jìn)行選擇。加富培養(yǎng)基就是在培養(yǎng)基中加入所需微生物特別需要的某一營養(yǎng)物質(zhì),使它們的數(shù)量增加,以達(dá)到選擇目的而設(shè)計的培養(yǎng)基。自然界中數(shù)量較少的微生物采用這種方法,可使該微生物大大增殖,在數(shù)量上超過原有占優(yōu)勢的微生物,以達(dá)到加富培養(yǎng)的目的。用于加富的營養(yǎng)物質(zhì)通常是所需微生物專門需要的碳源或氮源。例如,篩選纖維素分解菌可用纖維素,加

24、富酵母菌可用較濃的糖液。,(2)用化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行選擇。不同的微生物對某種化學(xué)物質(zhì)或者理化因素的反應(yīng)不同,依此設(shè)計培養(yǎng)基并經(jīng)培養(yǎng)后,所需微生物可大大增殖,使之在數(shù)量上占優(yōu)勢,而其他微生物的生長受到抑制,從而達(dá)到選擇培養(yǎng)的目的。 化學(xué)物質(zhì)常有染料( 結(jié)晶紫等)、 抗生素等,理化因素常有溫度、氧氣、pH值等。例如,分離某種抗生素抗性菌株,可在加有抗生素的培養(yǎng)基上分離。,土壤是分離微生物最好的菌源材料 土壤是微生物生活最

25、適宜的環(huán)境,它具有微生物所需要的一切營養(yǎng)物質(zhì)和微生物進(jìn)行生長繁殖的各種條件,因此,土壤具有“微生物天然培養(yǎng)基”之稱,這里的微生物數(shù)量最大,類型最多,包括有細(xì)菌、放線菌、真菌等類群,是最豐富的“菌種資源庫”。,基本操作技術(shù)5:微生物數(shù)量測定,測定微生物的數(shù)量 一方面,在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)食品、飲料等產(chǎn)品的過程中,要通過測定微生物的數(shù)量來觀察產(chǎn)品是否達(dá)到質(zhì)量要求,如酸奶的生產(chǎn)中,為了檢測產(chǎn)品中乳酸細(xì)菌數(shù)量是否達(dá)到產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn),需

26、進(jìn)行細(xì)菌數(shù)量的測定; 另一方面,在食品、飲用水、生物醫(yī)藥制品的生產(chǎn)中,為防止病原微生物危害,需要檢測微生物數(shù)量以評估其衛(wèi)生程度,如飲用水常通過檢測微生物的數(shù)量來監(jiān)測其水質(zhì)。,,微生物的數(shù)量測定方法:血球計數(shù)板計數(shù)平板菌落計數(shù),圖1 血球計數(shù)板構(gòu)造 圖 2 血球計數(shù)板構(gòu)造 A. 正面圖;B.縱切面圖 放大后的方格網(wǎng),中間大方格為計數(shù)室1. 血球計數(shù)板;2. 蓋玻片;3.計數(shù)室,,血球計

27、數(shù)板計數(shù),,,,,血球計數(shù)板 血球計數(shù)板是一塊特制的載玻片,上面有一個特定的計數(shù)室,其面積為1mm2,高為0.1mm,在1mm2的面積里又被刻劃成25個(或16個)中格,每個中格再劃分成16個(或25個)小格,計數(shù)室都是由400個小格組成。 其血球計數(shù)板法的計數(shù)方法為:將稀釋的樣品滴在血球計數(shù)板上,在顯微鏡下計算計數(shù)室中的5個中格(一般選4個角和中央的一個中格)的總菌數(shù)(A),按下面公式求出每毫升樣品所含的菌數(shù)。每毫升樣

28、品所含菌數(shù)=A/5×25(或16)×10 000×稀釋倍數(shù)。 但此法不能區(qū)分死菌與活菌,所得結(jié)果是包括死菌在內(nèi)的總菌數(shù)。,平板菌落計數(shù) 平板菌落計數(shù)法為一種活菌計數(shù)法。方法的原理是將樣品適當(dāng)稀釋接種在平板上,培養(yǎng)后可形成菌落,一個菌落一般來源于一個細(xì)胞,統(tǒng)計菌落數(shù)即可知樣品的活菌數(shù)。 平板菌落計數(shù)法能測出樣品中的活菌數(shù),現(xiàn)仍是生產(chǎn)上常用的一種測定菌數(shù)的有效方法,廣泛應(yīng)用于微生物數(shù)量的

29、檢測。但該法較為耗時,需要培養(yǎng)一段時間才能取得結(jié)果。,比較血球計數(shù)板法和平板菌落計數(shù)法的優(yōu)缺點。說明用血球計數(shù)板法計數(shù)時造成誤差與哪些因素有關(guān)?,微生物數(shù)量測定活動拓展 學(xué)習(xí)了計數(shù)土壤中細(xì)菌數(shù)量的方法,請嘗試設(shè)計實驗方案,測定其他環(huán)境中微生物的數(shù)量,如自來水、池塘水、空氣、酸奶、干酵母粉等。,微生物生物技術(shù)的應(yīng)用,微生物技術(shù)在工業(yè)上的應(yīng)用,微生物技術(shù)在醫(yī)藥上的應(yīng)用,微生物與人類健康 生物制品(菌苗、疫苗等

30、),微生物代謝產(chǎn)物(抗生素、維生素、酶等),由遺傳工程菌生產(chǎn)的各種藥物如胰島素、干擾素、白細(xì)胞介素,微生物生物轉(zhuǎn)化形成的甾體激素類藥物。,微生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用,食藥用真菌 微生物肥料(細(xì)菌肥料、5406抗生菌肥料、復(fù)合微生物肥料、菌根菌肥等)微生物農(nóng)藥(細(xì)菌殺蟲劑、真菌殺蟲劑、病毒殺蟲劑、農(nóng)用抗生素等)微生物飼料(單細(xì)胞蛋白和菌體蛋白飼料、秸稈飼料、藻類飼料、微生物飼料添

31、加劑),,,食藥用真菌,杏鮑菇,白靈菇,秀珍菇,鮑魚菇,,杏鮑菇,金針菇,平菇,茶樹菇,尖頂羊肚菌,松 茸,猴頭菇,毛木耳,靈 芝,蟲草,,蛹蟲草,云 芝,香菇,雙孢蘑菇,草菇,竹蓀,大禿馬勃,印度塊菌,微生物肥料是將某些有益微生物經(jīng)大量人工培養(yǎng)制成的生物肥料,又稱菌肥、菌劑、接種劑。,根瘤,棉鈴蟲幼蟲的環(huán)節(jié)處被核型多角體病毒感染.,微生物農(nóng)藥,微生物殺蟲劑(蘇云金芽孢桿菌)微生物殺菌劑微生物除草劑微生物殺鼠劑微生物植

32、物生長調(diào)節(jié)劑,微生物農(nóng)藥,微生物在環(huán)境保護(hù)中的作用,微生物對農(nóng)藥的降解微生物對有毒元素的轉(zhuǎn)化微生物降解生活污水、工業(yè)污水和生活垃圾等 。微生物對合成聚合物的降解微生物生態(tài)環(huán)境保護(hù)劑利用微生物生產(chǎn)易降解的醫(yī)用塑料、快餐盒;,廢水的微生物處理,微生物與污水處理 污水處理的方法有物理法、化學(xué)法和生物法。各種方法都有其特點,可以相互配合、相互補充。目前應(yīng)用最廣是生物學(xué)方法,其優(yōu)點是效率高、費用低、簡單方便。,好氧生物處理

33、 微生物在有氧條件下,吸附環(huán)境中的有機物,并將有機物氧化分解成無機物,使污水得到凈化,同時合成細(xì)胞物質(zhì)。微生物在污水凈化過程,以活性污泥和生物膜的主要成分等形式存在?;钚晕勰喾ǎ╝ctivated sludge process)又稱曝氣法。是利用含有好氧微生物的活性污泥 ,在通氣條件下,使污水凈化的生物方法。該法已成為處理有機廢水的最主要的方法。 在污水處理過程中,活性污泥具有很強的吸附、氧化和分解有機物的能力。在靜

34、止?fàn)顟B(tài)時,又具有良好的沉降性能。它是一種特殊的、復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng),在多種酶的作用下進(jìn)行著復(fù)雜的生化反應(yīng)?;钚晕勰嘀械奈⑸镏饕羌?xì)菌,占微生物總數(shù)的90%~95%。,曝氣生物濾池法,占地面積小,基建投資省,出水水質(zhì)高的特點,厭氧生物處理 厭氧生物處理是在缺氧條件下,利用厭氧性微生物(包括兼性厭氧微生物)分解污水中有機物污染物的方法。又稱厭氧消化或厭氧發(fā)酵法。因為發(fā)酵產(chǎn)物產(chǎn)生甲烷,又稱甲烷發(fā)酵。此法既能消除環(huán)境污染,又能開發(fā)生物能

35、源,所以備受人們重視。,微生物對重金屬的轉(zhuǎn)化 自然界存在多種重金屬,例如,汞、砷、鉛、鎘、鉻等,這些重金屬并非生物生活所必需,但達(dá)到一定濃度時,會對生物產(chǎn)生抑制和致死作用。,環(huán)境保護(hù),去除環(huán)境中污染的重金屬回收昂貴或戰(zhàn)略性的稀有金屬,微生物對重金屬的吸附,微生物與石油污染,微生物降解,微生物與環(huán)境監(jiān)測 環(huán)境監(jiān)測 包括環(huán)境分析、物理測定和生物監(jiān)測。所謂生物監(jiān)測就是利用生物對環(huán)境污染所發(fā)生的各種信息作為判斷環(huán)境污染狀況的一

36、種手段。生物長期生活在自然界中,不僅可反映出多種因子污染的綜合效應(yīng),而且也能反映環(huán)境污染的歷史狀況。故生物監(jiān)測可以彌補物理、化學(xué)分析測試的不足,特別是微生物,與環(huán)境關(guān)系極為密切,因此微生物學(xué)方法在環(huán)境監(jiān)測中占有特殊的地位。,糞便污染指示菌 糞便污染指示菌的存在,是水體受過糞便污染的指標(biāo)。根據(jù)對正常人糞便中微生物的分析測定結(jié)果,采用大腸菌群及糞鏈球菌作為指標(biāo)較為合適,其中以前者較為廣用。 大腸菌群(coliform gro

37、up, 簡稱coliform)是指一大群與大腸桿菌相似的好氧及兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌,它們能在48小時內(nèi)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,包括埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬(Citrobacter)、腸桿菌屬(Enterbacter)、克雷伯氏菌屬(Klebsiella)等。檢測水體中總大腸菌群的方法主要是MPN(most probable number)試驗法,即發(fā)酵法和濾膜試驗法。,大腸菌群數(shù)量的表示方法有兩種,其一是"大腸菌群數(shù)&qu

38、ot;,亦稱"大腸菌群指數(shù)",即1L水中含有的大腸菌群數(shù)量。其二是"大腸菌群值",指水樣中可檢出一個大腸菌群數(shù)的最小水樣體積(mL) 。,微生物學(xué)發(fā)展趨勢,研究向縱深和分子水平發(fā)展自1990年代以來,由于“人類基因組計劃”推動,促進(jìn)微生物學(xué)發(fā)展:微生物基因組學(xué)微生物信息學(xué)微生物分子進(jìn)化學(xué)微生物功能基因組學(xué)微生物結(jié)構(gòu)生物學(xué)微生物蛋白組學(xué)后基因組生物學(xué)時代的到來,微生物學(xué)分支學(xué)科特點

39、交叉性強:微生物進(jìn)化工程學(xué)、細(xì)菌冶金學(xué)自覺度高:微生物的基因工程、生化工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)工程、代謝途徑工程和抗體工程等。覆蓋面廣:工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)保和國防等。,在微生物學(xué)發(fā)展中有重要貢獻(xiàn)的人物,呂文虎克(Antony van Leeuwenhoek)(荷蘭,1632-1723),列文虎克利用業(yè)余時間制造過400多架單式顯微鏡和放大鏡,放大率一般為50~200倍,,巴斯德(Louis Pasteur)(法國,1822-18

40、95),,科赫(Robert Koch)(德國,1843-1910)貢獻(xiàn):1、建立微生物學(xué)研究技術(shù)(1)分離和純化細(xì)菌(2)細(xì)菌的固體培養(yǎng)基2、染色技術(shù)3、證實病害的病原菌學(xué)說,弗萊明,Alexander Fleming,英國,1881-1955,李斯特(Lister)(英國) 手術(shù)消毒技術(shù),梅契尼科夫(Metchnikoff)(俄國)免疫學(xué),強身抗菌;微生物防害蟲。,貝哲林克(Beijerinck)(荷

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