1、1.DNAmarker(bp)2.陽(yáng)性對(duì)照3.陰性對(duì)照4～8.樣本PCR產(chǎn)物3討論喹諾酮類藥物有多種因很多結(jié)構(gòu)含氟也稱為氟喹諾酮類藥物其典型的代表藥物為環(huán)丙沙星。早期研究發(fā)現(xiàn)淋球菌氟喹諾酮耐藥性的發(fā)生與細(xì)菌染色體上氟喹諾酮耐藥性決定區(qū)(QRDR)上DNA螺旋酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶IV有關(guān)。直到1994年才由美國(guó)Belland首次揭示了淋球菌環(huán)丙沙星耐藥性與DNA螺旋酶A亞單位(gyrA基因)和拓?fù)洚悩?gòu)酶IVC亞單位(parC基因)之間的相關(guān)性。

2、DNA螺旋酶是一種Ⅱ型的DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶DNA螺旋酶A亞基(GyrA)由gyrA編碼DNA螺旋酶是氟喹諾酮類藥物的主要作用靶位gyrA基因的突變可造成藥物靶位點(diǎn)A亞基發(fā)生改變影響它與藥物結(jié)合的能力使淋球菌表現(xiàn)出對(duì)該類藥物的耐受性也是造成淋球菌產(chǎn)生對(duì)喹諾酮類耐藥的主要原因DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶IVC亞單位(ParC)由parC基因編碼gyrA和parC位點(diǎn)改變是淋球菌重要的耐藥機(jī)制。DNA螺旋酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶是細(xì)菌細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的酶喹諾酮類藥物抗

3、菌作用的原始靶位是細(xì)菌的DNA螺旋酶(即拓?fù)洚悩?gòu)酶II)通過(guò)對(duì)抗其酶活性干擾其DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄破壞其DNA結(jié)構(gòu)使細(xì)菌染色體斷裂從而起到殺菌作用。由于編碼DNA螺旋酶A亞基和DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶IVC亞單位的基因發(fā)生點(diǎn)突變形成編碼另一種氨基酸的密碼子而使所編碼的酶亞基發(fā)生氨基酸取代影響到喹諾酮類藥物與靶位的結(jié)合從而影響細(xì)菌對(duì)環(huán)丙沙星類藥物的敏感性及耐藥性的出現(xiàn)。本試驗(yàn)33株淋球菌對(duì)環(huán)丙沙星全部耐藥證實(shí)了臨汾地區(qū)的淋球菌對(duì)環(huán)丙沙星的耐藥率較高。

4、耐環(huán)丙沙星淋球菌都擴(kuò)增出了gyrA基因QRDR區(qū)域證明QRDR在對(duì)環(huán)丙沙星的耐藥中起重要作用。PCR方法對(duì)淋球菌的耐藥性進(jìn)行快速檢測(cè)克服細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)藥物敏感性需要較長(zhǎng)時(shí)間的弊端對(duì)于促進(jìn)臨床合理應(yīng)用抗生素將具有重要意義。參考文獻(xiàn):[1]王蓓王長(zhǎng)嫻糜祖煌.淋球菌對(duì)大觀霉素與環(huán)丙沙星耐藥性研究[J].中國(guó)公共衛(wèi)生200521(3).[2]謝國(guó)艷.淋病奈瑟球菌耐氟喹諾酮類藥物與gyrA和parC基因突變的相關(guān)性研究[J].中國(guó)感染與化療雜志20

5、066(2):89.[3]BellandRJMorrisonSGIsonCetal.NeisseriagonorrhoeaeacquiresmutationsinanalogousregionsofgyrAandparCinfluoroquinoloneresistantisolates[J].MolMicrobiol99414:371380.[4]DeguchiTYasudaMNakanoMetal.Rapiddetectionofp

6、ointmutationsoftheNeisseriagonorrhoeaegyrAgeneassociatedwithincreasedsusceptibilitiestoquinolones[J].JclinMicrobiol199634:22552258.(收稿日期:20080316)作者簡(jiǎn)介:侯臨平(1972—)女山西臨汾人1997年畢業(yè)于青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院主管檢驗(yàn)師山西醫(yī)科大學(xué)在職研究生。膠體金法在HIV抗體檢測(cè)中的應(yīng)用程慶劉志偉

7、鄭定容(深圳市寶安區(qū)西鄉(xiāng)人民醫(yī)院廣東深圳518102)[摘要]目的:通過(guò)ELISA雙抗原夾心法和膠體金法檢測(cè)HIV抗體的比較評(píng)價(jià)膠體金法檢測(cè)HIV抗體的效果。方法:用膠體金法和ELISA法檢測(cè)HIV抗體。結(jié)果:用ELISA法對(duì)11497份待測(cè)標(biāo)本進(jìn)行初篩有19份標(biāo)本為陽(yáng)性用ELISA雙孔實(shí)驗(yàn)和膠體金法對(duì)這19份陽(yáng)性標(biāo)本復(fù)查其中兩者復(fù)查結(jié)果均為陽(yáng)性5份標(biāo)本未出現(xiàn)ELISA雙孔實(shí)驗(yàn)復(fù)查陽(yáng)性膠體金法復(fù)查陰性的情況。結(jié)論:抗HIV初篩試驗(yàn)陽(yáng)性S

8、CO值≥4.0的標(biāo)本膠體金法代替ELISA雙孔復(fù)查是可行的。[關(guān)鍵詞]HIV抗體檢測(cè)ELISA法膠體金法[中圖分類號(hào)]R512.91[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B[文章編號(hào)]16715098(2008)17220702艾滋病又稱獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)由人類免疫缺陷病毒(HIV)引起的以細(xì)胞免疫缺陷為主要特征的傳染病。HIV抗體的檢測(cè)結(jié)果是HIV感染者和AIDS患者重要的診斷依據(jù)。目前醫(yī)院、疾病預(yù)防控制中心等HIV初篩實(shí)驗(yàn)室普遍采用ELISA

9、法對(duì)可疑人群進(jìn)行篩選。本文將初篩實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性的標(biāo)本分別用ELISA雙孔實(shí)驗(yàn)和膠體金法實(shí)驗(yàn)復(fù)查探討用膠體金法代替ELISA雙孔實(shí)驗(yàn)復(fù)查的可行性。1材料和方法1.1材料1.1.1標(biāo)本來(lái)源2007年1月至2007年12月期間來(lái)我院就診的臨床可疑患者(吸毒者、嫖客、暗娼、賣(mài)血員)和孕產(chǎn)婦。1.1.2檢測(cè)試劑見(jiàn)表1。表1三種檢測(cè)試劑方法試劑品牌批號(hào)有效期生產(chǎn)廠家ELISA麗珠2007011020080109珠海麗珠試劑有限公司ELISA科華20061

10、22820071227上?？迫A生物工程有限公司膠體金法科華2007011520080114上海科華生物工程有限公司1.1.3儀器RT2100C酶標(biāo)儀(深圳市雷杜電子有限公司生產(chǎn))、RT2600C洗板機(jī)(深圳市雷杜電子有限公司生產(chǎn))和微量加樣器均經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)儀器性能穩(wěn)定。1.2方法按常規(guī)方法采取被檢測(cè)者靜脈血3ml～5ml分離血漿或血清用ELISA法進(jìn)行抗HIV初篩試驗(yàn)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。將初篩試驗(yàn)陽(yáng)性的標(biāo)本一方面用同種2207實(shí)用醫(yī)技

11、雜志2008年6月第15卷第17期(旬刊)JPMTJune.2008Vol.15No.17(IssuedEveryTenDays)試劑進(jìn)行ELISA雙孔實(shí)驗(yàn)復(fù)查同時(shí)用膠體金試紙板條復(fù)查(取40μl待測(cè)樣本加在試紙板條的加樣區(qū)再在加樣區(qū)的上方加1滴稀釋液30min內(nèi)觀察并記錄結(jié)果)。對(duì)比這兩種方法復(fù)查的陽(yáng)性率。將初篩試驗(yàn)陽(yáng)性的標(biāo)本送深圳市疾病預(yù)防控制中心確診。2結(jié)果2.1HIV抗體初篩從11497份標(biāo)本中用ELISA法初篩有19份標(biāo)本陽(yáng)性

12、兩組A值與臨界值(cutoff)的比值(SCO)范圍見(jiàn)表2。表211497份標(biāo)本初篩陽(yáng)性結(jié)果SCO值范圍試劑份數(shù)臨界值SCO≥4.0SCO1.0～4.0SCO1.0麗珠69350.23366926科華45620.118～0.230284552合計(jì)11497514114782.2HIV抗體復(fù)查將19份初篩陽(yáng)性的血清標(biāo)本同時(shí)用ELISA雙孔實(shí)驗(yàn)和膠體金法復(fù)查結(jié)果見(jiàn)表3。表319份標(biāo)本初篩與復(fù)篩結(jié)果方法SCO≥4.0SCO1.0～4.0初篩(

13、ELISA)514復(fù)篩(ELISA)50復(fù)篩(膠體金法)50確診(免疫印跡法)503討論AIDS的流行已成為人類社會(huì)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展的災(zāi)難全球活著的HIV感染者已超過(guò)4300萬(wàn)人自1985年我國(guó)發(fā)現(xiàn)首例AIDS患者以來(lái)呈加速流行的趨勢(shì)疫情正在從高危人群向一般人群傳播截止到2007年底我國(guó)估測(cè)存活的HIV感染者超過(guò)100萬(wàn)。因此對(duì)HIV感染者的早期診斷便于控制自身疾病的發(fā)展也可以防止傳染給他人。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)初篩實(shí)驗(yàn)中SCO比值≥4.0的5份標(biāo)本用

14、膠體金法和ELISA法雙孔實(shí)驗(yàn)復(fù)查均為陽(yáng)性送深圳市疾病預(yù)防控制中心確診也是陽(yáng)性?？梢?jiàn)初篩試驗(yàn)陽(yáng)性SCO值≥4.0的標(biāo)本可用膠體金法代替ELISA法雙孔實(shí)驗(yàn)復(fù)查而且膠體金法操作簡(jiǎn)單。此外對(duì)懷疑是HIV感染的急診手術(shù)前患者采用膠體金法快速檢測(cè)HIV抗體可節(jié)省檢測(cè)時(shí)間以贏得寶貴的手術(shù)時(shí)間又可使醫(yī)生在術(shù)中對(duì)可疑患者進(jìn)行針對(duì)性預(yù)防降低醫(yī)源性HIV感染概率。但對(duì)于初篩SCO比值在1.0～4.0之間的標(biāo)本用ELISA雙孔實(shí)驗(yàn)進(jìn)行復(fù)查未出現(xiàn)陽(yáng)性但在第一

15、次初篩試驗(yàn)出現(xiàn)假陽(yáng)性這可能與血清中類風(fēng)濕因子干擾有關(guān)[1]造成ELISA法檢測(cè)HIV抗體試驗(yàn)假陽(yáng)性。而用膠體金法復(fù)查均為陰性。本著為患者負(fù)責(zé)的原則我們?nèi)詫⒊鹾Y實(shí)驗(yàn)中SCO比值在1.0～4.0之間的標(biāo)本送深圳市疾病預(yù)防控制中心確診最后也確診為陰性。根據(jù)衛(wèi)生部2004年“規(guī)范”中規(guī)定HIV抗體檢測(cè)分初篩和復(fù)篩兩個(gè)步驟而確認(rèn)試驗(yàn)(免疫印跡法)操作復(fù)雜、費(fèi)用昂貴為減少受檢人員的經(jīng)濟(jì)支出和實(shí)驗(yàn)人員的工作負(fù)荷要求初篩實(shí)驗(yàn)盡可能的準(zhǔn)確。在臨床工作中經(jīng)

16、典的初篩方法是ELISA法若為陽(yáng)性再用ELISA雙孔實(shí)驗(yàn)復(fù)查而ELISA雙孔復(fù)查操作繁鎖和耗時(shí)長(zhǎng)增加了實(shí)驗(yàn)人員的感染機(jī)會(huì)。因此筆者通過(guò)此實(shí)驗(yàn)認(rèn)為:抗HIV初篩試驗(yàn)陽(yáng)性SCO值≥4.0的標(biāo)本膠體金法代替ELISA雙孔復(fù)查是可行的。參考文獻(xiàn):[1]許春向呂蛛清.衛(wèi)生化學(xué)[M].第3版.人民衛(wèi)生出版社199310.[2]李宏王哲馬麗萍等.HIV抗體初篩與確認(rèn)(WB)測(cè)試結(jié)果對(duì)比分析[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志200313(6):752753.(收

17、稿日期:20080322)實(shí)驗(yàn)室對(duì)急性心肌梗死早期診斷指標(biāo)的應(yīng)用及評(píng)價(jià)常玉梅(解放軍第252醫(yī)院河北保定071000)[摘要]目的:探討實(shí)驗(yàn)室對(duì)急性心肌梗死(AMI)早期診斷指標(biāo)為臨床診斷提供有價(jià)值的依據(jù)。方法:采用血清肌鈣蛋白(cTnI)和肌紅蛋白(Mb)免疫比濁定量測(cè)定法和肌酸激酶同工酶MB(CKMB)活性定量測(cè)定法儀器貝可曼對(duì)53例AMI患者126例不穩(wěn)定性心絞痛患者和22例骨骼肌損傷患者24例健康對(duì)照組檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行綜合比較分析。

18、結(jié)果:AMI組患者血清cTnI值明顯高于健康對(duì)照組差異非常顯著(P0.01)AMI組Mb值顯著高于正常值除骨骼肌損傷組Mb有明顯升高外其他對(duì)照組測(cè)定值均在正常范圍以內(nèi)與AMI組有明顯差異(P0.01)cTnI及Mb的靈敏性明顯高于CKMB。結(jié)論:Mb是早期首選診斷指標(biāo)cTnI有獨(dú)特的特異性和更寬的時(shí)間診斷窗cTnI、Mb以及CKMB三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)在AMI早期診斷起著彼此互補(bǔ)的作用并具有非常重要的臨床意義。[關(guān)鍵詞]急性心肌梗死肌紅蛋白

19、肌鈣蛋白I肌酸激酶同工酶MB[中圖分類號(hào)]R542.22[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B[文章編號(hào)]16715098(2008)17220802急性心肌梗死(AMI)是發(fā)達(dá)國(guó)家最常見(jiàn)的疾病之一發(fā)病率和病死率一直占首位。在我國(guó)發(fā)病人數(shù)也在增加并呈低齡化的趨勢(shì)因此AMI的早期診斷、治療顯得尤為重要。在以往臨床對(duì)心肌缺血性損傷的診斷主要依靠癥狀和心電圖(ECG)大量的臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)約有25%的AMI患者發(fā)病早期可沒(méi)有典型的臨床癥狀[1]ECG診斷敏感度僅為50