1、本研究以有機(jī)磷殺蟲劑毒死蜱作為研究對(duì)象，采用微生物的富集分離法篩選毒死蜱的高效降解細(xì)菌，最終選定XZ-3菌株作為研究對(duì)象，并對(duì)該菌株進(jìn)行了形態(tài)學(xué)、生理生化及16S rDNA鑒定，對(duì)降解微生物的富集分離，環(huán)境條件對(duì)XZ-3菌株降解能力的影響以及該菌降解酶的降解特性等方面進(jìn)行了系統(tǒng)的討論，同時(shí)研究了土壤中蚯蚓對(duì)毒死蜱的降解效果以及毒死蜱對(duì)蚯蚓生理指標(biāo)的影響，主要研究?jī)?nèi)容如下： 1．介紹了毒死蜱的理化性質(zhì)、國(guó)內(nèi)外應(yīng)用概況，以及由于其應(yīng)

2、用所帶來(lái)的環(huán)境污染問(wèn)題；在對(duì)前人工作總結(jié)分析的基礎(chǔ)上，對(duì)毒死蜱在環(huán)境介質(zhì)中的殘留動(dòng)態(tài)、降解代謝、生態(tài)毒理及微生物降解進(jìn)行了綜述；研究了蚯蚓對(duì)土壤中毒死蜱的降解效果；進(jìn)而提出了作者要研究的問(wèn)題。 2．通過(guò)富集培養(yǎng)法和直接培養(yǎng)法篩選出數(shù)株毒死蜱的高效降解菌，同時(shí)研究實(shí)驗(yàn)室篩選出的其他降解菌對(duì)毒死蜱的降解效果，最終獲得三株毒死蜱的高效降解細(xì)菌：XZ-3、XZ-4、QZ-11，三株菌在30℃、pH 7.0，48h內(nèi)對(duì)50mg·L<'-1

3、>的毒死蜱均達(dá)到70％以上，其中以XZ-3對(duì)毒死蜱的降解率最高，經(jīng)過(guò)對(duì)其形態(tài)、生理生化特征及16S rDNA的分析，鑒定為節(jié)桿菌屬(Arthrobacter sp.)，最終選定毒死蜱高效降解細(xì)菌XZ．3作為下一步深入研究的菌株。 3．測(cè)定了不同碳源、pH、溫度及毒死蜱濃度對(duì)細(xì)菌降解能力和生長(zhǎng)量的影響。結(jié)果表明，該菌株24h內(nèi)對(duì)100mg·L<'-1>毒死蜱的降解率高達(dá)86.8％：在外加碳源濃度為0.3％時(shí)降解率最大；細(xì)菌的生長(zhǎng)量

4、隨著外加碳源濃度的升高而增加；pH在偏酸和偏堿性的條件下降解率較大，pH 9.0時(shí)達(dá)到最大，細(xì)菌的生長(zhǎng)量在pH 8.0～10.0偏堿性的條件下較大；在毒死蜱濃度為100mg·L<'-1>時(shí)降解率最大；該菌具有較強(qiáng)的抗藥性，當(dāng)毒死蜱濃度達(dá)到1000mg·L<'-1>時(shí)仍能生長(zhǎng)，細(xì)菌的生長(zhǎng)量在800mg·L<'-1>時(shí)達(dá)到最大，絕對(duì)去除量隨毒死蜱濃度的提高而增加；細(xì)菌的生長(zhǎng)和降解需要適宜的溫度，30℃培養(yǎng)時(shí)，降解率和生長(zhǎng)量最大。 4

5、．從高效降解細(xì)菌XZ-3中提取了降解酶，初步研究了該降解酶的分離條件及對(duì)毒死蜱的降解特性。研究表明，其胞內(nèi)酶對(duì)毒死蜱的降解率高達(dá)50.5％，細(xì)胞碎片對(duì)毒死蜱的降解率為34.9％，胞外酶液對(duì)毒死蜱的降解率為24.2％，經(jīng)幾次非誘導(dǎo)條件下培養(yǎng)提取粗酶液，酶活力損失較少，判斷。XZ-3菌株的毒死蜱降解酶為胞內(nèi)酶且屬于組成酶。以牛血清白蛋白為標(biāo)準(zhǔn)蛋白測(cè)得粗提酶中可溶性蛋白的含量為1.894mg·mL<'-1>；該酶對(duì)毒死蜱的酶促降解最適pH為9

6、.0；最適溫度為30℃，在實(shí)驗(yàn)溫度范圍20～40℃內(nèi)該降解酶均具有較好的降解活性。測(cè)得粗提酶中其米氏常數(shù)Km為0.8633mmol·L<'-1>，Vmax為0.2411μmol·(mg,min)<'-1>；該酶具有較好的熱穩(wěn)定性和pH穩(wěn)定性，對(duì)熱和pH均具有較好的耐受力。 5．設(shè)置兩個(gè)處理，一個(gè)處理是加藥不加蚯蚓(赤子愛勝蚯蚓Eisenia foetida)的CK，另一個(gè)處理是向含農(nóng)藥毒死蜱的土壤中加入蚯蚓，研究土壤中加入蚯蚓對(duì)