1、SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳染色方法的改進目錄目錄摘要..................................................................................................................................................1關鍵詞關鍵詞..........................................

2、......................................................................................................1ABSTRACT.............................................................................................................

3、...........................1KEYWDSKEYWDS............................................................................................................................................1引言引言...................................

4、.................................................................................................................11.1.材料與方法材料與方法............................................................................................

5、......................................21.11.1實驗材料實驗材料................................................................................................................................21.1.11.1.1試劑試劑........................

6、........................................................................................................21.1.21.1.2主要儀器、設備主要儀器、設備...........................................................................................

7、.................21.21.2實驗方法實驗方法................................................................................................................................21.2.11.2.1溶液的配制溶液的配制.......................................

8、.............................................................................21.2.21.2.2制膠制膠................................................................................................................................

9、31.2.31.2.3電泳電泳................................................................................................................................41.2.41.2.4染色染色..............................................................

10、..................................................................51.2.4.11.2.4.1傳統(tǒng)考馬斯亮藍染色法傳統(tǒng)考馬斯亮藍染色法........................................................................................51.2.4.21.2.4.2水浴加熱法水浴加熱法......

11、......................................................................................................51.2.4.31.2.4.3微波爐加熱法微波爐加熱法...........................................................................................

12、.............51.2.51.2.5染色結果觀察染色結果觀察................................................................................................................62.2.結果與分析結果與分析.........................................................

13、.........................................................................62.12.1染色效果與操作的染色效果與操作的簡便性簡便性....................................................................................................62.22.2不同染色方法凝膠成像結

14、果不同染色方法凝膠成像結果................................................................................................71SDSSDS聚丙烯酰胺凝膠電泳染色方法的改進聚丙烯酰胺凝膠電泳染色方法的改進摘要：針對傳統(tǒng)的SDSPAGE染色法耗時長，脫色所用甲醇有毒，乙醇會同時把考馬斯亮藍顏色脫去，使蛋白質條帶不清晰等問題，對常染法進行了改進。本

15、文用水浴或微波加熱處理，同時改變染色液和脫色液成分，用乙醇、蒸餾水代替甲醇，大大縮短了染脫時間，經過比較，認為改進后的水浴法所耗時間大大縮短，染色效果也較好。關鍵詞關鍵詞：SDSPAGE；考馬斯亮藍；水浴法；染色；脫色AModifiedMethodfSDSPAGEStainingAbstract:FthetraditionalSDSPAGEtimeconsumingstainingCoomassiebrilliantbluecolcan

16、betakenoffbytheethanolusedfbleachingmethanolistoxictheproteinbsisnotclearotherissuesanimprovedmethodfthecommondyeingiscoming.Byusingawaterbathmicrowaveheattreatmentatthesametimechangingthecompositionofdyeingbleachingliqu

17、idethanoldistilledwaterinsteadofmethanolreducingthetimeofdyeingoffgreatly.Bycomparisionthatthebathingmethodimprovedreducesthetimesignificantlydyeingbetter.Keywds：SDSPAGE；coomassiebrilliantblue；waterbathing；staining；decol

18、ization引言繼人類基因組計劃之后，蛋白質組學已經成為21世紀生命科學研究的熱點，對蛋白質高分辨率的分離和準確鑒定變得至關重要。目前分離蛋白質的主要方法之一就是采用十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDSPolyacrylaeGelElectrophesisSDSPAGE），它的支持介質是三維網狀的聚丙烯酰胺凝膠。在催化劑的作用下，單體丙烯酰胺（acrylae，Acr）與N，N甲叉雙丙烯酰胺（NNmethylenebisacryl

19、se，交聯劑，Bis）發(fā)生聚合反應，生成凝膠介質。由于不同蛋白質分子大小和所帶電荷的不同，從而對蛋白質進行分離，而分離后的電泳凝膠檢測的染色方法也有多種，其中考馬斯亮藍染色法由于具有很強的特異性、較少的干擾因素、操作簡便等優(yōu)點，而成為蛋白質電泳檢測和定量分析的一種常用方法。常用的考馬斯亮藍有G250，R–350，和R250三種，在游離狀態(tài)下，考馬斯亮藍G250為紅色，其最大吸收值為488nm；而它與蛋白質結合后顏色由紅色變?yōu)榍嗌?9