1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文VEGF對CD34造血干/祖細胞來源的樹突狀細胞分化和功能的影響及其在卵巢癌免疫中的作用和相關(guān)機制姓名：葉楓申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)（婦科腫瘤）指導(dǎo)教師：謝幸20050201浙江大學(xué)2 0 0 5 屆博士學(xué)位論文第二部分 卵巢癌細胞株凍融抗原負載的樹突狀細胞誘導(dǎo)C T L 抗卵巢癌免疫應(yīng)答的體外研究目的在第一部分的基礎(chǔ)上，進一步研究經(jīng)卵巢癌凍融抗原負載的D C 誘導(dǎo)細胞毒性T 淋巴細胞( C T L ) 體外

2、殺傷卵巢癌細胞的細胞毒性效應(yīng)。方法利用M A C S 分離純化臍血C D 3 4 +細胞并在體外誘導(dǎo)分化為D C ，用反復(fù)凍融法從卵巢癌細胞株S K O V 3 中提取的可溶性相關(guān)抗原負載D C 。流式細胞學(xué)檢測負載抗原后D C 表面各種分化相關(guān)抗原的表達，E L I S A 法檢測D C 上清中I L ．1 2 的表達，M L R 測定D C 體外刺激T 細胞增殖的能力，M T T 法檢測抗原負載D C 激活的抗原特異性C T L 對

3、卵巢癌細胞的殺傷作用。結(jié)果 與未經(jīng)抗原負載的D C相比，經(jīng)卵巢癌抗原負載的D C 不僅能更高地表達各種D C 分化相關(guān)抗原C D l a ( 7 3 ．3 5 ％±29 4 ％v s3 4 ．1 ％±2 ，3 5 ％) 、C D 8 3 ( 7 3 ．9 ％±84 6 ％w ．5 4 ．6 8 ％±3 ．2 6 ％) 、C D 8 0 ( 9 1 ．9 5 ％±2 ．4 8 ％Ⅷ5 2

4、．5 3 ％±3 ．1 8 ％) 、H L A - D R ( 7 0 ．0 5 ％±23 5 ％v s4 8 ．7 ％±2 ．0 7 ％) 以及C D 5 4 ( 8 8 ．9 ％±5 ．5 2 ％v s 7 1 ．4 5 ％±2 ．2 9 ％) ．同時具有更強的刺激同種異體T 淋巴細胞增殖和I L ．1 2 分泌的能力( 尸均小于O ．0 5 ) 。此外．卵巢癌細胞S K O V 3

5、 凍融抗原負載D C 激活的C T L 在體外對S K O V 3的殺傷率為7 7 ．3 5 ％，顯著高丁．未經(jīng)抗原負載的D Cc 尸= 0 0 0 0 1 ) 。結(jié)論經(jīng)卵巢癌細胞凍融抗原負載D C 激活的C T L 在體外具有更強的增殖能力和殺傷卵巢癌細胞的作用。【關(guān)鍵詞】樹突狀細胞；卵巢癌；凍融抗原；細胞毒性T 淋巴細胞第三部分 V E G F 及卵巢癌細胞培養(yǎng)上清對C D 3 4 + 干，祖細胞來源的樹突狀細胞分化及功能的影響目的

6、探討V E G F 和卵巢癌細胞上清對臍血C D 3 4 + 干勝日細胞來源的D C 分化和功能的影響。方法E L I S A 法測定3 種卵巢癌細胞株( S K O V 3 ，C a o v 3 ，3 a o ) 培養(yǎng)上清中V E G F 的表達；利用M A C S 分離純化臍血C D 3 4 + 造血干／祖細胞并在體外將其誘導(dǎo)擴增為D C ，觀察V E G F 、卵巢癌細胞上清在培養(yǎng)早期和晚期對D C 分化和功能的影響：用V E G