1、重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)番茄抗病基因Tm-2轉(zhuǎn)化馬鈴薯的研究姓名：張陳明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳國平20090602重慶人學(xué)碩十學(xué)位論文 英文摘要A B S T R A C TT h ep o t a t oi s t h ef o r t h —l a r g e s t c r o pi nt h ew o r l d ，w h i c h i st h em a j o r s o u r c e o

2、 f t h ef o o da n d v e g e t a b l e ，a n di t i so n l ys e c o n dt ow h e a t , c o r na n dr i c ei np r o d u c t i o n ，b u ti t sy i e l d i s h i g h e rt h a n t h e f i r s t t h r e ec r o p s o nu n i t t i

3、 m ep e r u n i ta r e a ．I t h a sav e r yd i s t r i b u t i o n f o ri t s h i g h y i e l d ，r i c hn u t r i t i o n a n ds t r o n g a d a p t a b i l i t y ．S o t h eU n i t e dN a t i o n s f u l l y a f f i r m

4、e dt h ep o t a t op l a y sa m a j o r r o l ei ne n s u r i n g t h ew o r l d f o o ds e c u r i t ya n de r a d i c a t i n gp o v e r t ya n dd e t e r m i n e d2 0 0 8 a s ”I n t e r n a t i o n a l Y e a ro ft h e

5、 P o t a t o ．”V i r u si n f e c t i o nh a sb e e nt h em a i nf a c t o rw h i c hc a u s e st h ed e g r a d a t i o na n ds e r i o u s l ya f f e c t st h ey i e l d a n d q u a l i t y o f p o t a t o e s ．A t p r

6、 e s e n t ，t r a d i t i o n a lb r e e d i n gm e t h o d s C a n n ol o n g e rm e e tt h er e q u i r e m e n to f t h ep r o d u c t i o no fp o t a t o e sa n dC a n n o ts o l v et h ev i r a ld i s e a s ep r o b

7、 l e mf u n d a m e n t a l l yi n t h e l o n g e rt i m e ．I n r e c e n ty e a r s ，h o w e v e r , w i t ht h er a p i dd e v e l o p m e n to fg e n ee n g i n e e r i n ga n dt r a n s g e n i ct e c h n o l o g yt

8、 h a t h a si m p r o v e ds t e a d i l y ，w h i c hh a s d e m o n s t r a t e dg r e a tp o t e n t i a li n i m p r o v i n gt h ev i r u s —r e s i s t a n c eo fp o t a t op l a n t s ，a n d w i l lb e c o m e t h

9、e p r i m a r y m e a n s o f A n t i - v i r u s i np o t a t ob r e e d i n g ．A c c o r d i n gt o t h er e s i s t a n c em e c h a n i s ma n df u n c t i o n o ft o m a t o r e s i s t a n c eg e n eT m ∥．a(chǎn) n dt h

10、ef a c tt I l e 砌- Yg e n ee x p r e s s e di n t h et r a n s g e n i ct o b a c c os u g g e s t e d t h a tt l l e 砌一2 r e s i s t a n c ep r o p e r t yc o m p l e t e l yf u n c t i o n e d w i t h o u ta n yc h a n

11、 g ei nd i f f e r e n tg e n e r ao f t h eS o l a n o i d e a ef a m i l y ．T r a n s g e n i ct o b a c c op l a n t se x p r e s s i n gt o m a t oT m —Zd i s p l a yr e s i s t a n c es p e c i f i c i t y t o T o M

12、 V a n dT M V ．O u rr e s e a r c h i s b a s e do nt h eh i g hh o m o l o g y b e t w e e n t h et o m a t o a n d p o t a t o ．t h e i n t r o d u c t i o no f 砌一2g e n e i n t op o t a t o b yu s i n g g e n e t i ce

13、 n g i n e e r i n gt e c h n i q u ei no r d e rt o i d e n t i f yw h e t h e ro rn o tt h eT m 一2 7g e n ee x p r e s s e d i n t h et r a n s g e n i cp o t a t o C a nd i s p l a yr e s i s t a n c et o t h ec o m m

14、 o n p o t a t ov i r u s ．T h e m a i ne x p e r i m e n t a lr e s u l t s o b t a i n e d a r e a sf o l l o w s ：1 ．B a s e do n t h ep r e v i o u s l y r e p o r t e d t o m a t o r e s i s t a n c eg e n eT m - Y

15、a n d t h es e q u e n c er e p o r t e di n T i g r B l a s t ，I d e s i g n e ds p e c i f i c p r i m e r sa n du t i l i z e d R T - P C Ra n dR A C Et e c h n i q u e st oa m p l i f y t w of r a g m e n t so f t h

16、eT m - ∥．a(chǎn) n di nt h ee n d t h ef u l l —l e n g t hc D N Ao f t h e T m - ∥w a s o b t a i n e d t h r o u g hd i g e s t i o n a n d r e c o m b i n a t i o n ．T h e r e f o r e ．a(chǎn) f t e ra l i g n m e n ti t W a sv e

17、 r i f i e dt h a tt h er e s i s t a n c eg e n eT m 一≯e x i s t e di n t h et o m a t ov a r i e t yK B V , w h i c h a l s of u r t h e rc o n f i r m e d t h a tt h et o m a t ov a r i e t yK B V W a sh i g h l yr e

18、s i s t a n tt oT M V a n d T O M V w e r e c o n f e r r e db y t h e e x p r e s s i o n o f t h e g e n eT m 一∥．2 ．T h eT m 一，2 g e n ew a s f u s e dw i t hc o n s t i t u t i v ep r o m o t e rC a M V 3 5 S ，w h i c