1、第十章 第十章 常見的致動(dòng)物疾病性病毒 常見的致動(dòng)物疾病性病毒第一節(jié) 口蹄疫病毒口蹄疫病毒（Food and mouth disease virus，F(xiàn)MDV）是牛、豬、羊等偶蹄動(dòng)物口蹄疫的病原?？谔阋吡餍袠O廣，在世界許多國家時(shí)有發(fā)生，對(duì)畜牧業(yè)發(fā)展影響很大，是當(dāng)前世界各國極為重視的家畜傳染病之一。該病也偶見于人和其他動(dòng)物，因而也是一種人畜共患病?？谔阋卟《緦儆谖?RNA 病毒科（Picornaviridae）口蹄疫病毒屬（Aphth

2、ovirus） ，屬內(nèi)只有口蹄疫病毒一種。一、生物學(xué)特性 一、生物學(xué)特性本病毒是動(dòng)物病毒中發(fā)現(xiàn)最早的一種。二十面體對(duì)稱，直徑 20～25nm 無囊膜，病毒基因組為正股單股 RNA。二、抵抗力 二、抵抗力 本病毒對(duì)乙醚有抵抗力，在 1mol/L 氯化鎂中對(duì)熱不穩(wěn)定，對(duì)酸敏感，病毒在 pH 為6.5 的緩沖液中、4℃條件下 14h 滅活 90％，在 pH5.5 時(shí) 1min 滅活 90％，在 pH5．0 時(shí)每秒鐘滅活 90％，pH3．0

3、時(shí)瞬間滅活，病毒在 pH7.0～7.5 時(shí)十分穩(wěn)定。病毒的感染性 RNA在 pH4.0 時(shí)較原病毒穩(wěn)定。由于口蹄疫病毒對(duì)酸特別敏感，故肉中的口蹄疫病毒可進(jìn)行酸化處理，利用肌肉成熟時(shí)所產(chǎn)生的微量酸以殺死病毒。但腺體器官和骨髓中產(chǎn)生酸甚少，往往有病毒殘留。同樣，口蹄疫病毒對(duì)堿也很敏感，1％NaOH 1min 即可殺死。對(duì)消毒劑的抵抗力較強(qiáng)，1:1000 升汞，30％來蘇兒 6 小時(shí)不能殺死病毒。病毒在低溫下能長期保存，含病毒的乳汁經(jīng)巴氏消

4、毒法處理即失去感染力。病毒的滅活溫度為 85℃1min，70℃10min，60℃15min，但裸露的 RNA 對(duì)熱較穩(wěn)定。在冰凍的情況下，骨髓中的病毒可生存 70d，血中病毒能保持毒力 4～5 個(gè)月，肉中病毒能保持毒力 30～40d，水泡皮保存于 5％的甘油中，在 5℃可保持毒力 360～470d。三、抗原性 三、抗原性 根據(jù)病毒的血清學(xué)特征，目前已知口蹄疫病毒有七個(gè)主型：A、O、 C、南非Ⅰ、南非Ⅱ、南非Ⅲ和亞洲Ⅰ型。各型之間沒有

5、相互免疫作用。本病毒有較大的變異性，病毒在保存和流行中，常發(fā)生血清學(xué)的變異，有時(shí)流行初期與末期毒型不一致，幾乎每年都有新的亞型出現(xiàn)，本病毒已發(fā)現(xiàn) 65 個(gè)以上的亞型，某些野毒的亞型在免疫學(xué)上與其原型有顯著區(qū)別。病毒子具有良好的免疫原性，能刺激產(chǎn)生中和抗體，并使動(dòng)物獲得免疫力，病毒的12S 蛋白質(zhì)亞單位亦有良好的抗原性。四、培養(yǎng)特性 四、培養(yǎng)特性1．組織培養(yǎng) 利用犢牛、幼豬的腎臟或豚鼠、牛胚胎上皮組織制成細(xì)胞單層來培養(yǎng)病毒，病毒繁殖后，

6、使細(xì)胞發(fā)生病變。2．雞胚培養(yǎng) 本病毒不易在雞胚上生長，必須反復(fù)交替通過牛與雞胚或在添有牛舌上皮的雞胚組織培養(yǎng)繼代后，才可能適應(yīng)于雞胚或雞胚組織培養(yǎng)。五、致病性 五、致病性在自然條件下，主要發(fā)生于偶蹄獸，其中以奶牛和黃牛最易感，其次是水牛，牦牛、豬，再次為羊和駱駝等。野生偶蹄獸也能發(fā)生，如野牛、野豬、鹿等。人也能感染。此外，當(dāng)發(fā)生惡性口蹄疫時(shí)，狗、貓亦偶爾感染。通常是幼畜較成畜易感。可感染 30 多種動(dòng)物。該病的特點(diǎn)是體溫升高，口腔粘膜

7、、趾部及乳房等處發(fā)生水泡，有時(shí)甚至死亡。合試驗(yàn)和瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)等可測(cè)出具有共同的核蛋白抗原，但應(yīng)用“肽鏈圖譜法”卻發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)分離的街毒之間存在抗原差異。狂犬病毒與其它彈狀病毒沒有抗原關(guān)系。四、培養(yǎng)特性 四、培養(yǎng)特性 通常將死亡動(dòng)物的大腦、小腦，特別是海馬角部分，在無菌條件下取出，研磨，用生理鹽水或肉湯制成 1:5～10 的懸液（如懷疑材料污染時(shí)，可在每毫升懸液中加入青霉素500IU、鏈霉素 500µg） ，低速離心后，取上清

8、液接種于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（小白鼠、豚鼠、家兔等）腦內(nèi)。幼齡小白鼠于接種后 7～10d 發(fā)病死亡，可在腦組織中發(fā)現(xiàn)內(nèi)基氏小體。豚鼠及家兔潛伏期較長，接種后經(jīng) 2～3 周發(fā)病死亡。應(yīng)用 10～15 日齡雞胚，將病毒接種于卵黃囊、絨毛尿囊膜及腦內(nèi)，經(jīng) 3～4d 后雞胚死亡，在腦組織及絨毛尿囊膜上出現(xiàn)嗜酸性顆粒及內(nèi)基氏小體。近年來多用組織培養(yǎng)法，狂犬病病毒可在多種哺乳動(dòng)物（幼齡小白鼠、大白鼠、田鼠、乳兔、羔羊等）腎原代細(xì)胞、雞胚成纖維細(xì)胞、羊胚腎及人胚

9、皮膚肌肉傳代細(xì)胞上生長。這些細(xì)胞在接種病毒后可出現(xiàn)顆粒變性。五、致病性 五、致病性狂犬病病毒幾乎可以感染所有的溫血脊椎動(dòng)物，同樣也能感染人。本病主要由患病動(dòng)物咬傷后而感染。當(dāng)健康動(dòng)物皮膚粘膜有損傷時(shí)，接觸病畜的唾液亦可以感染。病犬的唾液于癥狀出現(xiàn)前 1～2 周便可能會(huì)有病毒。存在于病畜唾液中的病毒，通過咬傷而進(jìn)入易感動(dòng)物的皮下組織，然后沿著神經(jīng)纖維由外周進(jìn)入神經(jīng)中樞。也有人認(rèn)為病毒是由外周經(jīng)血液侵入腦組織。病毒在脊髓和腦組織中增殖，并可

10、按離心方向由中樞神經(jīng)向外擴(kuò)散，而腦脊髓液在病毒擴(kuò)散中，亦起著重要作用，使所有器官都能查出病毒。抵達(dá)唾液腺的病毒，在其上皮細(xì)胞內(nèi)又大量增殖，并進(jìn)入到唾液中。病毒在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的繼續(xù)繁殖，損害神經(jīng)細(xì)胞和血管壁，引起血管周圍的細(xì)胞浸潤。神經(jīng)細(xì)胞受刺激后，首先引起興奮癥狀，如神經(jīng)紊亂和反射性增高，后期神經(jīng)細(xì)胞變性，逐漸引起麻痹，當(dāng)呼吸中樞麻痹后即可造成死亡。六、微生物學(xué)診斷 六、微生物學(xué)診斷常用的特異性檢查方法有包涵體檢查，動(dòng)物試驗(yàn)，熒光抗體

11、檢查等三種。（一）包涵體檢查 取大腦、小腦，特別是海馬角部分，用刀片切開印片，趁印片未完全干燥時(shí)，以塞勒（Seller）氏液染 1～5s，水洗、干燥、鏡檢。內(nèi)基氏小體呈鮮紅色、間質(zhì)呈粉紅色、紅細(xì)胞則為桔紅色。內(nèi)基氏小體為圓形、卵形、核形、阿米巴形。大小為24～27μm，位于細(xì)胞漿內(nèi)。用姬姆薩氏（Giemsa）染色，小體為紅色（圖 10-1） 。由于有些犬、豬和草食獸的病例及病初死亡或早期剖殺動(dòng)物中可能不見包涵體，所以并不是所有的病例都

12、能檢查出包涵體來。（二）動(dòng)物試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如小白鼠、豚鼠、家兔等都可用于診斷，其中以小白鼠最為敏感和經(jīng)濟(jì)，并可提高陽性檢出率。按照病毒的培養(yǎng)方法，給小白鼠腦內(nèi)接種，每只0.03ml。接種后觀察 21d，5d 內(nèi)死亡者淘汰；5d 后發(fā)病者，當(dāng)出現(xiàn)松毛、顫抖、后肢失去平衡、麻痹、虛脫等癥狀時(shí)，可剖殺取腦，作印片，檢查包涵體，如為陽性，即可診斷為狂犬病。動(dòng)物試驗(yàn)雖然準(zhǔn)確，但需要較多的動(dòng)物和較長時(shí)間。為了確診，在病毒鑒定時(shí)，可使用標(biāo)準(zhǔn)免疫血清