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1、I 學校代碼:10564 學 號:2013201616 分 類 號:S668.1 密 級: 碩 士 學 位 論文 論文 香蕉(Musa spp.)阿拉伯聚半乳糖蛋白對低溫脅迫的響應 王瑩瑩 指 導 教 指 導 教 師: 徐春香 教授 學 院 名 學 院 名 稱: 園藝學院 專 業(yè) 名 專 業(yè) 名 稱: 果樹學 答辯委員會主席: 答辯委員會主席: 陳杰忠 教授 中國·廣州 2016 年 6 月 III 摘
2、要 香蕉(Musa spp.)是世界上最重要的熱帶、亞熱帶水果與糧食作物,我國的香蕉生產(chǎn)經(jīng)常遭受低溫冷害的威脅。冷害是指 0℃以上低溫(通常指 0-15℃)對冷敏性植物造成的損傷。植物的細胞壁是抵御外界脅迫的第一道防線,許多研究表明富羥脯氨酸糖蛋白(Hydroxyproline-rich glycoproteins, HRGPs)作為植物細胞壁的一種結構蛋白,在植物抗冷害機制中發(fā)揮著重要作用。HRGPs 重要成員阿拉伯聚半乳糖蛋白(Ar
3、abinoglactan-proteins, AGPs)與植物冷害關系的研究卻非常少見。 本實驗分別以冷敏感的‘巴西蕉’(Musa spp. AAA cv. Baxijiao)和耐冷的‘東莞大蕉’ (Musa spp. ABB cv. Dongguandajiao) 為供試材料, 運用數(shù)字基因表達譜 (Digital gene expression, DGE) 技術和 qPCR 技術研究香蕉 AGP 基因對低溫脅迫在轉錄水平上的響應。此
4、外,還利用 9 種識別 AGP 的單克隆抗體,采用免疫熒光技術研究了自然低溫脅迫下‘巴西蕉’、 ‘東莞大蕉’抗原的分布及差異表達; 并測定了低溫脅迫下不同冷敏感程度香蕉相對電導率、相對含水量、葉片傷害率方等生理指標的變化。分別從分子、細胞和生理水平探討了 AGPs 在不同冷敏感程度香蕉葉片中的差異變化,試圖揭示AGPs 與植物冷害的關系,從而豐富植物抗冷機理,為香蕉抗冷育種工作提供參考。獲得主要研究結果如下: 1.生理水平:人工低溫脅迫
5、下‘巴西蕉’葉片相對電導率、葉片傷害率高于‘東莞大蕉’的;‘東莞大蕉’葉片相對含水量高于‘巴西蕉’的。 2.轉錄水平: (1)DGE 結果表明:人工低溫脅迫下,與 AGP 相關的差異表達基因共 21 個,其中高表達冷響應 AGP 基因共 8 個。 隨著溫度由 25℃降低到 10℃, 8 個相關 AGP 基因的 RPKM 值均表現(xiàn)上升趨勢。 (2)qPCR 結果表明,自然寒潮脅迫下,‘東莞大蕉’中的 8 個 AGPs 基因除MaFLA2-
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