1、近年來(lái)因糖脂代謝異常導(dǎo)致的肥胖人數(shù)增速迅猛，因此世界衛(wèi)生組織（WHO）已將肥胖確定為全球性流行病。因此，從天然食物中尋找具有降脂功能的營(yíng)養(yǎng)活性成分成為干預(yù)或緩解肥胖的研究熱點(diǎn)之一。大麥?zhǔn)俏覈?guó)種植量位居前四的農(nóng)作物，其富含多種生物活性組分，是谷物中的全價(jià)營(yíng)養(yǎng)食物。研究表明，大麥中的β-葡聚糖、黃酮、多酚化合物以及大麥芽堿等多種成分具有抗氧化、抗衰老、降糖降脂等活性，而通過(guò)微生物發(fā)酵能夠有效提升大麥中活性物質(zhì)的含量及其功能，不僅可為食源性天

2、然降脂食品的開發(fā)提供新思路，也可為我國(guó)大麥資源的高效利用開辟新途徑。
　　本論文以大麥為原料，制備大麥提取物（Raw barley extract，RBE），以植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum dy-1）和酵母菌為發(fā)酵菌株，制備植物乳桿菌發(fā)酵大麥提取物（Lactobacillus plantarum dy-1 fermented barley extract，LFBE）及酵母菌發(fā)酵大麥提取物（Saccha

3、romycetes fermented barley extract，SFBE）。通過(guò)分析發(fā)酵前后主要成分的變化探究發(fā)酵大麥提取物的主要活性成分；通過(guò)細(xì)胞模型研究發(fā)酵大麥提取物對(duì)前脂肪細(xì)胞活力與分化的抑制作用，并探索其降脂機(jī)制。主要研究?jī)?nèi)容與結(jié)果如下：
　　1.對(duì)比研究大麥發(fā)酵前后提取物中主要成分的變化及其含量。采用國(guó)標(biāo)等方法測(cè)定了大麥發(fā)酵前后蛋白質(zhì)、多酚化合物、總糖及β-葡聚糖的含量；采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDS-P

4、AGE）分析發(fā)酵前后蛋白質(zhì)分子量的變化與分布；采用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定主要多酚化合物的含量。結(jié)果表明：與RBE相比，LFBE和SFBE中的總糖含量有所下降，但LFBE中β-葡聚糖含量從發(fā)酵前的4.83％為增加至12.80%，而SFBE中β-葡聚糖含量下降至2.01%。LFBE和SFBE中總蛋白質(zhì)和多酚化合物的含量顯著上升，而LFBE中相對(duì)分子質(zhì)量在30~40 kDa之間的蛋白質(zhì)含量均較RBE和SFBE顯著增加；植物乳桿菌、酵母

5、菌發(fā)酵大麥對(duì)多酚化合物含量的影響較為顯著，其中沒(méi)食子酸、香豆酸、原兒茶酸及香草酸含量均有不同程度的增加，而阿魏酸含量則為L(zhǎng)FBE顯著增加、SFBE顯著減少。
　　2.研究不同菌種發(fā)酵大麥提取物對(duì)前脂肪細(xì)胞活力的影響。采用CCK-8試劑盒測(cè)試發(fā)酵大麥提取物對(duì)前脂肪細(xì)胞活力的影響。結(jié)果表明：與RBE相比， LFBE和SFBE均能夠顯著抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞的活力；500μg/mL LFBE和SFBE干預(yù)3T3-L1前脂肪細(xì)胞24

6、h后抑制率分別達(dá)到61.69%與21.94%，其干預(yù)48 h后抑制率分別達(dá)到66.96%與20.80%；而LFBE抑制效果顯著高于SFBE，且其最小半抑制濃度（IC50）為560μg/mL。
　　3.研究不同菌種發(fā)酵大麥提取物及其主要活性組分對(duì)前脂肪細(xì)胞分化的影響。采用油紅O染色法分析發(fā)酵大麥提取物抑制前脂肪細(xì)胞分化的程度并探究其主要活性成分。結(jié)果表明：RBE對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞的分化沒(méi)有抑制作用， LFBE能有效抑制3T3-

7、L1前脂肪細(xì)胞的分化，且抑制率與其濃度呈正相關(guān)；當(dāng)當(dāng)LFBE和SFBE濃度均為400μg/mL時(shí)抑制率分別為58.85%與12.53%，且LFBE抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的效果顯著優(yōu)于SFBE。LFBE中蛋白質(zhì)、總糖均能有效抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞的分化，抑制率分別為34.95%與10.49%，且β-葡聚糖是主要活性成分；而SFBE中蛋白和總糖均未顯現(xiàn)出對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的有效抑制。LFBE和SFBE中的多酚化合物也是

8、抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的活性組分，其抑制率分別為15.38%與9.16%；阿魏酸和香草酸是多酚化合物中抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的主要活性成分。
　　4.研究LFBE抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的作用機(jī)制。采用Realtime PCR分析LFBE對(duì)脂代謝關(guān)鍵基因表達(dá)水平的調(diào)控作用。結(jié)果表明：LFBE和其中的蛋白質(zhì)、多酚類化合物及阿魏酸均能顯著調(diào)節(jié)3T3-L1細(xì)胞脂代謝關(guān)鍵基因C/EBPα、PPAR-γ、SREBP-1