1、重慶 醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2 0 0 5年第 3 0卷第 6 期 ( J o u r n a lo fC h o n g q i n gM e d i c a lU n i v e r s i t y2 0 0 5 ． V O I ． 3 0N O ． 6 )文章編號(hào) ： 0 2 5 3—3 6 2 6 ( 2 0 0 5 ) 0 6— 0 8 6 2— 0 2H L P C法測定木芙 蓉提取 物中蘆丁含量 沈欽 海 ， 陳 國民 ( 重慶醫(yī)

2、科 大學(xué) 病毒性 肝炎研究所 ， 重 慶 4 0 0 0 1 0 )【 摘 要】 目 的 ： 建立木 英蓉 中蘆 丁含量 的 R P — H L P C定量測定方 法。方 法 ： 以蘆丁標(biāo)準(zhǔn) 品為對 照進(jìn)行 反向高效 液相法 測定 ：U b o n d p a kC ．色譜柱 ， 柱溫 2 5 ' E， 在 3 7 0 n m波長處 紫外檢測 ； 流動(dòng)相 ：以 0 ． 0 2 m o l ／ L磷酸二氫鉀緩沖液 ( 含 1 ％冰

3、醋酸 ) 一甲醇 ( 體 積比為 7 3 ： 2 7 ) 組成流動(dòng)相 ， 流速為 1 ． 0 m l ／ mi n ； S P D一2 A S U V檢測 器 ， 于波長 3 7 0 n m檢 測。結(jié)果 ：蘆丁與 木芙蓉 中其他成 分基線分離 良好 ， 進(jìn)樣 量在 ( 0 ． 5～ 5 )g ／ 2 0l 范圍內(nèi)， 峰面積 X與進(jìn) 樣濃 度 Y呈 良好 的線性關(guān) 系 ， 回歸方 程為 Y： 0 ． 0 0 0 1 X十0 ． 1 2 0

4、 8 ， 相關(guān)系數(shù) r = 9 9 ． 8 ％ ， 加樣 回收率為 9 9 ． 8 8 ％ ， R S D為 1 ． 5 4 ％ ( n ： 5 ) ， 結(jié) 論 ： 該方 法處理方 法簡單 ， 準(zhǔn)確率 高 ， 分 離效 能高 ， 適合于木芙蓉中蘆丁含量的測定。【 關(guān)鍵詞 】 反相高效液相色譜 ； 木 芙蓉 ； 蘆丁 【 中國圖書分類法分類號(hào) 】 R 3 3 — 3 3 ， R 2 8 2【 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí) 碼】 A【 收稿 日 期 】 2 0

5、 0 5 — 0 3 — 2 4Co n t e n td e t e r mi n a t i o no fRu t i ni nHi b i s c u smu t a b i l i sLb yHL PC s H E NO i n h a． e ta l( I n s t i t u t ef o rV i r a lH e p a t i t i s ，C h o n g q i n gMe d i c a lU n i v e

6、 r s i t y )【 A b s t r a c t 】 O b j e c t i v e ： T oe s t a b l i s ham e t h o df o rc o n t e n td e t e r m i n a t eo fR u t i ni nHi b i s c u sm u t a b i l i sLb yR T —H L P C ．M e t h o d s ： T h ec h r o ma t

7、 o g r a p h i cc o n d i t i o n swe r ea sf o l l o w s ：Co l u mn：Ub o n d p a kCl 8 ；t h ec o l u mnt e mp e r a t u r ewa s2 5 ' Ea n dt h ed e t e c t i o nwa v e l e n g t hw a s3 7 0 n m； Mo b i lp h a s ec o

8、 n s i s t e do f 0 ． 0 2 m o l ／ LK H2 P O 4s o l u t i o nc o t a i n i n g1 ． 0 ％ g l a c i a la c e t i ca c i d—m e t h a n o l ( 7 3 ： 2 7 ， v ： v ) ．T h ef l o wr a t ewa s1 ． 0ml ／mi n ．S P D 一2 A S UVd e t e c t

9、 o rw a su s e d ．T h es t a n d a r ds a mp l ew a su s e da sc o n t r o 1 ．Re s u l t s ：G o o dl i n e a r i t yw a so b —t a i n e df orR u t i na n do t h e rc o m p o n e n t si nt h er a n g eo f( 0 ． 5～ 5 )g ／ 2

10、 01 ．P e a ka r e aw a sf a v o r a b l el i n e rb e t w e e nt h ec o n c e n t r a t i o no fRu t i ni nr a n g e． T h er e g re s s i o ne q u a t i o nwa sY ：0 ． 0 0 01 X +0． 1 2 0 8， c o r r e l a t i o nc o e f f

11、i c i e n tr =9 9 ． 8 ％ ， T h er e c o v e r yr a t ewa s9 9． 8 8 ％ ，R S Dw a s1 ． 5 4 ％ ( n： 5 ) ．C o n c l u s i o n ： T h em e t h o di sc o n v e n i e n t ， p r e c i s e ， r e s u l t i n gi nh i g hs e p a r a t e

12、e f f i c a c y ． a n ds u i t e df o rt h ec o n ．t e n td e t e r m i n a t i o no fRu t i ni nHi b i s c u smu t a b i l i sL ．【 K e yw o r d s 】R T —H L P C ； Hi b i s c u sm u t a b i l i sL ； R u t i n木芙蓉屬槿葵科木屬植物，

13、其花 、 葉和根均可入 藥。具有清熱解毒 、 消腫排毒 、 涼血止血之功用， 在 民問廣泛用于治療癰腫瘡疥。文獻(xiàn)記載該藥外用和 口服有很好的抗炎 、 消腫作 用， 可以治療 闌尾炎 、 腮 腺炎 ， 也可 以治療關(guān) 節(jié)炎 、 丹毒 等。符詩聰?shù)?#168;研 究發(fā)現(xiàn)木芙蓉有效成分具有明顯的抗炎作用。陳文 吟等 通過研究發(fā)現(xiàn)木芙蓉葉提取液對 2 ． 2 ． 1 5細(xì) 胞表達(dá) H B s A g 、 H B e A g均有抑制作用。近年研究

14、證 明， 其主要 化學(xué) 成分 為 黃酮 甙 ， 包括 槲 皮 甙 ( u e r —c i t r i n ) 、 異 槲 皮 甙 ( i s o q e r c i t r i n ) 、 金 絲 桃 甙 ( h y p e r o —s i d e ) 和繡線 菊 甙 ( p i r a e o s i d e ) ， 及 花 色甙等 j 。陳 作者介紹 ： 沈欽海( 1 9 6 6一) ， 男， 主治 醫(yī)師， 博 土主要研究方向

15、 ： 病毒性 肝炎的治療 。邕 用 H P L C測定朱砂蓮膠 囊中馬兜鈴酸 A含量 的方 法 ， 效 果 好 ， 定 量 準(zhǔn) 確 ， 快 速。本 實(shí) 驗(yàn) 采 用 H P L C法測定木芙蓉提取物 中蘆丁含量也達(dá)到同樣 效 果 。1 材料 和方 法 1 ． 1藥品和試劑 樣 品 ： 木芙蓉 ( 重慶 市三 峽庫 區(qū)) 。對 照品 ： 蘆丁 ( 安徽省甙爾天 然有 機(jī)化 物信 息中心) 。試劑 ： 磷酸二氫鉀 、 甲醇 、 冰醋 酸( 重

16、 慶西南化 學(xué)試劑 有 限公 司) 。1 ． 2 儀 器和 色譜 條件 儀器 ： B e c k m a n11 4 MS o l v e n tD e l i v e r yM o d u l e 色譜儀 。色譜條件 ： 色譜柱 C。 ； 流動(dòng)相 ： 含 1 ％冰醋 酸的磷 酸二 維普資訊 http://www.cqvip.com 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2 0 o 5年第 3 0卷第 6~ J ( J o u r n a lo fC h

17、o n g q i n c jMe d i c a lUn i v e r s i t y2 ． 8 @ 5 ． V o 1 ． 3 ON o ． 6 )一 8 8 3一 整個(gè)治療過程 中， 肺泰膠囊無不 良事件發(fā)生。血常 規(guī)、 肝腎功能 、 尿常規(guī)治療前后 比較均無明顯變化。3 討 論 目前全球范圍內(nèi)肺結(jié)核 的發(fā)病呈增多趨勢 ， 尤 其是耐藥結(jié)核的增多使疫情更加嚴(yán)重 ， 遵循結(jié)核病 的治療原則 ， 重視初治肺結(jié)核的治療 ， 尋求更有

18、效的 抗結(jié)核治療方法和開發(fā)新藥成為迫切需要?？菇Y(jié)核 治療需要多種藥物聯(lián)合長期使用 ， 不 良反應(yīng)增加 ， 病 人依從性差。近年來 ， 尋求有效 的毒副反應(yīng)小 的抗 結(jié)核中藥制劑為一個(gè)新的研究方向。肺泰膠囊是湖南泰來藥業(yè)公司在民問驗(yàn)方的基 礎(chǔ)上研制而成的一種中藥制劑 ， 由百部 、 黃芩、 白及 、瓜蔞 、 川貝母等多味中藥組成。白及在試管內(nèi)對人 型結(jié)核桿菌有顯著的抑制作用 ， 在體外對結(jié)核桿菌 的生長也有抑制作用。 。。百部醇浸劑在 I

19、 ： 8 0濃度 下 l O m i n內(nèi)可將人型結(jié)核桿菌殺死 。該制劑具有 潤肺殺蟲 、 清熱化痰 的功效 ， 基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)及 I 、 Ⅱ 期 臨 床試驗(yàn)證實(shí)該藥具有 良好 的抗結(jié)核菌作用。在抗結(jié) 核新藥的I 臨 床療效考查中， 現(xiàn)常用“ 早期殺菌活性”這一指標(biāo) ， 即觀察治療 2個(gè)月時(shí)痰菌陰轉(zhuǎn)率， 從而估 量藥物的滅菌活性 。本文臨床研究結(jié)果表明： 肺 泰膠囊與抗結(jié)核化療藥物( 西藥 ) 聯(lián)合 治療初治 活 動(dòng)性肺結(jié)核 ， 治療 2月后

20、痰結(jié)核菌陰轉(zhuǎn)率 明顯高于 對照組 ， 表明肺泰膠囊能提高痰結(jié)核菌陰轉(zhuǎn)率 ， 加快 痰菌陰轉(zhuǎn)速度 。結(jié)核病 為一種傳染病 ， 早期 的有效 治療可以縮短傳染期 ， 減弱痰結(jié)核菌陽性病人 的傳 染性 ， 盡早達(dá)到控制傳染源的目的， 從而可能減少結(jié) 核病的新發(fā)病例。本研究 中試驗(yàn)組和對照組的耐藥 病例治療 6月后痰結(jié)核菌均全部陰轉(zhuǎn)可能與方案中 有兩種敏感西藥有關(guān) ， 肺泰膠囊對耐藥結(jié)核是否有 效還需進(jìn)一步研究 。肺結(jié)核的I 臨床療效考核指標(biāo)除

21、 了痰菌陰轉(zhuǎn)情況外 ， x線胸片上病灶 和空洞 的吸收 變化也是非常重要的。本研究中試驗(yàn)組治療 2月后 X線胸片上病灶顯吸率明顯高于對照組 ， 治療 6月后全吸率也高于對照組 ( P< 0 ． 0 5 ) ， 表明肺泰膠囊 能提高病灶吸收率 ， 加快病灶吸收好轉(zhuǎn)速度 。試驗(yàn) 組空洞閉合率在治療 2 月和 6月后均 明顯高于對照 組 ( P< 0 ． 0 0 1 ) ， 表 明肺泰膠囊能提高空洞閉合率 ，加快空洞閉合速度 。因

22、此 ， 肺泰膠囊協(xié) 同化療藥物 ( 西藥 ) 能提高抗結(jié)核療效。整個(gè)治療過程 中， 服用 肺泰膠囊的試驗(yàn)組病例未出現(xiàn)不 良反應(yīng)。本研究結(jié)果說明肺泰膠囊用于初治肺結(jié)核的輔 助治療是有效的 ， 安全的， 與化療藥物聯(lián)合治療初治 肺結(jié)核能增強(qiáng)療效 ， 加速痰結(jié)核菌陰轉(zhuǎn)和病灶吸收 好轉(zhuǎn) ， 提高空洞閉合率。參 考 文 獻(xiàn) [ 1 ] 王本祥． 現(xiàn)代 中藥藥理 學(xué) [ M] ． 天津 ： 天津科 學(xué)技術(shù) 出版社 ， 1 9 9 7 ； 8 0 2

23、 ．[ 2 ]王本祥． 現(xiàn)代 中藥藥理 與臨床 [ M] ． 天 津 ： 天津科技 翻 譯 出版公 司， 2 0 0 4 ； 5 7 9 ．[ 3 ]謝 惠 安 ， 陽 國太 ， 林 善 梓 ， 等． 現(xiàn) 代 結(jié) 核病 學(xué) [ M] ． 北 京 ： 人民衛(wèi)生 出版社 ， 2 0 0 0 ； 5 2 7 ．( 上接第 8 6 3頁)以下 ； 蘆丁的回收率 9 9 ． 8 8 ％， R S D= 1 ． 5 4 ％。4 討 論 用 H P

24、L C法測定木芙蓉中蘆丁的樣品含量尚未 見報(bào)道， 本文建立了木芙蓉提取物 中有效成分 的定 量方法， 與紫外分 廣度法 比較， 該方法簡單 ， 且能快 速 、 簡便 、 準(zhǔn)確地測定木芙蓉 中的蘆丁的含量 ， 方法 的精密度和回收率都較好。參 考 文 獻(xiàn) [ 1 ]符詩 聰 ， 張風(fēng)華 ， 史煒 鑌 ， 等． 木 芙蓉有 效成 分 的抗炎 實(shí)驗(yàn)研究 初 步報(bào) 告 [ J ] ．上海第 二 醫(yī)科 大 學(xué) 學(xué)報(bào) ， 2 0 0 1 ； 2 1

25、( 1 ) ： 1 4—1 6 ．[ 2 ]陳文吟 ， 李 銳 ， 葉木榮 ， 等． 肝 毒清 方單 味藥水 提物 的體外抗 H B V作用 [ J ] ． 中藥材 ， 1 9 9 9 ； 2 2 ( 9 ) ： 4 6 3 — 4 6 5 ．[ 3 ]林 宇 星 ， 施 俊人 ， 莊 捷 ， 等 ． H L P C法 測定 木芙 蓉 中槲皮甙的含量 [ J ] ． 福 建中醫(yī)學(xué) ， 2 0 0 0 ； 1 2 ( 3 1 ) ： 4